Home Cell Cycle Aurora Kinase inhibitor MK-5108

solo para uso en investigación

MK-5108 Aurora Kinase inhibitor

Cat. No.: S2770

MK-5108 (VX-689) is a highly selective Aurora A inhibitor with IC50 of 0.064 nM in a cell-free assay and is 220- and 190-fold more selective for Aurora A than Aurora B/C, while it inhibits TrkA with less than 100-fold selectivity. This compound induces autophagy. Phase 1.
MK-5108 Aurora Kinase inhibitor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 461.94

Saltar a

Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.17%
99.17

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
BL21 (DE3) Rosetta Function assay 30 mins Inhibition of His-tagged human Aurora A kinase (122 to 40 residues) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta cells using biotinylated STK2 substrate incubated for 30 mins by HTRF assay, IC50 = 0.000064 μM. 27391133
HeLa Kyoto Function assay 20 hrs Inhibition of Aurora A kinase autophosphorylation at Thr288 in human HeLa Kyoto cells incubated for 20 hrs, IC50 = 0.3 μM. 27391133
HCC1143 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human HCC1143 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.42 μM. 28918096
AU565 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human AU565 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.45 μM. 28918096
MCF7 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human MCF7 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.52 μM. 28918096
HCC1806 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human HCC1806 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.56 μM. 28918096
CAL851 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human CAL851 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.74 μM. 28918096
HeLa Function assay 16 mg/kg 2 days Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 16 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 1.7 μM. 28918096
HeLa Function assay 32 mg/kg 2 days Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 32 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 4.4 μM. 28918096
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL Function assay 120 mins Inhibition of human N-terminal His-tagged Aurora A expressed in Escherichia coli BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL cells using 5-carboxy-fluorescein-y-aminobutyric acid-Ala-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly-NH2 as substrate after 120 mins by fluorescence polarization as, IC50 = 0.00054 μM. ChEMBL
HeLaS3 Cytotoxicity assay 3 days Cytotoxicity against human HeLaS3 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by WST-8 assay, IC50 = 1.26 μM. ChEMBL
Haga clic para ver más datos experimentales de líneas celulares

Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 461.94 Fórmula

C22H21ClFN3O3S

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 1010085-13-8 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos VX-689 Smiles C1CC(CCC1OC2=C(C(=CC=C2)Cl)F)(CC3=NC(=CC=C3)NC4=NC=CS4)C(=O)O

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 92 mg/mL (199.16 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
In vitro

MK-5108 inhibits Aurora-A activity in an ATP-competitive manner. This compound shows robust selectivity against the other family kinases Aurora-B (220-fold) and Aurora-C (190-fold) in the biochemical assay. It also reveals high selectivity for Aurora-A over other protein kinases. The compound inhibits only one kinase (TrkA) with <100-fold selectivity. It may be more Aurora-A selective than MLN8054. Consistent with the induction of pHH3-positive cells, this chemical induces accumulation of cells in the G2-M phase. It inhibits the proliferation of tumor cells including HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 and CAL85-1 with an IC50 of 0.42 μM, 0.45 μM, 0.52 μM, 0.56μM and 0.74 μM, respectively. This compound decreases cell viability in a dose-dependent fashion in all three cell lines including LEIO285, LEIO505 and SK-LSM1 cells with an IC50 of approximately 100 nM. Incubation with it in LEIO285 increases the proportion of cells in G2/M at 48 and 72 hours post-treatment. The compound significant increases in Caspase 3/7 activity when compared to DMSO-treated control cultures at both time points. In LEIO505 cells, it leads to more cells accumulating at G2/M phases at 24 hours but not 48 hours or 72 hours.  
Ensayo de quinasa
Ensayos bioquímicos de quinasas
La proteína Aurora-A humana recombinante con etiqueta His se expresa en Escherichia coli y se purifica con una columna HisTrap HP. Se adquieren las proteínas Aurora-B y Aurora-C humanas recombinantes purificadas. Los experimentos se realizan por quintuplicado en placas de 96 pocillos. La reacción del ensayo de Aurora-A se lleva a cabo en presencia de 20 μM de ATP, 25 μM de Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 1,0 μCi por pocillo de [γ-33P]-ATP, 0,1 ng por pocillo de Aurora-A en 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM de Mg(OAc)2 y 0,2 mM de EDTA a 30°C durante 40 minutos. Para investigar el modo de inhibición de MK-5108 para Aurora-A, se determinan los valores de IC50 de este compuesto en presencia de diferentes concentraciones de ATP. Luego, el valor de IC50 se grafica en función de la concentración de ATP para analizar el efecto de la concentración de ATP en el valor de IC50 de este químico. La reacción del ensayo de Aurora-B se lleva a cabo en presencia de 15 μM de ATP, 100 μM de Kemptide (GLRRASLG-NH2), 1,0 μCi por pocillo de [γ-33P]-ATP, 5,0 ng por pocillo de Aurora-B en 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM de Mg(OAc)2 y 0,2 mM de EDTA a 30 °C durante 20 minutos. La reacción del ensayo de Aurora-C se lleva a cabo en presencia de 40 μM de ATP, 100 μM de Kemptide, 1,0 μCi por pocillo de [γ-33P]-ATP, 15 ng por pocillo de Aurora-C en 10 mM de MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM de Mg(OAc)2, 1 mM de (±) DTT y 1 mM de EGTA a 30°C durante 20 minutos. Después de que las reacciones de quinasa se terminan agregando 2,0 % de ácido fosfórico, el Tetra-Kemptide o Kemptide se atrapa en la placa MultiScreen-PH. Los pocillos se lavan cinco veces con 0,64 % de ácido fosfórico y luego se monitorea la radioactividad en un contador de centelleo líquido.
In vivo

MK-5108 induces pHH3-positive cells at doses of 16 mg/kg and 32 mg/kg. Plasma concentration of this compound at 8 mg/kg and 16 mg/kg are 1.7 μM and 4.4 μM, respectively. This compound treatment results in the induction of pHH3 in tumor and skin tissues, which starts at 2 hours and reachs a maximum at 4 hours. This chemical treatments at 15 mg/kg and 30 mg/kg results in significant tumor growth inhibition with the change in mean tumor volume for the treatment group as a percentage of the mean change in the control group (%T/C) of 10% and −6% at day 11, and 17% and 5% at day 18, respectively. It is well tolerated at both doses, with minimal reduction in body weight. This compound also exhibits significant antitumor activity through intermittent dosing in nude rats bearing SW48 tumors, it at 15 mg/kg and 45 mg/kg causes dose-dependent tumor growth inhibition with a %T/C of 35% and 7% at day 10, and 58% and 32% at day 27, respectively.

Referencias

Aplicaciones (Applications)

Métodos Biomarcadores Imágenes PMID
Western blot p-Aurora A / Aurora-A / N-MYC
S2770-WB1
29262328
Growth inhibition assay Cell viability
S2770-viability1
24756365