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Hesperadin Inhibidor de Aurora B

Cat. No.: S1529

Hesperadin inhibe potentemente Aurora B con un IC50 de 250 nM en un ensayo sin células. Reduce notablemente la actividad de AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1 y PHK, mientras que no inhibe la actividad de MKK1 in vivo.
Hesperadin Aurora Kinase Inhibidor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 516.65

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.09%
99.09

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
HepG2 cells Cytotoxicity assay 48 h Cytotoxicity against human HepG2 cells after 48 hrs by MTT assay, TC50=0.2 μM
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Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 516.65 Fórmula

C29H32N4O3S

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 422513-13-1 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles CCS(=O)(=O)NC1=CC2=C(C=C1)NC(=C2C(=NC3=CC=C(C=C3)CN4CCCCC4)C5=CC=CC=C5)O

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 100 mg/mL (193.55 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TbAUK1
(Cell-free assay)
40 nM
Aurora B (human)
(Cell-free assay)
250 nM
In vitro
Hesperadin inhibits the ability of immunoprecipitated Aurora B to phosphorylate histone H3 with IC50 of 250 nM and markedly reduces the activity of other kinases (AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1, and PHK) at a concentration of 1 μM. In contrast, only 20-100 nM of this compound is sufficient to induce the loss of mitotic histone H3-Ser10 phosphorylation in HeLa cells. Its treatment causes defects in mitosis and cytokinesis, leading to stoppage of proliferation of HeLa cells and polyploidization, which can be specifically ascribed to the inhibition of Aurora B function during the process of chromosome attachment. This compound (100 nM) quickly overrides the mitotic arrest induced by taxol or monastrol but not by nocodazole. It and nocodazole treatment in HeLa cells abolishes kinetochore localization of BubR1 and diminishes the intensity of Bub1 at kinetochores, suggesting that Aurora B function is required for efficient kinetochore recruitment of BubR1 and Bub1, which in turn might be necessary for prolonged checkpoint signaling. It prevents the phosphorylation of recombinant trypanosome histone H3 by the T. brucei Aurora kinase-1 (TbAUK1) from pathogenic Trypanosoma brucei with IC50 of 40 nM in vitro kinase assays. This chemical significantly inhibits cell growth of cultured infectious bloodstream forms (BF) with IC50 of 48 nM, and only weakly inhibits cell growth of insect stage procyclic forms (PF) with IC50 of 550 nM.
Ensayo de quinasa
El ensayo de la quinasa Aurora B
Para el ensayo de la quinasa Aurora B, las células HeLa se lisan en un tampón que contiene 50 mM de NaCl. El extracto celular completo se centrifuga a 13.000 rpm durante 20 minutos a 4 °C utilizando una centrífuga de mesa. El sedimento obtenido de 200 mg de extracto celular completo se extrae de nuevo en 15 mL de tampón de lisis que contiene 250 mM de NaCl para obtener la quinasa Aurora B activa de la cromatina mitótica. El sobrenadante de baja velocidad de este último extracto se utiliza para la inmunoprecipitación. El anticuerpo monoclonal de ratón anti-AIM-1, o el anticuerpo de ratón anti-HA, se acopla a GammaBind Plus Sepharose, y las perlas se giran de un lado a otro en el extracto durante 90 minutos a 4 °C. Las perlas se lavan, se alicuan y se lavan en tampón de quinasa (20 mM Tris, pH 7,5, 150 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 10 mM NaF). El ensayo de quinasa se realiza con 10 μL de perlas en 20 μL de tampón de quinasa que contiene 5 μg de histona H3, 10 μM de ATP, 2,5 μCi de [γ-32P]ATP y diferentes concentraciones de este compuesto durante 20 minutos a 37 °C. Se añade tampón de muestra SDS, y las muestras se hierven y se resuelven por SDS-PAGE. El gel se seca y la señal radiactiva se detecta mediante análisis de PhosphorImager. Los datos se analizan utilizando el software ImageQuant.
Referencias

Aplicaciones (Applications)

Métodos Biomarcadores Imágenes PMID
Western blot trypanosome histone H3
S1529-WB1
19320832