Name: DAPT
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2215
Rating: 5 (399 reviews)

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.99%

99.99

Productos que se suelen utilizar junto con DAPT

GI254023X (GI4023)

This compound and GI254023X block NOTCH activation in PC3 cells co-cultured with OP9-DLL1/OP9 cells.

SU 5402

This compound and SU5402, along with other small molecule inhibitors, accelerate the derivation of functional, early-born cortical neurons from human pluripotent stem cells (hPSCs).

SB431542

This compound and SB431542, along with other small molecules, efficiently reprogram cultured human fetal astrocytes into functional neurons.

Y-27632 Dihydrochloride

This compound and Y-27632 2HCl, along with other small molecule compounds, are used for In vitro stimulation of muller (MCs)/TR-MUL5 cells.

Dianas relacionadas	HDAC Caspase Proteasome MMP HCV Protease Cysteine Protease DPP Tyrosinase HIV Protease Serine Protease
Otros Secretase Inhibidores	RO4929097 (RG-4733) LY411575 Nirogacestat (PF-03084014) Dibenzazepine (YO-01027) Avagacestat (BMS-708163) Semagacestat (LY450139) MK-0752 MDL-28170 L-685,458 NGP 555

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Formulación	Descripción de la actividad	PMID
Function assay	THP1				Displacement of [3H]IN973 from gamma-secretase in human THP1 cells, acvalue.	17932033
GC-B	Growth Inhibition Assay	6.25-100 μM	24 h	DMSO	inhibits the cell growth in a dose-dependent manner	19542446
U87	Function Assay	2 μM	48 h	DMSO	blocks t-AUCB-induced activation of the p38 MAPK/MAPKAPK2/Hsp27 pathway and inhibits expression of NICD1	24793313
A549	Growth Inhibition Assay	10 μM	24h		decreases the cell viability combined with PTE	23671619
U87	Growth Inhibition Assay	2 μM	48 h	DMSO	strengthens t-AUCB-induced cell growth suppression	24793313
U251	Function Assay	2 μM	48 h	DMSO	blocks t-AUCB-induced activation of the p38 MAPK/MAPKAPK2/Hsp27 pathway and inhibits expression of NICD1	24793313
U251	Growth Inhibition Assay	2 μM	48 h	DMSO	strengthens t-AUCB-induced cell growth suppression	24793313
Saos-2	Function Assay	100 μM	24 h	DMSO	desensitizes the cell line to cisplatin treatment	24894297
MG63	Function Assay	100 μM	24 h	DMSO	desensitizes the cell line to cisplatin treatment	24894297
SHG-44	Growth Inhibition Assay	0.5-10 μM	1-5 d		inhibits the cell viability at the optimal concentration of 1 μM	25063285
A549 CD133−	Growth Inhibition Assay	2 μM	48 h		enhances cell growth inhibition induced by CDDP	24502949
A549 CD133+	Growth Inhibition Assay	2 μM	48 h		enhances cell growth inhibition induced by CDDP	24502949
HT29	Growth Inhibition Assay	0.5-75 μM	12/24/48 h	DMSO	inhibits the cell growth in a concentration manner	25257945
Cytotoxicity assay	SNU475		72 hrs		Cytotoxicity against human SNU475 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Displacement of [3H]IN973 from gamma-secretase in human THP1 cells, acvalue..	ChEMBL
Cytotoxicity assay	HuH7		72 hrs		Cytotoxicity against human HuH7 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Cytotoxicity against human SNU475 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Displacement of [3H]IN973 from gamma-secretase in human THP1 cells, acvalue...	ChEMBL
Cytotoxicity assay	Hep3B		72 hrs		Cytotoxicity against human Hep3B cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Cytotoxicity against human HuH7 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Cytotoxicity against human SNU475 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Displacement of [3H]IN973 from gamma-secretase in human THP1 cells, acvalue....	ChEMBL
Cytotoxicity assay	Mahlavu		72 hrs		Cytotoxicity against human Mahlavu cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Cytotoxicity against human Hep3B cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Cytotoxicity against human HuH7 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Cytotoxicity against human SNU475 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, Displacement of [3H]IN973 from gamma-secretase in human THP1 cells, acvalue.....	ChEMBL
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	432.46	Fórmula	C₂₃H₂₆F₂N₂O₄	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	208255-80-5	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	GSI-IX, LY-374973			Smiles	CC(C(=O)NC(C1=CC=CC=C1)C(=O)OC(C)(C)C)NC(=O)CC2=CC(=CC(=C2)F)F

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 86 mg/mL (198.86 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 41 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.550mg/ml (1.27mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 11 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG 300 2 5%Tween80 3 50% ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	2.000mg/ml (4.62mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 40 mg/mL clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify; add 50 μL of Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify; Then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	Notch Aβ (HEK 293 cells) 20 nM
In vitro	En cultivos neuronales primarios humanos, DAPT también muestra efectos inhibidores sobre la producción de Aβ con una IC50 de 115 nM y 200 nM respectivamente para Aβ total y Aβ42, lo cual es 5-10 veces menor de lo observado en células HEK 293. Un estudio reciente muestra que este compuesto inhibe la proliferación de células SK-MES-1 de manera dependiente de la concentración con una IC50 de 11,3 μM. Además, también induce apoptosis dependiente e independiente de caspasas en células de carcinoma de células escamosas pulmonares al inhibir la vía de señalización del receptor Notch.
Ensayo de quinasa	Ensayos de reducción de Aβ in vitro
Ensayo de quinasa	Se utilizan células de riñón embrionarias humanas (American Type Culture Collection CRL-1573), transfectadas con el gen para APP751 (HEK 293) para ensayos rutinarios de reducción de Aβ. Las células se siembran en placas de 96 pocillos y se dejan adherir durante la noche en medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) suplementado con 10% de suero fetal bovino inactivado por calor. DAPT se diluye a partir de soluciones madre en dimetilsulfóxido (DMSO) para obtener una concentración final igual a 0,1% de DMSO en el medio. Las células se pretratan durante 2 horas a 37 °C con este compuesto, se aspiran los medios y se aplican soluciones frescas del compuesto. Después de un período de tratamiento adicional de 2 horas, se retira el medio condicionado y se analiza mediante un ELISA sándwich (266–3D6) específico para Aβ total. La reducción de la producción de Aβ se mide en relación con las células de control tratadas con 0,1% de DMSO y se expresa como un porcentaje de inhibición. Los datos de al menos seis dosis por duplicado se ajustan a un modelo logístico de cuatro parámetros utilizando el software XLfit para determinar la potencia. Los cultivos neuronales humanos y de ratón PDAPP se cultivan en medios sin suero para mejorar sus características neuronales, y parecían ser más del 90% neuronas después de la maduración antes de su uso. Los medios condicionados para establecer los valores basales de Aβ se recolectan añadiendo medios frescos a cada pocillo e incubando durante 24 horas a 37 °C en ausencia de este químico. Las culturas se tratan luego con medios frescos que contienen este compuesto en el rango deseado de concentraciones durante 24 horas adicionales a 37 °C, y se recolectan los medios condicionados. Para la medición de Aβ total, las muestras se analizan con el mismo ELISA (266–3D6) que se utiliza para los ensayos de células HEK 293. Los análisis de muestras para la producción de Aβ42 se realizan mediante un ELISA separado (21F12–3D6) que utiliza un anticuerpo de captura específico para el C-terminal de Aβ42. La inhibición de la producción de Aβ total y Aβ42 se determina por la diferencia entre los valores del tratamiento con el compuesto y los períodos basales. Después de graficar el porcentaje de inhibición versus la concentración de este compuesto, los datos se analizan con el software XLfit, como se indicó anteriormente, para determinar la potencia.
In vivo	La administración de DAPT (100 mg/kg) conduce a un efecto farmacodinámico robusto y sostenido en ratones PDAPP, donde los niveles de este compuesto en el cerebro superan los 100 ng/g en 1 hora y persisten hasta 18 horas después de la administración, con niveles máximos de 490 ng/g observados después de 3 horas. Y durante el período, este químico (100 mg/kg) también reduce el Aβ total cortical y el Aβ42 de manera dosis-dependiente con una reducción del 50%. En las cortezas cerebrales de rata, este compuesto (40 mg/kg) suprime la actividad de γ-secretase inducida por LPS y aumenta la apoptosis celular con la neuroinflamación prolongada.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11145990/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22583356/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22445932/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	PMID
Western blot	NICD / Pax7 / Pax3 / MyoD / Myogenin / p21 Bax / caspase-3 / Bcl-2 Snail / N-cadherin / Vimentin / E-cadherin	18957511
Growth inhibition assay	Cell viability	27118928
Immunofluorescence	CDK5	18662245

Información del ensayo clínico

(datos de https://clinicaltrials.gov, actualizado el 2024-05-22)

Número NCT	Reclutamiento	Condiciones	Patrocinador/Colaboradores	Fecha de inicio	Fases
NCT06292117	Recruiting	Ischemic Stroke\|CYP2C19 Polymorphism	University of Virginia\|American Heart Association	April 16 2024	--
NCT06074549	Recruiting	Coronary Artery Disease	Elixir Medical Corporation	March 10 2024	--
NCT06223607	Recruiting	Baseline Thrombocytopenia	Methodist Health System	August 22 2022	--

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

Preguntas frecuentes

Pregunta 1:
I would like to ask if you would recommend it used in endothelial cells (e.g. both murine and human endothelial cells).

Respuesta:
I think this compound can be used in endothelial cells from both human and mouse, please see the following reference: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19481797; http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2615564/

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

DAPT inhibidor de γ-Secretase

Estructura química

Peso molecular: 432.46