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CHIR-124 Chk inhibidor

Cat. No.S2683

CHIR-124 es un nuevo y potente inhibidor de Chk1 con una IC50 de 0,3 nM en un ensayo sin células. Muestra una selectividad 2.000 veces mayor contra Chk2 y una actividad entre 500 y 5.000 veces menor contra CDK2/4 y Cdc2.
CHIR-124 Chk inhibidor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 419.91

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.48%
99.48

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells, EC50=0.08 μM
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells in presence of camptothecin
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular 419.91 Fórmula

C23H22ClN5O

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 405168-58-3 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles C1CN2CCC1C(C2)NC3=C(C(=O)NC4=C3C=C(C=C4)Cl)C5=NC6=CC=CC=C6N5

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : Insoluble
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
0.3 nM
FLT3
(Cell-free assay)
5.8 nM
PDGFR
(Cell-free assay)
6.6 nM
GSK-3
(Cell-free assay)
23.3 nM
In vitro

CHIR-124 es una pequeña molécula basada en quinolonas que no está estructuralmente relacionada con otros inhibidores conocidos de Chk1. Este compuesto interactúa sinérgicamente con venenos de topoisomerasa (por ejemplo, Camptotecina o SN-38) causando la inhibición del crecimiento en una variedad de líneas celulares cancerosas, incluyendo el carcinoma de mama (MDA-MB-231 y MDA-MB-435) y el carcinoma de colon (SW-620 y Colo205), todas las cuales contienen el gen p53 mutante. Abroga los Cell Cycle Checkpoints S y G2-M inducidos por SN-38 y potencia la apoptosis en células de cáncer de mama MDA-MD-435. La abrogación del Cell Cycle Checkpoint G2-M y la inducción de apoptosis por este químico se potencian con la pérdida de p53. Este compuesto también se dirige potentemente a otras quinasas como PDGFR y Flt3 con IC50 de 6,6 nM y 5,8 nM, respectivamente.

Ensayo de quinasa
Chk1 Assay
Para el ensayo Chk1, el dominio quinasa se expresa en células de insecto Sf9, y un péptido cdc25c biotinilado que contiene el sitio de fosforilación consenso Chk1/Chk2 (*) (biotin-[AHX]SGSGS*GLYRSPSMP-ENLNRPR[CONH2]) se utiliza como sustrato. Una serie de diluciones de CHIR-124 se mezcla con un tampón de reacción de quinasa que contiene una concentración final de 30 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 2 mM DTT, 4 mM EDTA, 25 mM β-glicerofosfato, 5 mM MnCl2, 0,01% de albúmina sérica bovina, 1,35 nM de dominio quinasa CHK1, 0,5 μM de sustrato peptídico y 1 AM de ATP no marcado, más 5 nM de ATP marcado con 33Pγ (actividad específica = 2.000 Ci/mmol). Las reacciones y la detección de la transferencia de fosfato se realizan mediante un método radiactivo. Las reacciones se incuban a temperatura ambiente durante 1 a 4 horas y el péptido fosforilado se captura en placas de micropocillos recubiertas de estreptavidina que contienen tampón de parada de reacción (25 mM EDTA [ácido etilendiaminotetraacético], 50 mM HEPES, pH 7,5). El péptido fosforilado se mide con el sistema DELFIA TRF utilizando un anticuerpo antifosfotirosina PT66 marcado con europio. La concentración de este compuesto para la IC50 se calcula mediante regresión no lineal con el software de análisis de datos XL-Fit.
In vivo

CHIR-124 potencia los efectos inhibidores del crecimiento al abolir el Cell Cycle Checkpoint G2-M y aumentar la apoptosis tumoral en un modelo de xenoinjerto ortotópico de cáncer de mama.
Referencias

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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