Name: Agerafenib (CEP-32496)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8015
Rating: 5 (6 reviews)

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Lote: S801501 DMSO]9 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Pureza: 99.19%

Citado en Nature Medicine por su máxima calidad
COA
NMR
HPLC
SDS
Hoja de datos

99.19

Dianas relacionadas	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Otros Raf Inhibidores	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 RAF265 (CHIR-265)

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Descripción de la actividad	PMID
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of LCK in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of PDGFRbeta in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of cKit in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of Ret in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of Abl1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.003μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of VEGFR2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.008μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of CSF1R in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.009μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of EPHA2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of BRAF V600E mutant in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of EGFR in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.022μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of wild type BRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.036μM.	22168626
COLO205	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human COLO205 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.036μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of CRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.039μM.	22168626
A375	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human A375 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, IC50=0.078μM.	22168626
A375	Function assay		2 hrs	Inhibition of BRAF V600E mutant-mediated MEK phosphorylation in human A375 cells after 2 hrs, IC50=0.082μM.	22168626
HCC827	Function assay			Displacement of [3H]-cyclopamine from SMO V404M mutant in gefitinib resistant human HCC827 cells by scintillation counting, Ki=0.1878μM.	28787156
COLO679	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human COLO679 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.211μM.	22168626
HT144	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HT144 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.228μM.	22168626
SK-MEL-28	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-MEL-28 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.454μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of cMET in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.513μM.	22168626
HCT116	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HCT116 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.669μM.	22168626
Hs578T	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human Hs578T cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.736μM.	22168626
DU145	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human DU145 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.911μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of JAK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=4.7μM.	22168626
PC3	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human PC3 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.257μM.	22168626
LNCAP	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human LNCAP cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.631μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of MEK1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=7.1μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of MEK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=8.3μM.	22168626
COLO205	Antitumor assay	10 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 10 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
COLO205	Antitumor assay	30 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 30 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
COLO205	Antitumor assay	100 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 100 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	517.46	Fórmula	C₂₄H₂₂F₃N₅O₅	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	1188910-76-0	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	RXDX-105			Smiles	CC(C)(C1=CC(=NO1)NC(=O)NC2=CC(=CC=C2)OC3=NC=NC4=CC(=C(C=C43)OC)OC)C(F)(F)F

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 9 mg/mL (17.39 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	15% Captisol Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	10.000mg/ml (19.33mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 15% Captisol clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Características	High binding affinity for both BRAF (V600E) mutation and related c-Raf, but no significant affinity for other kinases of MAPK pathway.
Targets/IC₅₀/Ki	c-Kit 2 nM(Kd) LCK 2 nM(Kd) PDGFRβ 2 nM(Kd) RET 2 nM(Kd) Abl1 3 nM(Kd) VEGFR2 8 nM(Kd) CSF-1R 9 nM(Kd) B-Raf (V600E) 14 nM(Kd) EphA2 14 nM(Kd) EGFR 22 nM(Kd) B-Raf 36 nM(Kd) C-Raf 39 nM(Kd) c-Met 513 nM(Kd)
In vitro	Agerafenib (CEP-32496) inhibe la proliferación de células A375 (BRAF^V600E) con una EC50 de 78 nM. Exhibe una citotoxicidad más sensible para las líneas celulares tumorales (A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 y HT-144) que expresan BRAF mutante que para aquellas que expresan BRAF de tipo salvaje (HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145 y PC-3). Este compuesto inhibe la fosforilación de la quinasa MAP (proteína activada por mitógenos)/ERK (regulada por señales extracelulares) (MEK) (pMEK) en líneas celulares de melanoma humano (A375) y cáncer colorrectal (Colo-205) con valores de IC50 de 78 nM y 60 nM, respectivamente.
Ensayo de quinasa	Ensayo de unión
Ensayo de quinasa	Las quinasas se producen exhibidas en fagos T7 o por expresión en células HEK-293 y se marcan con ADN. Las reacciones de unión se realizan a temperatura ambiente durante 1 hora, y la fracción de quinasa no unida al compuesto de prueba se determina mediante captura con un ligando de afinidad inmovilizado y cuantificación por PCR cuantitativa. Cada quinasa se prueba individualmente contra Agerafenib (CEP-32496). Los valores de Kd para este compuesto se determinan utilizando once diluciones en serie de 3 veces y se presentan como valores medios de experimentos realizados por duplicado. La variabilidad entre los valores individuales es inferior a 2 veces.
In vivo	Agerafenib (CEP-32496) exhibe buena estabilidad en preparaciones microsomales hepáticas de ratón, perro, mono y humano con valores de aclaramiento intrínseco medidos de <23 (μL/min)/mg y t_1/2 > 60 min en todos los ensayos. Este compuesto (30 mg/kg, por vía oral, BID) exhibe estasis tumoral y una incidencia del 40% de regresiones tumorales parciales (PRs) en el modelo de ratón con xenoinjerto Colo-205, mientras que el grupo de dosis de 100 mg/kg exhibe tanto estasis tumoral como una incidencia del 80% de PRs. (30 mg/kg, por vía oral, BID) conduce a una inhibición del 50% y 75% de pMEK normalizado en lisados tumorales a las 2 y 6 horas después de la dosis, respectivamente, mientras que una dosis de 55 mg/kg da como resultado una inhibición del 75% al 57% de pMEK entre las 2 y 10 horas después de la administración en el modelo de ratón con xenoinjerto Colo-205. Es biodisponible por vía oral en múltiples especies preclínicas (>95% en ratas, perros y monos). Este compuesto (100 mg/kg) produce inhibición de pMEK y pERK y estasis tumoral sostenida y regresiones en xenoinjertos de carcinoma de colon BRAF(V600E) en ratones nude.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22168626/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22319199/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	Imágenes	PMID
Growth inhibition assay	Cell viability		31695841
Western blot	p-RET / RET / p-PLCγ / PLCγ / p-ERK / ERK / p-MEK / MEK		28011461

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

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Agerafenib (CEP-32496) Raf inhibidor

Estructura química

Peso molecular: 517.46