Name: RAF265 (CHIR-265)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2161
Rating: 5 (24 reviews)

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.98%

99.98

Dianas relacionadas	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Otros Raf Inhibidores	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 PLX8394 (Plixorafenib, FORE8394)

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Descripción de la actividad	PMID
SK-MEL-28	Growth inhibition assay			Growth inhibition of SK-MEL-28 cells, IC50=0.14μM.	21576023
MALME-3M	Growth inhibition assay			Growth inhibition of MALME-3M cells, IC50=0.14μM.	21576023
A375M	Growth inhibition assay			Growth inhibition of A375M cells, IC50=0.14μM.	21576023
A375	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human A375 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
Malme-3M	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human Malme-3M cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
WM-1799	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human WM-1799 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
MALME-3M	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human MALME-3M cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
A375	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human A375 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
WM1799	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human WM1799 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
SK-MEL-28	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human SK-MEL-28 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.14μM.	26396681
SK-MEL-28	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human SK-MEL-28 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.16μM.	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg		fCmin in mouse xenografted with human A375M cells at 100 mg/kg, po q2d, fCmin=0.5μM.	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg	48 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 100 mg/kg, po q24 after 48 hrs by Western blot analysis	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg	48 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 100 mg/kg, po q2d after 48 hrs by Western blot analysis	26396681
A375M	Function assay	30 to 100 mg/kg	4 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 30 to 100 mg/kg, po q2d measured after 4 hrs post-third dose by Western blot analysis	26396681
A375M	Antitumor assay	10 to 100 mg/kg	30 days	Antitumor activity against human A375M cells xenografted in mouse assessed as tumor regression at 10 to 100 mg/kg, po q2d measured up to 30 days	26396681
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB1643 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for LAN-5 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB-EBc1 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells	29435139
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=9.19μM.	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=14.64μM.	ChEMBL
Haga clic para ver más datos experimentales de líneas celulares

Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	518.41	Fórmula	C₂₄H₁₆F₆N₆O	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	927880-90-8	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	N/A			Smiles	CN1C2=C(C=C(C=C2)OC3=CC(=NC=C3)C4=NC=C(N4)C(F)(F)F)N=C1NC5=CC=C(C=C5)C(F)(F)F

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 100 mg/mL (192.89 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 33 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	30.000mg/ml (57.87mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	VEGFR2 (Cell-free assay) 30 nM(EC50) B-Raf (Cell-free assay) 3 nM-60 nM
In vitro	RAF265 (CHIR-265) inhibe C-Raf, B-Raf de tipo salvaje y B-Raf mutante (V600E). Este compuesto bloquea eficazmente la fosforilación de los sustratos aguas abajo de Raf, MEK y ERK en las células, y también mata las líneas celulares de melanoma y cáncer colorrectal que albergan mutaciones de B-Raf independientemente del estado de mutación de PTEN. La inhibición de la cinasa Raf por este agente en líneas celulares de melanoma con mutación de B-Raf causa la detención del ciclo celular e induce la apoptosis, imitando el efecto de la ARN interferente de Raf en estas células. También inhibe potentemente la fosforilación de VEGFR2 y la proliferación de hMVEC estimuladas por VEGF. En células HT29 y MDAMB231, esta sustancia química muestra actividad inhibidora con una IC20 de 1 a 3 μM y una IC50 de 5 a 10 μM, respectivamente. Si bien conduce a una disminución significativa de la supervivencia clonogénica en todas las líneas celulares probadas, lo que significa que este compuesto induce un efecto dominante sobre la supervivencia clonogénica. La adición de este agente a RAD001 en células HCT116 podría conducir a una fosforilación moderadamente disminuida de AKT, proteína S6 y 4EBP1. Reduce notablemente el nivel de proteína Bcl-2 y es muy inhibidor en células CM y NCI-H727, sin tener efecto sobre la susceptibilidad al TRAIL de las células BON1 y GOT1. La proteína cinasa D3 (PRKD3) que, cuando se silencia, podría mejorar la muerte celular por este compuesto en células de melanoma A2058, lo que previene la reactivación de la señalización MAPK, induce la escisión de PARP, aumenta la actividad de la caspasa, interrumpe la progresión del ciclo celular e inhibe la formación de colonias.
Ensayo de quinasa	Protocolo de Ensayo
Ensayo de quinasa	Raf y Mek se combinan a 2 × concentraciones finales en tampón de ensayo (50 mM Tris, pH 7,5, 15 mM MgCl₂, 0,1 mM EDTA y 1 mM DTT) y se dispensan 15 μL por pozo en placas de ensayo de polipropileno. Los niveles de fondo se determinan en pozos que contienen Mek y DMSO sin Raf. A los pozos que contienen Raf/Mek se añaden 3 μL de 10 × de este compuesto diluido en 100% DMSO. La reacción de actividad de la cinasa raf se inicia con la adición de 12 μL por pozo de 2,5 × ³³P-ATP diluido en tampón de ensayo. Después de 45-60 minutos, las reacciones se detienen con la adición de 70 μL de reactivo de parada (30 mM EDTA). Las placas de filtración se prehumedecen durante 5 minutos con etanol al 70% y luego se enjuagan por filtración con tampón de lavado. Las muestras (90 μL) de los pozos de reacción se transfieren luego a las placas de filtración. Las placas de filtración se lavan 6 × con tampón de lavado utilizando un aparato de filtración Millipore. Las placas se secan y se añaden 100 μL por pozo de líquido de centelleo. El CPM se determina luego utilizando un lector Wallac Microbeta 1450.
In vivo	RAF265 (CHIR-265) muestra un TVI% (porcentaje de inhibición del volumen tumoral) del 71% al 72% en xenoinjertos HCT116 a 12 mg/kg. Mientras que la combinación de este compuesto y RAD001 muestra una actividad antitumoral mejorada con un aumento de T10 (tiempo para alcanzar un volumen tumoral relativo de 10 veces el volumen tumoral inicial) y un retraso del crecimiento tumoral. La combinación de RAD001 y esta sustancia química también mejora significativamente la activación de la caspasa-3 en xenoinjertos HCT116 y MDAMB231, pero no en A549. Este compuesto inhibe la acumulación de FDG (2-desoxi-2-[¹⁸F]fluoro-d-glucosa) y disminuye los volúmenes tumorales en xenoinjertos A375M con una dosis oral de 100 mg/kg.
Referencias	[1] http://www.aacrmeetingabstracts.org/cgi/content/meeting_abstract/2008/1_Annual_Meeting/4876 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20124452/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21317202/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21527556/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21390189/

Información del ensayo clínico

(datos de https://clinicaltrials.gov, actualizado el 2024-05-22)

Número NCT	Reclutamiento	Condiciones	Patrocinador/Colaboradores	Fecha de inicio	Fases
NCT01352273	Completed	Advanced Solid Tumors	Array Biopharma now a wholly owned subsidiary of Pfizer\|Array BioPharma	June 2011	Phase 1

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

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C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

RAF265 (CHIR-265) Raf inhibidor

Estructura química

Peso molecular: 518.41