Name: EPZ004777
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7353
Rating: 5 (32 reviews)

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.09%

99.09

Dianas relacionadas	HDAC JAK BET PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK Histone Acetyltransferase
Otros Histone Methyltransferase Inhibidores	Pinometostat (EPZ5676) 3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride BIX-01294 trihydrochloride UNC1999 EPZ015666 (GSK3235025) MM-102 (HMTase Inhibitor IX) Chaetocin SGC 0946 EPZ005687 UNC0638

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Tiempo de incubación	Descripción de la actividad	PMID
MOLM13	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MOLM13 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MV4-11	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MV4-11 cells containing MLL-AF4, EC50=0.004μM.	23879463
THP1	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human THP1 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MCF10A	Function assay		Inhibition of DOT1L in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K79 level, IC50=0.084μM.	25406853
MLL	Function assay		Inhibition of Meis1 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
MLL	Function assay		Inhibition of Hoxa9 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
Sf9	Function assay		Inhibition of human full length PRMT7 expressed in Sf9 cells, IC50=7.5μM.	25893041
BHK	Antiviral assay	8 days	Antiviral activity against Zika virus SMGC infected in BHK cells assessed as inhibition of virus induced cytopathic effect after 8 days by CellTiter-Glo luminescent cell viability assay, IC50=35.19μM.	30170321
MV4-11	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MV4-11 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
MOLM13	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MOLM13 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	539.67	Fórmula	C₂₈H₄₁N₇O₄	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	1338466-77-5	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	N/A			Smiles	CC(C)N(CCCNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)CC2C(C(C(O2)N3C=CC4=C(N=CN=C43)N)O)O

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 100 mg/mL (185.29 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	DOT1L (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	EPZ004777 inhibe selectivamente la metilación H3K79 celular e inhibe la expresión de genes diana de fusión MLL clave. Tras la inhibición de DOT1L, este compuesto inhibe selectivamente la proliferación de líneas celulares MLL-Rearranged y células hematopoyéticas murinas transformadas con MLL-AF9. Además, también induce la diferenciación y la apoptosis en células MLL-rearranged. Este químico inhibe selectivamente la proliferación de células de médula ósea murinas transformadas con MLL–AF10 y CALM–AF10. La inhibición de DOT1L por este agente da como resultado una proliferación significativamente disminuida, una expresión disminuida de los genes diana de MLL-AF6 y la detención del ciclo celular de las células transformadas con MLL-AF6.
Ensayo de quinasa	Determinación de los valores de IC50 del inhibidor
Ensayo de quinasa	EPZ004777 se diluye en serie 3 veces en DMSO para un total de diez concentraciones, comenzando en 1 mM. Se deposita una alícuota de 1 μL de cada dilución del inhibidor en una placa de micropocillos de 384 pocillos. El control de inhibición del 100% consistió en una concentración final de 2,5 mM del inhibidor del producto S-adenosil-L-homocisteína (SAH). Este compuesto se incuba durante 30 min con 40 ml por pocillo de 0,25 nM DOT1L(1-416) en tampón de ensayo (20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0.002% Tween 20, 0.005% gelatina de piel bovina, 100 mM KCl y 0.5 mM DTT). Se añaden 10 ml por pocillo de mezcla de sustrato que comprende tampón de ensayo con 200 nM de ³H-SAM (American Radiolabeled Chemicals: 80 Ci/mmol), 600 nM de SAM sin marcar y 20 nM de nucleosomas para iniciar la reacción (ambos sustratos están presentes en la mezcla de reacción final a sus respectivos valores de KM). Las reacciones se incuban durante 120 min y se inactivan con 10 ml por pocillo de 800 mM SAM. La incorporación de radioactividad en el sustrato de nucleosomas se mide en una flashplate. Los valores de IC50 para las enzimas en el panel Histone Methyltransferase se determinan bajo condiciones de ensayo equilibradas similares con SAM y el sustrato de proteína/péptido presentes en concentraciones iguales a sus respectivos valores de KM.
In vivo	EPZ004777 produce una potente eficacia antitumoral y aumenta significativamente la supervivencia media en un modelo de xenoinjerto de ratón de leucemia MLL.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21741596/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23138183/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23361907/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	Imágenes	PMID
Western blot	H3K79me2 H3K79me1 / H3K4me3 / H3K9me3 / H3R17me2a / H3K27me2 / H3K27me3 / H3K36me2 / H4R3me2s / H4K20me2		23138183
Growth inhibition assay	Cell viability		25596271