Name: Anisomycin (Flagecidin)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7409
Rating: 5 (85 reviews)

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.93%

99.93

Dianas relacionadas	ERK p38 MAPK Raf MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Otros JNK Inhibidores	CC-90001 SP600125 JNK-IN-8 JNK Inhibitor IX Tanzisertib Hydrochloride (CC-930) JNK Inhibitor VIII Polyphyllin I DTP3 BI-78D3 Bentamapimod (AS602801)

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Descripción de la actividad	PMID
HEK293	Function assay			Inhibitory concentration required to produce cytotoxicity against HEK293 cells, IC50=0.02μM.	16005213
HeLa	Function assay	10 uM		Inhibition of translation in human HeLa cells at 10 uM by 35S-methionine metabolic labeling study	15165136
HEK293	Function assay	100 uM	15 mins	Increase of JNK phosphorylation in U50488 treated untransfected HEK293 cells at 100 uM after 15 mins	17702750
HEK293	Function assay	50 uM	15 mins	Increase of U50488-induced JNK phosphorylation in untransfected HEK293 cells at 50 uM after 15 mins	17702750
RAW264.7	Function assay	5 uM	30 mins	Activation of p38MAPK in mouse RAW264.7 cells assessed as phosphorylation at Thr180/Tyr182 at 5 uM after 30 mins by Western blotting analysis	23294286
Sf9	Function assay	10 uM	6 to 24 hr	Increase of ATP level in Spodoptera frugiperda (fall armyworm) Sf9 cells at 10 uM after 6 to 24 hr by luminescent cell viability assay	ChEMBL
Sf9	Cytotoxicity assay	10 uM	72 hr	Cytotoxicity against Spodoptera frugiperda (fall armyworm) Sf9 cells at 10 uM after 72 hr by trypan blue dye exclusion test	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=0.09μM.	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=0.1μM.	ChEMBL
Vero E6	Function assay			CC50 determination at MOI 0.004 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in Vero E6 cells, CC50<0.39μM.	ChEMBL
Vero E6	Function assay			CC50 determination at MOI 0.01 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in Vero E6 cells, CC50<0.39μM.	ChEMBL
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	265.3	Fórmula	C₁₄H₁₉NO₄	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	22862-76-6	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 16 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	2.650mg/ml (9.99mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 53 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.850mg/ml (3.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 17 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	JNK
In vitro	La anisomicina (3 μM) disminuye la síntesis de proteínas en células MDA16 y MDA-MB-468, y reduce la formación de colonias por células MDA-MB-468. Este compuesto causa un aumento en el número de células apoptóticas en cultivos de MDA-MB-468, pero no en cultivos de MDA16. Activa la fosforilación de JNK en células MDA-MB-468. En células U251 y U87, este químico (0,01-8 μM) inhibe el crecimiento celular de manera dependiente del tiempo y la concentración con valores de IC50 (48 h) de 0,233 y 0,192 μmol/L, respectivamente. La anisomicina (4 μM) causa un 21,5% y 25,3% de proporción de apoptosis en células U251 y U87, respectivamente, y activa p38 MAPK y JNK, mientras inactiva ERK1/2. Este compuesto (4 μM) reduce el nivel de la subunidad PP2A/C de manera dependiente del tiempo en células U251 y U87. Inhibe la proliferación de células EAC de manera dependiente de la concentración.
Ensayo de quinasa	Fosforilación de JNK
Ensayo de quinasa	Se siembran 500.000 células/pocillo en placas de 6 pocillos y se incuban durante la noche. Las células se incuban luego durante 1 h con los compuestos de prueba o DMSO como control de vehículo (concentración final 1% v/v). Se añade puromicina (concentración final de 18 μM) y las células se incuban durante otros 10 min para etiquetar las cadenas polipeptídicas nacientes. El etiquetado de fondo se determina incubando las células sin puromicina. Las células se lavan luego en HBSS, se cosechan raspando y se centrifugan (300 g, 5 min). Las células se resuspenden en 0,5 mL de DTT 50 mM que contiene inhibidores de fosfatasa y se incuban a 95 ℃ durante 10 min. Las muestras se congelan rápidamente en nitrógeno líquido y se almacenan a -20 ℃ hasta que se transfieren a la membrana. Las muestras (20–30 μg de proteína/muestra) se transfieren a una membrana de PVDF. La membrana se bloquea y se incuba con un anticuerpo anti-fosfo-Thr183/Tyr185-JNK durante la noche a 4 ℃. Se utilizan anticuerpos secundarios para etiquetar el anticuerpo primario y se detectan usando un escáner de infrarrojos. La intensidad de la señal de fluorescencia del anticuerpo anti-fosfo-JNK se corrige por el fondo y se normaliza por la carga.
In vivo	La administración peritumoral de anisomicina (5 mg/kg) suprime significativamente el crecimiento del carcinoma de Ehrlich de ascitis (EAC), lo que resulta en la supervivencia de aproximadamente el 60% de los ratones 90 días después de la inoculación de EAC.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9154836/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24333448/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22684030/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23525555/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	PMID
Western blot	p-Keratin 20 / Keratin 20 / p-Keratin 18 / Keratin 18 / p-Keratin 8 / Keratin 8 / p-MK2 / p-hHSPB1 / hHSPB1 PP2A / PP2C p-ERK / ERK / p-JNK / JNK / p-p38 / ATF3	20724476
Immunofluorescence	p-Keratin 8 / p-Keratin 18 / p-Keratin 20	20724476
Growth inhibition assay	Cell viability	22684030