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D 4476 Casein Kinase inhibidor

Name: D 4476
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7642
Rating: 5 (21 reviews)

Cat. No.S7642

D 4476 es un potente, selectivo y permeable a las células inhibidor de CK1 (casein kinase 1) con una IC50 de 200 nM y 300 nM en un ensayo libre de células para CK1 de Schizosaccharomyces pombe y CK1δ, respectivamente. También actúa como un inhibidor de ALK5 con una IC50 de 500 nM.

D 4476 Casein Kinase inhibidor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 398.41

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.73%

99.73

Dianas relacionadas	Dehydrogenase HSP Transferase P450 (e.g. CYP17) PDE phosphatase PPAR Vitamin Carbohydrate Metabolism Mitochondrial Metabolism
Otros Casein Kinase Inhibidores	Silmitasertib (CX-4945) Silmitasertib (CX-4945) sodium salt TBB IC261 PF-670462 Ellagic Acid hydrate TTP 22 Longdaysin PF 4800567 (E/Z)-GO289

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Formulación	Descripción de la actividad	PMID
A375 cells	Function assay	10-80 μM	48 h		Inhibition of CK1-MDM2 complex in human A375 cells assessed as increase in p21 protein level at 10 to 80 uM after 48 hrs by immunoblotting analysis
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	398.41	Fórmula	C₂₃H₁₈N₄O₃	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	301836-43-1	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	N/A			Smiles	C1COC2=C(O1)C=CC(=C2)C3=C(NC(=N3)C4=CC=C(C=C4)C(=O)N)C5=CC=CC=N5

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 79 mg/mL (198.28 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	3.950mg/ml (9.91mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 79 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	CK1 from Schizosaccharomyces pombe 200 nM CK1δ 300 nM ALK5 500 nM
In vitro	D4476 (10 μM) inhibe eficazmente CK1 y ALK5 con actividades de aproximadamente 7% y 22% frente al grupo de control, respectivamente. En células de hepatoma H4IIE, D4476 inhibe específicamente la fosforilación del factor de transcripción endógeno forkhead box O1a (FOXO1a) en Ser322 y Ser325, sin afectar la fosforilación de otros sitios. D4476 induce citotoxicidad en las líneas ANBL6, INA6 y RPMI8226; las líneas MM1S y U266 son menos sensibles; y la línea OPM1 es totalmente resistente. Altas concentraciones (50 μM) de D4476 indujeron toxicidad en todas las líneas de mieloma múltiple (MM). En células MM, D4476 aumenta los niveles de proteínas de TP53, P27 y FADD, así como la progresión del ciclo celular y la inducción de apoptosis. El tratamiento de células madre leucémicas (CML) con D4476 muestra una destrucción altamente selectiva de CML sobre HSPCs normales.
Ensayo de quinasa	CK1 kinase assay
Ensayo de quinasa	Todos los ensayos de proteín quinasa (25 μL) se llevan a cabo a temperatura ambiente (21℃). Los ensayos se realizan durante 40 min utilizando una estación de trabajo de automatización de laboratorio Biomek 2000 en un formato de 96 pocillos. Las concentraciones de acetato de magnesio y [γ-^33P]ATP (800 cpm/pmol) en los ensayos son de 10 mM y 0,1 mM, respectivamente. Los ensayos se inician con MgATP y se detienen con la adición de 5 μL de ácido ortofosfórico 0,5 M. Las alícuotas se depositan en filtros P30, se lavan cuatro veces en ácido fosfórico 75 mM para eliminar el ATP, una vez en metanol, luego se secan y se cuenta la radioactividad. La CK1 δ (5-20 m-unidades), diluida en 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EGTA, 0,1% (v/v) Tritón X-100, 5 mM ditiotreitol, 50% (v/v) glicerol, se ensaya contra el péptido RRKDLHDDEEDEAMSITA en una incubación que contiene 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0,1% (v/v) Tritón X-100 y 0,5 mM de péptido sustrato.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14710188/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24962017/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24616378/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12534346/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	Imágenes	PMID
Western blot	MDM2 / p53 / p21 / E2F-1 / pRB		19759023

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

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