Name: PF-543 hydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7177
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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.52%

99.52

Dianas relacionadas	PD-1/PD-L1 CXCR STING AhR Immunology & Inflammation related CD markers Interleukins Anti-infection Antioxidant COX
Otros SPHK Inhibidores	Opaganib (ABC294640) SKI II K6PC-5 Defensamide (MHP) SKI-V SKI-178

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Descripción de la actividad	PMID
human PAMSC cells	Function assay	100 nM	24 h	Decrease of SK1 expression in human PAMSC cells at 100 nM after 24 hrs by Western blot analysis	24396570
Sf9 cells	Function assay			Inhibition of human recombinant SphK1 expressed in Sf9 cells assessed as radiolabeled products using 5 uM sphingosine and 10 uM gamma[32P]ATP by liquid scintillation counting	25643074
Sf21 cells	Function assay		90 mins	Inhibition of His6 tagged human SphK1 expressed in Sf21 cells using FITC-sphingosine as substrate preincubated for 90 mins prior substrate addition by Caliper assay, Ki=4.3 nM	25516793
PC3	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human PC3 cells after 72 hrs by MTS assay, GI50=19μM.	26780304
HEK293	Function assay	10 uM	16 hrs	Induction of SK1 degradation in HEK293 cells at 10 uM after 16 hrs by western blotting analysis in presence of proteasome inhibitor MG132	26780304
MDA1483	Function assay		30 mins	Inhibition of SPHK1 in human MDA1483 cells using C17-sphingosine as substrate assessed as reduction in C17-S1P formation preincubated for 30 mins with substrate measured after 15 mins by LC-MS analysis, IC50=0.0008μM.	28231433
Sf9	Function assay		15 mins	Inhibition of human C-terminal His6-tagged SPHK1 expressed in fall armyworm sf9 cells assessed as reduction in ADP formation using sphingosine as substrate preincubated for 15 mins followed by substrate addition after 1 hr by transcreener-based fluorescen, IC50=0.002μM.	28231433
Sf9	Function assay		1 hr	Inhibition of human C-terminal His6-tagged SPHK1 expressed in fall armyworm sf9 cells assessed as reduction in S1P formation using sphingosine as substrate after 1 hr by FITC-based caliper assay, IC50=0.0027μM.	28231433
Sf21	Function assay		1 hr	Inhibition of recombinant human C-terminal His-tagged SPHK1 expressed in fall armyworm sf21 cells using sphingosine as substrate after 1 hr by FITC-based caliper assay, Ki=0.0036μM.	28406646
Sf21	Function assay		1 hr	Inhibition of recombinant C-terminal His6-tagged human SphK1 expressed in baculovirus infected sf21 cells using FITC-sphingosine as substrate after 1 hr in presence of ATP by microfluidic capillary electrophoresis mobility shift assay, IC50=0.0027μM.	28408190
Sf21	Function assay		1 hr	Inhibition of human recombinant C-terminal His6 tagged SphK2 expressed in baculovirus infected sf21 cells using FITC-sphingosine as substrate after 1 hr in presence of ATP by microfluidic capillary electrophoresis mobility shift assay, IC50=0.36μM.	28408190
Sf21	Function assay			Inhibition of human C-terminal His6-tagged SphK1 expressed in baculovirus infected Sf21 insect cells, Ki=0.0036μM.	28822281
HEK293	Function assay		30 mins	Inhibition of GFP-tagged SK1 (unknown origin) expressed in HEK293 cells using Sph as substrate measured after 30 mins in presence of [gamma32P]ATP by Cerenkov counting analysis, IC50=0.028μM.	30889352
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	502.07	Fórmula	C₂₇H₃₂ClNO₄S	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	1706522-79-3	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	N/A			Smiles	CC1=CC(=CC(=C1)OCC2=CC=C(C=C2)CN3CCCC3CO)CS(=O)(=O)C4=CC=CC=C4.Cl

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 100 mg/mL (199.17 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	5.000mg/ml (9.96mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.800mg/ml (1.59mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Características	The most potent inhibitor of SphK1 described to date.
Targets/IC₅₀/Ki	SphK1 (Cell-free assay) 2.0 nM SphK1 (Cell-free assay) 3.6 nM(Ki)
In vitro	PF543 es un compuesto de hidroxil metilpirrolidina permeable a las células que inhibe la fosforilación de esfingosina catalizada por SphK-1/SphK1 de manera reversible y competitiva con la esfingosina, sin mostrar afinidad por los receptores S1P y con una actividad inhibidora mucho menor contra Sphk2 (6,8 % de inhibición a 10 μM) o 46 otras quinasas lipídicas y proteicas (IC50 >10 μM). En las células de carcinoma de cabeza y cuello 1483 con sobreexpresión de SphK1, este compuesto disminuye el nivel de S1P endógeno 10 veces con un aumento proporcional en el nivel de esfingosina. Se une a SphK1 de manera reversible (k _off t1/2=8,5 min) y con alta afinidad, y la constante de unión (K_d) es de 5 nM. Este químico no tuvo efecto sobre la proliferación y supervivencia de las células 1483, A549, LN229, Jurkat, U937 y MCF-7, a pesar de un cambio drástico en la relación S1P/esfingosina celular. Es eficaz como un potente inhibidor de la formación de S1P en sangre total, lo que indica que la isoforma SphK1 de la esfingosina quinasa es la principal fuente de S1P en la sangre humana.
Ensayo de quinasa	Cuantificación de FITC-S1P/Ensayo Caliper
Ensayo de quinasa	Se desarrolla un formato de 384 pocillos del ensayo enzimático de SphK basado en la separación de FITC-S1P del sustrato de FITC-esfingosina no reaccionado utilizando un sistema de cambio de movilidad por electroforesis capilar microfluídica. Brevemente, 3 nM de SphK1–His6 se incuban con 1 μM de FITC-esfingosina, 20 μM de ATP y 10 μM de este compuesto (una concentración final de DMSO del 2 %) en un tampón que contiene 100 mM de Hepes (pH 7,4), 1 mM de MgCl₂, 0,01 % de Triton X-100, 10 % de glicerol, 100 μM de ortovanadato de sodio y 1 mM de DTT durante 1 h en una placa Matrical MP-101-1-PP de 384 pocillos. Las mezclas de reacción (10 μL) se inactivan mediante la adición de 20 μL de 30 mM de EDTA y 0,15 % de Reactivo de Recubrimiento-3 en 100 mM de Hepes, y una pequeña alícuota de cada reacción (unos pocos nanolitros) se analiza en el instrumento Caliper LabChip 3000 bajo una presión de -1,5 psi (psi=6,9 kPa), un voltaje descendente de -1900 V y un tiempo de aspiración de 0,2 s. El producto fluorescente fosforilado y el sustrato fluorescente no fosforilado aparecieron como picos distintivos y se cuantificaron utilizando los datos de Caliper.
In vivo	PF-543 hydrochloride, un potente inhibidor de la esfingosina quinasa 1, redujo la hipertrofia disfuncional, asociada con la protección contra la apoptosis de cardiomiocitos.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22397330/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27063355/

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

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C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PF-543 hydrochloride SPHK inhibidor

Estructura química

Peso molecular: 502.07