PF-543 hydrochloride

N.º de catálogoS7177 Lote:S717701

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Datos técnicos

Fórmula

C27H32ClNO4S
Peso molecular 502.07 Número CAS 1706522-79-3
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 93 mg/mL (185.23 mM)
Ethanol 93 mg/mL (185.23 mM)
Water Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción PF-543 hydrochloride, un novedoso inhibidor competitivo de la esfingosina de SphK1, inhibe la SphK1 con IC50 y Ki de 2,0 nM y 3,6 nM, y exhibe una selectividad >100 veces superior a la isoforma SphK2. Este compuesto induce apoptosis, necrosis y autofagia.
Objetivos
SphK1
(Cell-free assay)		 SphK1
(Cell-free assay)
2.0 nM 3.6 nM(Ki)
In vitro

PF543 es un compuesto de hidroxil metilpirrolidina permeable a las células que inhibe la fosforilación de esfingosina catalizada por SphK-1/SphK1 de manera reversible y competitiva con la esfingosina, sin mostrar afinidad por los receptores S1P y con una actividad inhibidora mucho menor contra Sphk2 (6,8 % de inhibición a 10 μM) o 46 otras quinasas lipídicas y proteicas (IC50 >10 μM). En las células de carcinoma de cabeza y cuello 1483 con sobreexpresión de SphK1, este compuesto disminuye el nivel de S1P endógeno 10 veces con un aumento proporcional en el nivel de esfingosina. Se une a SphK1 de manera reversible (k off t1/2=8,5 min) y con alta afinidad, y la constante de unión (Kd) es de 5 nM. Este químico no tuvo efecto sobre la proliferación y supervivencia de las células 1483, A549, LN229, Jurkat, U937 y MCF-7, a pesar de un cambio drástico en la relación S1P/esfingosina celular. Es eficaz como un potente inhibidor de la formación de S1P en sangre total, lo que indica que la isoforma SphK1 de la esfingosina quinasa es la principal fuente de S1P en la sangre humana.

In vivo PF-543 hydrochloride, un potente inhibidor de la esfingosina quinasa 1, redujo la hipertrofia disfuncional, asociada con la protección contra la apoptosis de cardiomiocitos.
Características El inhibidor más potente de SphK1 descrito hasta la fecha.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:

[1]
  • Cuantificación de FITC-S1P/Ensayo Caliper

    Se desarrolla un formato de 384 pocillos del ensayo enzimático de SphK basado en la separación de FITC-S1P del sustrato de FITC-esfingosina no reaccionado utilizando un sistema de cambio de movilidad por electroforesis capilar microfluídica. Brevemente, 3 nM de SphK1–His6 se incuban con 1 μM de FITC-esfingosina, 20 μM de ATP y 10 μM de este compuesto (una concentración final de DMSO del 2 %) en un tampón que contiene 100 mM de Hepes (pH 7,4), 1 mM de MgCl2, 0,01 % de Triton X-100, 10 % de glicerol, 100 μM de ortovanadato de sodio y 1 mM de DTT durante 1 h en una placa Matrical MP-101-1-PP de 384 pocillos. Las mezclas de reacción (10 μL) se inactivan mediante la adición de 20 μL de 30 mM de EDTA y 0,15 % de Reactivo de Recubrimiento-3 en 100 mM de Hepes, y una pequeña alícuota de cada reacción (unos pocos nanolitros) se analiza en el instrumento Caliper LabChip 3000 bajo una presión de -1,5 psi (psi=6,9 kPa), un voltaje descendente de -1900 V y un tiempo de aspiración de 0,2 s. El producto fluorescente fosforilado y el sustrato fluorescente no fosforilado aparecieron como picos distintivos y se cuantificaron utilizando los datos de Caliper.
Ensayo celular:

[1]
  • Líneas celulares

    1483, A549, LN229, Jurkat, U937, MCF-7

  • Concentraciones

    ~1 μM

  • Tiempo de incubación

    7 days

  • Método

    CellTiter-Glo Assay
Estudio en animales:

[2]
  • Modelos animales

    C57BL/6 mice

  • Dosificaciones

    1 mg/kg

  • Administración

    i.p.

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22397330/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27063355/

Validación de productos por parte del cliente

(C) Western blot analysis of mature TGF-β1, FN and Col-I protein levels in sham, sham+ PF-543, UUO and UUO +PF-543 groups at 7 days (n =3). (average ± SEM; ANOVA; *P < 0.05, **P < 0.01 versus sham group. #P < 0.05 versus UUO group). (D) Periodic acid-Schiff staning showed that tubular atrophy was evident in the obstructed kidneys at UUO 7 days after PF-543 treatment (n =6). (E) Masson

Datos de [ , , Int J Biochem Cell Biol, 2017, 90:17-28 ]

PF-543 is anti-proliferative and cytotoxic to CRC cells. Human CRC cell lines, including HCT-116 (a-d), DLD-1 and HT-29 (e), as well as patient-derived primary colon cancer cells (P1, P2 and P3, f), were incubated with regular or PF-543-containg medium for indicated time, cell proliferation was tested by viable cell counting assay (a) and colony formation assay (b); Cell survival was examined by MTT assay (c-f). Expression of SphK1 and Tubulin (the equal loading) was examined by Western blots (e and f, upper panels). Relative SphK1 expression (verse Tubulin) was quantified. “C” stands for untreated control cells (For all Figs). Values represented the mean ± SEM (n = 5). Experiments in this figure were repeated three times, with similar results achieved. *P < 0.05 versus “C” group.

Datos de [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 470(3):728-34. ]

Sellecks PF-543 hydrochloride Ha sido citado por 30 Publicaciones

SPHK1 enhances olaparib resistance in ovarian cancer through the NFκB/NRF2/ferroptosis pathway [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):29] PubMed: 39875359
Elevated Sphingosine Levels Suppress Profibrotic TGF-β Signaling via the PKC/miR-21/SMAD7 Axis in Sphingosine Kinase 2-Deficient Renal Fibroblasts and Unilateral Ureteral Obstruction-Induced Kidney Fibrosis [ FASEB J, 2025, 39(12):e70768] PubMed: 40558859
Molecular subtyping of renal clear cell carcinoma based on prognostic RASSF family genes and validation of C1QL1 as a key prognostic marker [ Sci Rep, 2025, 15(1):9786] PubMed: 40118977
Targeting the SphK1/S1P/PFKFB3 axis suppresses hepatocellular carcinoma progression by disrupting glycolytic energy supply that drives tumor angiogenesis [ J Transl Med, 2024, 22(1):43] PubMed: 38200582
Cannabinoid-Induced Immunogenic Cell Death of Colorectal Cancer Cells Through De Novo Synthesis of Ceramide Is Partially Mediated by CB2 Receptor [ Cancers (Basel), 2024, 16(23)3973] PubMed: 39682160
Induction of Inflammation Disrupts the Negative Interplay between STING and S1P Axis That Is Observed during Physiological Conditions in the Lung [ Int J Mol Sci, 2023, 24(9)8303] PubMed: 37176007
Comprehensive metabolomics expands precision medicine for triple-negative breast cancer [ Cell Res, 2022, 10.1038/s41422-022-00614-0] PubMed: 35105939
Sphingosine kinase 1 promotes tumor immune evasion by regulating the MTA3-PD-L1 axis [ Cell Mol Immunol, 2022, 19(10):1153-1167] PubMed: 36050478
Targeting sphingosine kinase 1/2 by a novel dual inhibitor SKI-349 suppresses non-small cell lung cancer cell growth [ Cell Death Dis, 2022, 13(7):602] PubMed: 35831279
The anti-osteosarcoma cell activity by the sphingosine kinase 1 inhibitor SKI-V [ Cell Death Discov, 2022, 8(1):48] PubMed: 35115496

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