solo para uso en investigación

Purmorphamine Smoothened Receptor Agonist

Name: Purmorphamine
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S3042
Rating: 5 (61 reviews)

Cat. No.: S3042

Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI), which directly binds and activates Smoothened, blocks BODIPY-cyclopamine binding to Smo with IC50 of ~ 1.5 μM in HEK293T cell and also is an inducer of osteoblast differentiation with EC50 of 1 μM. Purmorphamine can reduce both basal and induced autophagy.

Purmorphamine Hedgehog/Smoothened agonist Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 520.62

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.97%

99.97

Dianas relacionadas	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Otros Hedgehog/Smoothened Inhibidores	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT 61 (NSC 136476) SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D PF-5274857

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Descripción de la actividad	PMID
C3H10T1/2	Function assay		6 days	Activity at Smo in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of cell differentiation into osteoblast incubated for 6 days by alkaline phosphatase assay, EC50 = 0.8 μM.	27429255
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells after 30 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 1 μM.	16408088
C3H10T1/2	Function assay			Induction of osteogenesis in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of osteoblast specific marker alkaline phosphatase by immunofluorescence method, EC50 = 1 μM.	16408003
HEK293T	Function assay		1 hr	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo expressed in HEK293T cells after 1 hr by fluorescence microscopy, IC50 = 1.5 μM.	16408088
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells assessed as beta-galactosidase activity after 30 hrs by luciferase reporter gene assay in presence of 100 nM 3-keto-N-aminoethyl-N'-aminocaproyldihydrocinnamoyl cyclopamine	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo N-terminal cysteine domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo C-terminal cytoplasmic domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
Haga clic para ver más datos experimentales de líneas celulares

Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular	520.62	Fórmula	C₃₁H₃₂N₆O₂	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	483367-10-8	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	Shh Signaling Antagonist VI			Smiles	C1CCC(CC1)N2C=NC3=C(N=C(N=C32)OC4=CC=CC5=CC=CC=C54)NC6=CC=C(C=C6)N7CCOCC7

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 4 mg/mL (7.68 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	2%DMSO 1 30%PEG300 2 5%Tween80 3 63%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	1.000mg/ml (1.92mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 20 μL of clarified DMSO stock solution of 50 mg/ml to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 630 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened (HEK293T cells) ~1.5 μM
In vitro	Purmorphamine activa la vía Hedgehog al unirse directamente y activar Smoothened con una IC50 de ~ 1,5 μM en competencia con ciclopamina, un antagonista de Smo. Este compuesto es un potente inductor de la osteogénesis en células multipotentes C3H10T1/2. La EC50 (basada en la expresión de ALP) para este químico es de 1 μM en células C3H10T1/2. Este (1 μM) y BMP-4 (100 ng/mL) juntos aumentan la actividad de ALP más de 90 veces en células 3T3-L1. A diferencia de BMP-4, este compuesto induce la osteogénesis al activar la señalización Hedgehog en células progenitoras mesenquimales multipotentes.
Ensayo de quinasa	Ensayo de unión
Ensayo de quinasa	Los ensayos de unión a Smo se realizan con BODIPY-ciclopamina y células que sobreexpresan Smo como se describió anteriormente4,5, utilizando construcciones de expresión basadas en el promotor CMV y que contienen el origen SV40 para Smo-Myc3, la mutante de deleción Smo∆CRD (deleción de los aminoácidos 68 a 182) y Smo∆CT (deleción de los aminoácidos 556 a 793). Las células HEK 293T se cultivan en cubreobjetos de vidrio tratados con poli-D-lisina en placas de 12 pocillos hasta una confluencia del 70% y luego se transfectan con el constructo de expresión apropiado (0,5 μg/pocillo) usando FuGene 6 según el fabricante.
In vivo	Purmorphamine regula al alza la expresión de ALP en construcciones basadas en Stem Cells mesenquimales humanas en ratas.
Referencias	[1] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=16408088 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12465946/ [3] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=15380183 [4] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=23228449 [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32194421/

Aplicaciones (Applications)

Métodos	Biomarcadores	PMID
Western blot	Patch1 / Gli1 / LC3 / p62	26609469
Immunofluorescence	SOX18	26588701
Growth inhibition assay	Cell viability	26588701

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):