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CHIR-98014 GSK-3 inhibitor

Cat. No.: S2745

CHIR-98014 (CT98014) is a potent GSK-3α/β inhibitor with IC50 of 0.65 nM/0.58 nM in cell-free assays, with the ability to distinguish GSK-3 from its closest homologs Cdc2 and ERK2.
CHIR-98014 GSK-3 inhibitor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 486.31

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: Pureza: 99.27%
99.27

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Líneas celulares Tipo de ensayo Concentración Tiempo de incubación Formulación Descripción de la actividad PMID
BGC-823 Proliferation assay 50 nM 48 h abrogated rLMO3 protein-induced proliferation 29436606
HGC-27 Proliferation assay 50 nM 48 h abrogated rLMO3 protein-induced proliferation 29436606
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
Haga clic para ver más datos experimentales de líneas celulares

Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 486.31 Fórmula

C20H17Cl2N9O2

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 252935-94-7 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos CT98014 Smiles C1=CC(=C(C=C1Cl)Cl)C2=NC(=NC=C2N3C=CN=C3)NCCNC4=NC(=C(C=C4)[N+](=O)[O-])N

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 10 mg/mL (20.56 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
GSK-3β
(Cell-free assay)
0.58 nM
GSK-3α
(Cell-free assay)
0.65 nM
In vitro
CHIR-98014 inhibits human GSK-3β with Ki of 0.87 nM. This compound is very effective in preventing murine and rat GSK-3. Although it acts as a simple competitive inhibitor of ATP binding, it displays from 500-fold to >1000-fold selectivity for GSK-3 versus 20 other protein kinases including Cdc2, ERK2, Tie-2 and KDR. This inhibitor prevents Cdc2 with IC50 of 3.7 μM. However, it reveals similar potency against the highly homologous ɑ and β isoforms of GSK-3, it is noteworthy that it strongly discriminated between GSK-3 and its closest homologs CDC2 and ERK2. Exposure of insulin receptor-expressing CHO-IR cells or primary rat hepatocytes to increasing concentrations of this chemical results in a two- to three-fold stimulation of the GS activity ratio above basal. The concentrations giving rise to half-maximal GS stimulation (EC50) is 106 nM and 107 nM for CHO-IR and rat hepatocytes, respectively.
Ensayo de quinasa
Ensayos de quinasas
Las placas de 96 pocillos de polipropileno se llenan con 300 μL/pocillo de tampón (50 mM Tris HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM ditiotreitol, 25 mM β-glicerofosfato, 1 mM NaF, 0,01% BSA, pH 7,5) que contiene la quinasa, el sustrato peptídico y cualquier activador. CHIR-98014 o los controles se añaden en 3,5 μL de DMSO, seguido de 50 μL de stock de ATP para obtener una concentración final de 1 μM de ATP en todos los ensayos libres de células. Después de la incubación, se transfieren alícuotas de 100 μL por triplicado a placas Combiplate ocho que contienen 100 μL/pocillo de 50 μM de ATP y 20 mM de EDTA. Después de 1 hora, los pocillos se enjuagan cinco veces con PBS, se llenan con 200 μL de líquido de centelleo, se sellan, se dejan 30 minutos y se cuentan en un contador de centelleo. Todos los pasos se realizan a temperatura ambiente.
In vivo
GSK-3 inhibitor CHIR-98014 activates the GS activity ratio in isolated type I skeletal muscle from insulin-sensitive lean Zucker and from insulin-ressitant ZDF rats. Soleus muscle isolated from ZDF rats shows significant resistance to insulin for activation of GS but responded to 500 nM of this compound to the same extent (40% increase) as muscle from lean Zucker rats. Notably, GS activation by insulin plus this chemical is additive in muscle from lean Zucker rats and greater than additive in muscle from the ZDF rats. Total GS activity is not altered by either this inhibitor or insulin in these cells and muscles. Meanwhile, this compound does not influence the insulin dose-response in muscle from lean animals. The reduction in hyperglycemia and improved glucose disposal are not limited to db/db mice and ZDF rats, as similar results are observed with ob/ob mice, diet-induced diabetic C57BL/6 mice, and glucose-intolerant SHHF rats treated with this chemical. Additionally, this compound decreases the phosphorylation (Ser396) of tau protein in the cortex and hippocampus of postnatal rats.
Referencias

Aplicaciones (Applications)

Métodos Biomarcadores Imágenes PMID
Western blot p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / β-catenin
S2745-WB1
28415692
Growth inhibition assay Cell viability
S2745-viability1
24779365