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WAY-600 mTOR inhibitor

Cat. No.: S2689

WAY-600 is a potent, ATP-competitive and selective inhibitor of mTOR with IC50 of 9 nM; this compound blocks mTORC1/P-S6K(T389) and mTORC2/P-AKT(S473) but not P-AKT(T308); it is selective for mTOR than PI3Kα (>100-fold) and PI3Kγ (>500-fold).
WAY-600 mTOR inhibitor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 494.59

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Control de calidad (Quality Control)

Lote: S268901 DMSO]22 mg/mL]false]Ethanol]2 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Pureza: 99.34%
99.34

Información química, almacenamiento y estabilidad (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecular 494.59 Fórmula

C28H30N8O

 Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)
Nº CAS 1062159-35-6 Descargar SDF Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles C1CN(CCC1N2C3=C(C=N2)C(=NC(=N3)C4=CC5=C(C=C4)NC=C5)N6CCOCC6)CC7=CN=CC=C7

Solubilidad (Solubility)

In vitro
Lote:

DMSO : 22 mg/mL (44.48 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
mTOR
9 nM
In vitro
Immune-complex kinase assay shows mTORC2-specific substrate His6-AKT or the mTORC1 substrate His6-S6K is dose dependently inhibited by WAY-600. This compound globally inhibits mTOR signaling and AKT function in cellular models dose dependently. It profoundly inhibits cap-dependent and global protein synthesis in MDA361, human breast cancer cells. This chemical shows antiproliferative effects in various cancer cell lines involving G1 cell cycle arrest and selective apoptosis. It down-regulate angiogenic factors, VEGF and HIF-1α, in U87MG, MDA361 and LNCap cells.
Ensayo de quinasa
Formato DELFIA de FLAG-TOR purificado
Los ensayos de rutina con FLAG-TOR purificado (FL y 3.5) se realizan en placas de 96 pocillos de la siguiente manera. Las enzimas se diluyen primero en tampón de ensayo de quinasa (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glicerofosfato, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 lM microcistina LR y 100 lg/mL BSA). En cada pocillo, se mezclan brevemente 12 μL de la enzima diluida con 0.5 μL de inhibidor de prueba o vehículo de control dimetilsulfóxido (DMSO). La reacción de quinasa se inicia añadiendo 12.5 μL de tampón de ensayo de quinasa que contiene ATP y His6-S6K para dar un volumen de reacción final de 25 μL que contiene 800 ng/mL de FLAG-TOR, 100 μM de ATP y 1.25 μM de His6-S6K. La placa de reacción se incuba durante 2 horas (lineal de 1 a 6 horas) a temperatura ambiente con agitación suave y luego se detiene añadiendo 25 μL de tampón de parada (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA y 20 mM EGTA). La detección DELFIA del His6-S6K fosforilado (Thr-389) se realiza a temperatura ambiente utilizando un anticuerpo monoclonal anti-P(T389)-p70S6K (1A5) marcado con Europio-N1-ITC (Eu) (10.4 Eu por anticuerpo). Cuarenta y cinco microlitros de la mezcla de reacción de quinasa terminada se transfieren a una placa MaxiSorp que contiene 55 μL de PBS. Se permite que el His6-S6K se adhiera durante 2 horas, después de lo cual los pocillos se aspiran y se lavan una vez con PBS. Se añaden cien microlitros de tampón DELFIA con 40 ng/mL de anticuerpo Eu-P(T389)-S6K. La unión del anticuerpo continúa durante 1 hora con agitación suave. Los pocillos se aspiran y se lavan cuatro veces con PBS que contiene 0.05% de Tween 20 (PBST). Se añaden cien microlitros de solución de mejora DELFIA a cada pocillo y las placas se leen en un lector de placas modelo PerkinElmer Victor. Los datos obtenidos se utilizan para calcular la actividad enzimática y la inhibición enzimática por posibles inhibidores.
Referencias