Azilsartan Angiotensin Receptor antagonista

A potent, orally active and specific AII receptor antagonist.

Azilsartán inhibe la unión específica de ¹²⁵I-Sar¹-Ile⁸-AII a los receptores de angiotensina tipo 1 humanos. Este compuesto también inhibe la acumulación de inositol 1-fosfato (IP1) inducida por AII en el ensayo basado en células con un valor de IC50 de 9,2 nM. En tiras de aorta de conejo aisladas, reduce la respuesta contráctil máxima a AII con un valor de pD'2 de 9,9. Los efectos inhibidores de este químico sobre las respuestas contráctiles inducidas por AII persisten después de lavar las tiras. [1] Suprime el aumento del nivel de glucosa en plasma en la prueba de tolerancia oral a la glucosa (OGTT) sin cambios significativos en la concentración de insulina y mejora la sensibilidad a la insulina. En el músculo esquelético, este agente disminuye la expresión de TNF-α a dosis del 0,001%. En el tejido adiposo, reduce la expresión de TNF-α pero aumenta la expresión de adiponectina, PPARγ, C/EBα y aP2. [2] En preadipocitos 3T3-L1 cultivados, este compuesto mejora la adipogénesis y ejerce mayores efectos que el valsartán sobre la expresión de genes que codifican el receptor activado por proliferadores de peroxisomas-α (PPARα), PPARδ, leptina, adipsina y adiponectina. También inhibe potentemente la proliferación de células vasculares en ausencia de angiotensina II suplementada exógenamente. [3]

Estudios de unión a radioligandos en receptores AT1 humanos

Un ensayo de unión a radioligandos se realiza utilizando microplacas recubiertas con receptores AT1 humanos que contienen de 4,4 a 6,2 fmol de receptores/pocillo (10 μg de proteína de membrana/pocillo). Los pocillos recubiertos de membrana se incuban con 45 μL de tampón de ensayo (50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl₂, 1 mM EDTA y 0,005% CHAPS, pH 7,4) que contiene varias concentraciones de Azilsartán a temperatura ambiente. Después de 90 minutos, se añaden a los pocillos 5 μL de ¹²⁵I-Sar¹-Ile⁸-AII (concentración final de 0,6 nM) disuelto en tampón de ensayo, y la placa se incuba durante 5 horas. En cada paso, la placa se agita breve y suavemente en un agitador de placas. En los experimentos de lavado, las membranas se incuban con este compuesto durante 90 minutos, luego se lavan inmediatamente dos veces con 200 μL/pocillo de tampón de ensayo para eliminar los compuestos no unidos, y se incuban adicionalmente durante 5 horas con ¹²⁵I-Sar¹-Ile⁸-AII. La radioactividad unida a la membrana se cuenta utilizando un contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount. En los experimentos para estimar la tasa de disociación de este químico de los receptores AT1, las membranas se incuban durante 90 minutos con este compuesto a una concentración de 30 nM. Este compuesto inhibe la unión específica de ¹²⁵I-Sar¹-Ile⁸-AII a AT1 humanos en aproximadamente un 90%. Las membranas se lavan inmediatamente dos veces con 200 μL/pocillo de tampón de ensayo y se incuban adicionalmente con ¹²⁵I-Sar¹-Ile⁸-AII durante 240 minutos. La radioactividad unida a la membrana se cuenta utilizando el contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount a los 30 minutos, 60 minutos, 90 minutos, 120 minutos, 150 minutos, 180 minutos o 240 minutos. La unión no específica de ¹²⁵I-Sar¹-Ile⁸-AII se estima en presencia de 10 μM de AII no marcado. Se añade AII no marcado de nuevo después del lavado para el experimento de lavado. La unión específica se define como la unión total menos la unión no específica.

En ratas Koletsky, el tratamiento con Azilsartán reduce la presión arterial, la concentración basal de insulina plasmática y el índice de evaluación del modelo de homeostasis de la resistencia a la insulina, e inhibió el aumento excesivo de las concentraciones plasmáticas de glucosa e insulina durante la prueba de tolerancia oral a la glucosa. Este compuesto regula a la baja la expresión de la 11β-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1. [4]