solo para uso en investigación

D-Luciferin Potassium Salt Dyes inhibidor

Cat. No.S6580

La D-luciferina es el sustrato natural de la enzima luciferasa (Luc) que cataliza la producción de la luz amarillo-verde típica de las luciérnagas. La quimioluminiscencia de 560 nm de esta reacción alcanza su punto máximo en segundos, con una emisión de luz que es proporcional a la concentración de luciferasa cuando el sustrato luciferina está presente en exceso. El gen de la luciferasa (luc) es un gen reportero popular para la investigación y el cribado de agentes. Las técnicas quimioluminiscentes están prácticamente libres de fondo, lo que hace que el gen reportero luc sea ideal para detectar la expresión génica de bajo nivel. Además de su función como reportero de la expresión génica, la luciferasa se utiliza comúnmente en un ensayo extremadamente sensible para ATP.
D-Luciferin Potassium Salt Dyes inhibidor Chemical Structure

Estructura química

Peso molecular: 318.41

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.97%
99.97

Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular 318.41 Fórmula

C11H7KN2O3S2

Almacenamiento (Desde la fecha de recepción) 3 years -20°C(in the dark) powder
Nº CAS 115144-35-9 -- Almacenamiento de soluciones madre

Sinónimos N/A Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]

Solubilidad

In vitro
Lote:

Water : 39 mg/mL

DMSO : 5 mg/mL (15.7 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa Concentración Volumen Peso molecular
Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo
Lote:

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

mg/kg g μL

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH2O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

In vitro

1.Protocolo de ejemplo para ensayos de imagen bioluminiscente in vitro
a) Preparar una solución madre de Luciferina 100 mM (100-200X) en agua estéril. Mezclar bien. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz.
b) Preparar una solución de trabajo de D-Luciferin de 0,5-1 mM en medio de cultivo tisular precalentado.
c) Aspirar el medio de las células cultivadas.
d) Añadir la solución de trabajo de Luciferina a las células e incubarlas durante 5-10 minutos a 37℃ justo antes de la imagen.
2.Protocolo de ejemplo para ensayos de imagen bioluminiscente in vivo
a) Preparar una solución madre de Luciferina de 15 mg/mL en DPBS, sin Mg2+ ni Ca2+. Mezclar bien.
b) Esterilizar la solución por filtración a través de un filtro de 0,2 μm. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz.
c) Inyectar la luciferina por vía intra-peritoneal (i.p.) 10-15 minutos antes de la imagen a 150 mg/kg (o 10 μL/g de solución madre de luciferina) del peso corporal del animal.
Nota: Se debe realizar un estudio cinético de la luciferina para cada modelo animal para determinar el tiempo de señal máxima.
3.Protocolo de ejemplo para ensayos reporteros de luciferina
a) Preparar una solución madre de Luciferina 100 mM en agua estéril. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz.
b) Preparar una solución de trabajo de D-Luciferin 1 mM con 3 mM ATP, 1 mM DTT y 15 mM MgSO4 en tampón tricina 25 mM pH 7.8.
c) Pipetear 5-10 μL de lisado celular en una microplaca. Usar reactivo de lisis o tampón sin lisado como blanco.
d) Cebar el luminómetro con la solución de trabajo de luciferina.
e) Inyectar 200 μL de solución de trabajo de luciferina sin demora y con un tiempo de integración de 10 segundos.

Referencias

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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