D-Luciferin Potassium Salt

N.º de catálogoS6580 Lote:S658004

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Datos técnicos

Fórmula

C₁₁H₇KN₂O₃S₂

Peso molecular

318.41

Número CAS

115144-35-9

Solubilidad (25°C)*

In vitro

Water

16 mg/mL (50.24 mM)

DMSO

8 mg/mL (25.12 mM)

Ethanol

Insoluble

In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.400mg/ml (1.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.400mg/ml (1.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción	La D-luciferina es el sustrato natural de la enzima luciferasa (Luc) que cataliza la producción de la luz amarillo-verde típica de las luciérnagas. La quimioluminiscencia de 560 nm de esta reacción alcanza su punto máximo en segundos, con una emisión de luz que es proporcional a la concentración de luciferasa cuando el sustrato luciferina está presente en exceso. El gen de la luciferasa (luc) es un gen reportero popular para la investigación y el cribado de agentes. Las técnicas quimioluminiscentes están prácticamente libres de fondo, lo que hace que el gen reportero luc sea ideal para detectar la expresión génica de bajo nivel. Además de su función como reportero de la expresión génica, la luciferasa se utiliza comúnmente en un ensayo extremadamente sensible para ATP.
In vitro	1.Protocolo de ejemplo para ensayos de imagen bioluminiscente in vitro a) Preparar una solución madre de Luciferina 100 mM (100-200X) en agua estéril. Mezclar bien. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz. b) Preparar una solución de trabajo de D-Luciferin de 0,5-1 mM en medio de cultivo tisular precalentado. c) Aspirar el medio de las células cultivadas. d) Añadir la solución de trabajo de Luciferina a las células e incubarlas durante 5-10 minutos a 37℃ justo antes de la imagen. 2.Protocolo de ejemplo para ensayos de imagen bioluminiscente in vivo a) Preparar una solución madre de Luciferina de 15 mg/mL en DPBS, sin Mg2+ ni Ca2+. Mezclar bien. b) Esterilizar la solución por filtración a través de un filtro de 0,2 μm. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz. c) Inyectar la luciferina por vía intra-peritoneal (i.p.) 10-15 minutos antes de la imagen a 150 mg/kg (o 10 μL/g de solución madre de luciferina) del peso corporal del animal. Nota: Se debe realizar un estudio cinético de la luciferina para cada modelo animal para determinar el tiempo de señal máxima. 3.Protocolo de ejemplo para ensayos reporteros de luciferina a) Preparar una solución madre de Luciferina 100 mM en agua estéril. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz. b) Preparar una solución de trabajo de D-Luciferin 1 mM con 3 mM ATP, 1 mM DTT y 15 mM MgSO4 en tampón tricina 25 mM pH 7.8. c) Pipetear 5-10 μL de lisado celular en una microplaca. Usar reactivo de lisis o tampón sin lisado como blanco. d) Cebar el luminómetro con la solución de trabajo de luciferina. e) Inyectar 200 μL de solución de trabajo de luciferina sin demora y con un tiempo de integración de 10 segundos.

Descripción

La D-luciferina es el sustrato natural de la enzima luciferasa (Luc) que cataliza la producción de la luz amarillo-verde típica de las luciérnagas. La quimioluminiscencia de 560 nm de esta reacción alcanza su punto máximo en segundos, con una emisión de luz que es proporcional a la concentración de luciferasa cuando el sustrato luciferina está presente en exceso. El gen de la luciferasa (luc) es un gen reportero popular para la investigación y el cribado de agentes. Las técnicas quimioluminiscentes están prácticamente libres de fondo, lo que hace que el gen reportero luc sea ideal para detectar la expresión génica de bajo nivel. Además de su función como reportero de la expresión génica, la luciferasa se utiliza comúnmente en un ensayo extremadamente sensible para ATP.

In vitro

1.Protocolo de ejemplo para ensayos de imagen bioluminiscente in vitro
a) Preparar una solución madre de Luciferina 100 mM (100-200X) en agua estéril. Mezclar bien. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz.
b) Preparar una solución de trabajo de D-Luciferin de 0,5-1 mM en medio de cultivo tisular precalentado.
c) Aspirar el medio de las células cultivadas.
d) Añadir la solución de trabajo de Luciferina a las células e incubarlas durante 5-10 minutos a 37℃ justo antes de la imagen.
2.Protocolo de ejemplo para ensayos de imagen bioluminiscente in vivo
a) Preparar una solución madre de Luciferina de 15 mg/mL en DPBS, sin Mg2+ ni Ca2+. Mezclar bien.
b) Esterilizar la solución por filtración a través de un filtro de 0,2 μm. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz.
c) Inyectar la luciferina por vía intra-peritoneal (i.p.) 10-15 minutos antes de la imagen a 150 mg/kg (o 10 μL/g de solución madre de luciferina) del peso corporal del animal.
Nota: Se debe realizar un estudio cinético de la luciferina para cada modelo animal para determinar el tiempo de señal máxima.
3.Protocolo de ejemplo para ensayos reporteros de luciferina
a) Preparar una solución madre de Luciferina 100 mM en agua estéril. Usar inmediatamente, o preparar alícuotas de un solo uso, y almacenar a -20℃, evitar ciclos de congelación-descongelación, evitar la exposición a la luz.
b) Preparar una solución de trabajo de D-Luciferin 1 mM con 3 mM ATP, 1 mM DTT y 15 mM MgSO4 en tampón tricina 25 mM pH 7.8.
c) Pipetear 5-10 μL de lisado celular en una microplaca. Usar reactivo de lisis o tampón sin lisado como blanco.
d) Cebar el luminómetro con la solución de trabajo de luciferina.
e) Inyectar 200 μL de solución de trabajo de luciferina sin demora y con un tiempo de integración de 10 segundos.

Protocolo (de referencia)

Estudio en animales:^{^[2]}	Modelos animales Female NCI Athymic nu/nu nude mice Dosificaciones 3 mg/100 μL Administración i.p.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25992288/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33485378/

Sellecks D-Luciferin Potassium Salt Ha sido citado por 4 Publicaciones

Carbenoxolone disodium suppresses the migration of gastric cancer by targeting HDAC6 [ Future Med Chem, 2023, 15(4):333-344]	PubMed: 36946221
A magneto-controlled biocatalytic cascade with a fluorescent output [ Org Biomol Chem, 2022, 20(9):1869-1873]	PubMed: 35156979
Leronlimab, a humanized monoclonal antibody to CCR5, blocks breast cancer cellular metastasis and enhances cell death induced by DNA damaging chemotherapy [ Breast Cancer Res, 2021, 23(1):11]	PubMed: 33485378
KDM4A-mediated histone demethylation of SLC7A11 inhibits cell ferroptosis in osteosarcoma [ Biochem Biophys Res Commun, 2021, 550:77-83]	PubMed: 33689883

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