Name: H-89 Dihydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1582
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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.48%

99.48

Dianas relacionadas	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A
Otros PKA Inhibidores	Dibutyryl cAMP (db cAMP/Bucladesine) sodium 8-Bromo-cAMP (8-Br-cAMP) Sodium Salt H-89 PKI 14-22 amide,myristoylated Bucladesine calcium A-3 hydrochloride Malantide CREBtide PKI(5-24)

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Concentración	Tiempo de incubación	Formulación	Descripción de la actividad	PMID
CHO	Growth Inhibition Assay	10 μM	1 h		inhibits 5-HT induced cAMP production decrease	12569069
SK-N-MC	Function Assay	30 μM	24 h	DMSO	reduces the down-regulation of β1-AR by isoproterenol by 50%	11705454
Sf9	Function assay				Inhibition of His-tagged human MSK1 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.12 μM.	10998351
Sf9	Function assay				Inhibition of rat ROCK2 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.27 μM.	10998351
SF9	Function assay				Inhibition of human PKBalpha expressed in SF9 cells, IC50 = 2.6 μM.	10998351
OVCAR8	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human OVCAR8 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM.	24508830
OVCAR8	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human OVCAR8 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM.	24389511
HL60	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human HL60 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 11.4 μM.	24389511
PC3M	Function assay				Inhibition of GSK3-beta in human PC3M cells by ELISA, IC50 = 15 μM.	18345609
U87MG	Growth inhibition assay				Growth inhibition of human U87MG cells by SRB assay, IC50 = 15 μM.	18345609
U87MG	Antiproliferative assay		96 hrs		Antiproliferative activity against human U87MG cells after 96 hrs by SRB assay, IC50 = 15 μM.	20151677
HCT116	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM.	24508830
HCT116	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM.	24389511
PC3M	Function assay		96 hrs		Inhibition of PC3M cells by SRB assay after 96 hrs, GI50 = 18 μM.	17451235
PC3M	Growth inhibition assay				Growth inhibition of human PC3M cells by SRB assay, IC50 = 18 μM.	18345609
LS174T	Function assay	20 uM	6 hrs		Inhibition of PGE2-stimulated TCF/LEF transactivation in human LS174T cells at 20 uM measured after 6 hrs by dual luciferase reporter gene assay	27736063
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	519.28	Fórmula	C₂₀H₂₀BrN₃O₂S.2HCl	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	130964-39-5	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	N/A			Smiles	C1=CC2=C(C=CN=C2)C(=C1)S(=O)(=O)NCCNCC=CC3=CC=C(C=C3)Br.Cl.Cl

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Water : 10 mg/mL

Ethanol : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	5.000mg/ml (9.63mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	5.000mg/ml (9.63mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	PKA (Cell-free assay) 48 nM(Ki) S6K1 (Cell-free assay) 80 nM PKG (Cell-free assay) 0.48 μM(Ki)
In vitro	El H89 2HCl es un potente inhibidor de la proteína quinasa A (dependiente de cAMP) PKA con K_i de 48 nM, exhibe una selectividad 10 veces mayor sobre PKG, exhibe una selectividad >500 veces mayor sobre PKC, MLCK, calmodulina quinasa II y caseína quinasa I/II. El pretratamiento de las células con este compuesto (30 μM) 1 h antes de la adición de forscolina inhibe marcadamente la fosforilación de proteínas inducida por forscolina de manera dosis-dependiente. Este compuesto también inhibe varias otras quinasas con IC50 de 80, 120, 135, 270, 2600 y 2800 nM para S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα y MAPKAP-K1b, respectivamente. También tiene actividad en algunos receptores celulares y canales iónicos, incluidos los canales Kv1.3 K⁺, β1AR y β2AR.
Ensayo de quinasa	actividad enzimática de PKA
Ensayo de quinasa	La actividad de la proteína quinasa dependiente de cAMP se ensaya en una mezcla de reacción que contiene, en un volumen final de 0.2 mL, 50 mM Tris-HCl (pH 7.0), 10 mM acetato de magnesio, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP o ausencia de cAMP, 3.3-20 μM [γ-³²P]ATP (4 × 10⁵ cpm), 0.5 μg de la enzima, 100 μg de histona H2B, y cada compuesto, según se indica.
In vivo	El H89 causa modificaciones distintas de la fosforilación de proteínas, siendo los cambios más robustos en la fosforilación la fructosa-1,6-bifosfatasa, la ribonucleoproteína nuclear heterogénea (hnRNP), el cofactor NSFL1 p47, todos los cuales tienen conexiones reguladoras potenciales con cAMP/PKA.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2156866/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10998351/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17214602/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18523239/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16687476/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	Imágenes	PMID
Western blot	p-eNOS / T-eNOS / p-PKA p-GPIbβ / GPIbβ / p-BAD p-S6K1 / p-rpS6 / p-GSK3β		31035633
Immunofluorescence	p-eNOS / eNOS iNOS / NFκB p65 myopodin		30513637

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

H-89 Dihydrochloride PKA inhibidor

Estructura química

Peso molecular: 519.28