Name: GSK2334470
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7087
Rating: 5 (29 reviews)

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Control de calidad

Lote: Pureza: 99.96%

99.96

Dianas relacionadas	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PTEN PP2A PDK
Otros PDPK1 Inhibidores	OSU-03012 (AR-12) PS-48 BX517 Indoprofen PS210 PS47

Cultivo celular, tratamiento y concentración de trabajo

Líneas celulares	Tipo de ensayo	Descripción de la actividad	PMID
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated AKT phosphorylation at Thr308 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.113 μM	21341675
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated RSK phosphorylation at Ser221 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.293 μM	21341675
K562 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human K562 cells, IC50=18 μM	21341675
OCI-AML2 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML2 cells, IC50=0.35 μM	21341675
OCI-AML3 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML3 cells, IC50=0.52 μM	21341675
F-36P cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human F-36P cells, IC50=0.28 μM	21341675
insect cells	Function assay	Inhibition of recombinant full length PDK1 (unknown origin) expressed in insect cells assessed as inhibition of Akt activation measured for 30 mins in presence of [gamma32P-ATP], IC50=0.01 μM	23448267
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Información química, almacenamiento y estabilidad

Peso molecular	462.59	Fórmula	C₂₅H₃₄N₈O	Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	3 años-20°Cpolvo
Nº CAS	1227911-45-6	Descargar SDF		Almacenamiento de soluciones madre	1 año-80°Cen disolvente 1 mes-20°Cen disolvente
Sinónimos	N/A			Smiles	CC1CCC(CN1C2=NC(=NC(=C2)C3=CC4=C(C=C3)C(=NN4)N)NC)C(=O)NC5CCCCC5

Solubilidad

In vitro
Lote:

DMSO : 93 mg/mL (201.04 mM)
(El DMSO contaminado con humedad puede reducir la solubilidad. Usar DMSO fresco y anhidro.)

Ethanol : 93 mg/mL

Water : Insoluble

Calculadora de Molaridad

Masa	Concentración	Volumen	Peso molecular
=	×	×

Calculadora de Dilución Calculadora de Peso Molecular

In vivo Lote:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, contacte con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	4.650mg/ml (10.05mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 93 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculadora de formulación in vivo (Solución clara)

Paso 1: Introduzca la información a continuación (Recomendado: Un animal adicional para tener en cuenta la pérdida durante el experimento)

Dosis: mg/kg Peso promedio de los animales: g Volumen de dosificación por animal:μL Número de animales:

Paso 2: Introduzca la formulación in vivo (Esto es solo la calculadora, no la formulación. Por favor, contáctenos primero si no hay una formulación in vivo en la sección de Solubilidad.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Resultados del cálculo:

Concentración de trabajo: mg/ml;

Método para preparar el líquido maestro de DMSO: mg fármaco predissuelto en μL DMSO ( Concentración del líquido maestro mg/mL, Por favor, contáctenos primero si la concentración excede la solubilidad del DMSO del lote del fármaco. )

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadirμL PEG300, mezclar y clarificar, luego añadirμL Tween 80, mezclar y clarificar, luego añadir μL ddH₂O, mezclar y clarificar.

Método para preparar la formulación in vivo: Tomar μL DMSO líquido maestro, luego añadir μL Aceite de maíz, mezclar y clarificar.

Nota: 1. Por favor, asegúrese de que el líquido esté claro antes de añadir el siguiente disolvente.
2. Asegúrese de añadir el (los) disolvente(s) en orden. Debe asegurarse de que la solución obtenida, en la adición anterior, sea una solución clara antes de proceder a añadir el siguiente disolvente. Se pueden utilizar métodos físicos como el vórtice, el ultrasonido o el baño de agua caliente para ayudar a la disolución.

Mecanismo de acción

Targets/IC₅₀/Ki	PDPK1 (Cell-free assay) 10 nM
In vitro	GSK2334470 inhibe a PDK1 de activar Akt1 de longitud completa en presencia de vesículas lipídicas que contienen PtdIns(3,4,5)P₃ o un mutante de Akt1 que carece del dominio PH (ΔPH-Akt1) con una IC50 de ~10 nM. Este compuesto también inhibe de manera similar a PDK1 de fosforilar el sustrato peptídico PDKtide con una IC50 de ~10 nM. A una concentración de 0,1 μM–0,3 μM, induce una inhibición significativa dosis-dependiente de NDRG1 endógeno con una reducción de más del 50 % en la fosforilación en células HEK-293. Este químico (30 nM) induce una inhibición dosis-dependiente significativa de la fosforilación del bucle T de cada isoforma de SGK en células HEK-293. A 1 μM, inhibe la fosforilación del motivo hidrofóbico de S6K1 en una medida similar a la fosforilación del bucle T en células HEK-293. Este compuesto (3 μM) también suprime la actividad y la fosforilación de S6K1 inducidas por la estimulación con IGF1 de células HEK-293 privadas de suero. A 3 μM, inhibe marcadamente la fosforilación de varios sustratos de Akt [FoxO (forkhead box O), GSK3 y PRAS40]. Este químico (3 μM) también induce una inhibición casi máxima de la actividad y fosforilación de Akt1 en 5 minutos, y la fosforilación del sustrato de Akt (FoxO, GSK3 y PRAS40) se inhibe en un punto de tiempo ligeramente posterior (10 minutos). A 0,3 μM, inhibe significativamente la fosforilación de Akt o PRAS40/GSK3 en células ES knock-in PDK1K^465E/K465E pero no en células ES de tipo salvaje. Este compuesto (1 μM) suprime eficazmente la actividad de SGK1, según lo juzgado por la inhibición de la fosforilación de NDRG1 en células de glioblastoma U87. A 1 μM, también suprime potentemente la activación de S6K1 (Figura 7B) así como de SGK1 en células MEF (fibroblasto embrionario de ratón). Este químico (0,1 μM) induce una inhibición de aproximadamente el 50 % de la actividad de RSK2 en células HEK-293. A 30 μM, suprime la fuerza sensibilizada a Ca²⁺ inducida por U46619 en SM de arteria pulmonar de conejo permeabilizada con α-toxina. Este compuesto (30 μM) provoca una disminución significativa de la fuerza contráctil en respuesta a [Ca²⁺]. A 1 μM, provoca la abolición total del aumento intracelular de calcio inducido por EGF y la acumulación de fosfatos de inositol en células MDA-MB-231. Este químico (1 μM) inhibe la fosforilación de PLCγ1 Tyr783 en células MDA-MB-231.
Ensayo de quinasa	Ensayos de actividad de quinasa
Ensayo de quinasa	Akt, S6K y RSK endógenos se inmunoprecipitan de 0,1 mg a 1 mg de lisado celular durante 2 horas a 4 °C en una plataforma vibratoria utilizando 3 μg–5 μg de los anticuerpos indicados. Para los ensayos de actividad de SGK, se incuban 150 μg de lisado transfectado con 5 μg de glutatión-Sepharose durante 3 horas a 4 °C. Los inmunoprecipitados se lavan dos veces con tampón de lisis que contiene 0,5 mM de NaCl, seguido de dos lavados con tampón de quinasa. Las reacciones de quinasa se inician con una mezcla de reacción para llevar las concentraciones finales de los componentes de la reacción a 0,1 mM de [γ-³²P]ATP (~200 c.p.m./pmol), 5 mM de acetato de magnesio, 0,1 % de 2-mercaptoetanol y 30 mM de péptido Crosstide (GRPRTSSFAEGKK). Las reacciones se llevan a cabo durante 20 minutos a 30 °C en una plataforma vibratoria y se detienen al depositar las reacciones en papel de fosfocelulosa P81. El recuento de Cerenkov se realiza después de lavar los papeles en ácido fosfórico, enjuagar en acetona y secar al aire. Una unidad de actividad se define como aquella que catalizó la incorporación de 1 nmol de [³²P]fosfato en el sustrato durante 1 hora.
In vivo	Este compuesto es un inhibidor altamente específico y potente de PDK1.
Referencias	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21087210/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23516539/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22454520/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24037523/

Aplicaciones

Métodos	Biomarcadores	Imágenes	PMID
Western blot	p-Myc / Myc / p-p70 / p70 pRb / pPDK1 / pAKT / pRSK2 / p70S6K / pPRAS40 / pS6		25762617
Immunofluorescence	KDM4A / Pol-I		26729372

Soporte técnico

Instrucciones de manipulación

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si tiene alguna otra consulta, por favor deje un mensaje.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
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C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK2334470 PDPK1 inhibidor

Estructura química

Peso molecular: 462.59