Solo para uso en investigación

Phosphatase Inhibitor Cocktail (2 Tubes, 100X)

Para la protección de la fosforilación, más inhibidores significan mejores resultados. Por eso ofrecemos dos tubos con 8 inhibidores.

Phosphatase Inhibitor Cocktail

Sellecks Ha sido citado por 613 Publicaciones

Comparación de Productos

Cálculo de Contraste de Precios
Marca Nº de cat. Tipo Envase Precio Volumen de Trabajo (1x) 1 rxn Precio
(para sistema de lisis de 1mL)
Paquete Pequeño
(100mL 1x)
Paquete Grande
(1000mL 1x)
Selleck B15001 2 Tubes (A in H2O, B in DMSO) 1mL A + 1mL B (100x) 37 USD 100mL 0.37 USD 37 USD
Sigma P5726-1ML Aqueous solution 1mL(100x) 65 USD 100mL 0.65 USD 65 USD
PIERCE 78420 Aqueous solution 1mL(100x) 107 USD 100mL 1.1 USD 107 USD
Calbiochem 524625-1ML Aqueous solution 1mL(100x) 120 USD 100mL 1.2 USD 120 USD
Roche 04906845001 Tablets 10 Tablets
(10x per tablet)
150 USD 100mL 1.5 USD 150 USD
Selleck B15002 2 Tubes
(A inH2O,
B in DMSO)
1mL A + 1mL B
(100x)x 10
270 USD 1000mL 0.27 USD 270 USD
Sigma P5726-5ML Aqueous solution 5mL(100x) 222 USD 500mL 0.44 USD 444 USD
PIERCE 78427 Aqueous solution 10mL(100x) 730 USD 1000mL 0.73 USD 730 USD
Calbiochem 524625-1SET Aqueous solution 1mL x 5(100x) 468 USD 500mL 0.94 USD 936 USD
Roche 04906837001 Tablets 20 Tablets
(10x per tablet)
180 USD 200mL 0.90 USD 900 USD

Descripción

Para la protección de la fosforilación, más inhibidores significan mejores resultados. Por eso ofrecemos dos tubos con 8 inhibidores.

La fosforilación de proteínas y lípidos es un sello distintivo del estado de señalización o metabólico de las células. Durante décadas, los investigadores han utilizado miméticos de fosfato de fácil acceso (tubo A) para prevenir la pérdida de fosforilación en biomoléculas in vitro. Sin embargo, en los últimos años se han descubierto una serie de agentes de origen natural (tubo B) como potentes inhibidores de fosfatasas, lo que aumenta el espectro de protección disponible.

Contenido

Tubo # Ingrediente Conc. 100x Objetivo
A (Aqueous) Sodium Fluoride 100 mM Acid phosphatases
Sodium Orthovanadate 100 mM Alkaline phosphatases, PTPs, ATPases
Sodium Tartrate 400 mM Acid phosphatases
Sodium Molybdate 115 mM Acid and phosphoprotein phosphatases
Imidazole 200 mM Alkaline phosphatases
B (DMSO) (-)-p-Bromotetramisole oxalate 2.5 mM Alkaline phosphatases
Cantharidin 500 μM Ser/Thr phosphatases
Microcystin LR, Microcystis aeruginosa 500 nM PP1 and PP2A

Funciona bien en detergentes comunes como SDS al 1%, Triton y NP-40
El DTT, EDTA y EGTA pueden reducir los efectos protectores del ortovanadato de sodio

Almacenamiento (desde la fecha de recepción)

El producto debe almacenarse a -20°C y es estable hasta por 2 años. Cuando se mantiene a 2-8°C, el producto permanece estable durante 2 meses.

Protocolo

Campos de Aplicación Análisis Western Blot, Co-IP, pull-down, IF, IHC, ensayo de cinasa, etc.
Protocolo Experimental Descongelar a temperatura ambiente. Antes del ensayo, añadir cada solución a una dilución de 1:100 (v/v) a las muestras (como lisados celulares o extractos de tejido). Mezclar la muestra suficientemente después de cada adición.

Nota:

Para una protección óptima de las proteínas y lípidos fosforilados, recomendamos el uso simultáneo de AMBOS tubos A y B. Debido a que los cócteles de inhibidores se dirigen a diferentes familias de fosfatasas, se observan efectos de estabilización sinérgicos con el tratamiento dual.

El cóctel de inhibidores de fosfatasa no contiene inhibidores de proteasa. Por lo tanto, recomendamos que se añada un cóctel de inhibidores de proteasa de antemano. Los cócteles de inhibidores de proteasa se utilizan con frecuencia en lisados de células de mamíferos o extractos de tejido para aumentar la estabilidad de las proteínas. Como su nombre indica, el cóctel funciona para inhibir las proteasas que degradarían los sustratos proteicos fosforilados o no fosforilados.

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Resolución de problemas

Pregunta 1:
Weak western bands for both phosphorylated and non-phosphorylated proteins.

Respuesta:
Add a protease inhibitor cocktail beforehand to protect all kinds of proteins. Selleck provides high quality protease inhibitor cocktails at competitive prices.

Pregunta 2:
Light-green sediment precipitated after mixing two tubes before use.

Respuesta:
This sediment is mainly salt precipitation. Salts in the aqueous tube and natural compounds in the DMSO tube will both be influenced by mixing. The precipitate cannot be completely re-dissolved and mixing the two tubes should be avoided. Separate addition of the two tubes is required as described in the instructions.

Pregunta 3:
Tube B takes a long time to melt.

Respuesta:
This is because DMSO thaws very slowly, especially in low temperatures. Thawing in 25℃ water bath is recommended. Dividing Tube B solution into 100ul aliquots can shorten the thawing time.