Name: P5091
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7132
Rating: 5 (57 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.91%

99.91

Gerelateerde doelwitten	Proteasome E1 Activating E3 Ligase p97 SUMO E2 conjugating
Overige DUB Inhibitoren	PR-619 IU1 P22077 b-AP15 ML323 LDN-57444 VLX1570 TCID EOAI3402143 ML364

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
Sf9 cells	Function assay		Inhibition of recombinant USP7 expressed in Sf9 cells by Ub-CHOP reporter assay, EC50=4.2 μM	24900381
human HCT116 cells	Cytotoxic assay	72 h	Cytotoxicity against human HCT116 cells after 72 hrs, EC50=11 μM	24900381
multiple myeloma cells	Function assay		Inhibition of USP7 in multiple myeloma cells (unknown origin) by immunohistochemistry, EC50 = 4.2 μM.	25364867
Sf9	Function assay	30 mins	Inhibition of full-length recombinant USP7 (unknown origin) expressed in Sf9 cells using Ub-EKL as substrate preincubated for 30 mins followed by substrate addition by fluorescence based assay, IC50 = 4.2 μM.	28768102
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	348.22	Formule	C₁₂H₇Cl₂NO₃S₂	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	882257-11-6	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	P005091			Smiles	CC(=O)C1=CC(=C(S1)SC2=C(C(=CC=C2)Cl)Cl)[N+](=O)[O-]

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 28 mg/mL (80.4 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	6.5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 48.5%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	1.950mg/ml (5.60mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 65 μL of 30 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 485 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	USP7 (Cell-free assay) 4.2 μM(EC50) USP47 (Cell-free assay) 4.3 μM
In vitro	P5091 is een trisubstitueerd thiofeen met dichlorofenylthio-, nitro- en acetylsubstituenten die anti-USP7-activiteit mediëren. Deze verbinding vertoont potente, specifieke en selectieve deubiquitylerende activiteit tegen USP7. Daarentegen remt het geen andere DUBs of andere geteste families van cysteïne-proteasen (EC50 > 100 mM). Deze chemische stof remt de labeling van USP7 met HA-UbVME op een concentratieafhankelijke manier. USP7-gemedieerde splitsing van polyubiquitineketens met hoog moleculair gewicht wordt op een dosisafhankelijke manier geremd door deze verbinding. Bovendien remt het USP7-, maar niet USP2- of USP8-gemedieerde splitsing van poly K48-gekoppelde Ubiquitin-ketens. USP7-remming door deze verbinding induceert HDM2 polyubiquitinering en versnelt de degradatie van HDM2. Het remt de USP7 deubiquitylerende activiteit, zonder de proteasoomactiviteit in MM-cellen te blokkeren. Deze chemische stof induceert een dosisafhankelijke afname van de levensvatbaarheid van verschillende MM-cellijnen. Het overwint door beenmergstroomacellen geïnduceerde groei van MM-cellen. Deze verbinding verminderde HDM2 en HDMX, en verhoogde p53- en p21-niveaus. Over het algemeen wordt de door deze verbinding geïnduceerde cytotoxiciteit gedeeltelijk gemedieerd via de HDM2-p21-signaleringsas en hoewel p53 wordt gereguleerd als reactie op deze chemische behandeling, is de cytotoxische activiteit ervan niet afhankelijk van p53.
Kinase Assay	Ubiquitin Protease Assays
Kinase Assay	Recombinante enzymen in 20 mM Tris-HCl (pH 8,0), 2 mM CaCl₂ en 2 mM β-mercaptoethanol worden gedurende 30 min geïncubeerd met dosisbereiken van P5091 in een 96-well plaat voor de toevoeging van Ub-PLA2 en NBD C6-HPC of Ub-EKL en EKL-substraat. De vrijlating van een fluorescent product binnen het lineaire bereik van de assay wordt gecontroleerd met behulp van een Perkin Elmer Envision fluorescentieplaatlezer. Vehicle (2% [v/v] DMSO) en 10 mM N-ethylmaleimide (NEM) zijn inbegrepen als controles.
In vivo	In dierlijke tumormodelstudies wordt P5091 goed verdragen, remt het de tumorgroei en verlengt het de overleving. Het combineren van deze verbinding met HDAC-remmer SAHA veroorzaakt synergetische anti-MM-activiteit.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22975377/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24900381/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35061527/