Name: GSK2334470
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7087
Rating: 5 (29 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.96%

99.96

Gerelateerde doelwitten	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PTEN PP2A PDK
Overige PDPK1 Inhibitoren	OSU-03012 (AR-12) PS-48 BX517 Indoprofen PS210 PS47

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Activiteitsbeschrijving	PMID
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated AKT phosphorylation at Thr308 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.113 μM	21341675
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated RSK phosphorylation at Ser221 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.293 μM	21341675
K562 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human K562 cells, IC50=18 μM	21341675
OCI-AML2 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML2 cells, IC50=0.35 μM	21341675
OCI-AML3 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML3 cells, IC50=0.52 μM	21341675
F-36P cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human F-36P cells, IC50=0.28 μM	21341675
insect cells	Function assay	Inhibition of recombinant full length PDK1 (unknown origin) expressed in insect cells assessed as inhibition of Akt activation measured for 30 mins in presence of [gamma32P-ATP], IC50=0.01 μM	23448267
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	462.59	Formule	C₂₅H₃₄N₈O	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1227911-45-6	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CC1CCC(CN1C2=NC(=NC(=C2)C3=CC4=C(C=C3)C(=NN4)N)NC)C(=O)NC5CCCCC5

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 93 mg/mL (201.04 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 93 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	4.650mg/ml (10.05mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 93 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	PDPK1 (Cell-free assay) 10 nM
In vitro	GSK2334470 remt PDK1 bij het activeren van full-length Akt1 in aanwezigheid van PtdIns(3,4,5)P₃-bevattende lipidemembranen of een mutant van Akt1 zonder het PH-domein (ΔPH-Akt1) met IC50 van ~10 nM. Deze verbinding remt ook op vergelijkbare wijze PDK1 bij het fosforyleren van het PDKtide-peptidesubstraat met IC50 van ~10 nM. Het (0,1 μM –0,3 μM) induceert een significante dosisafhankelijke remming van endogeen NDRG1 met meer dan 50% vermindering van fosforylering in HEK-293-cellen. Deze chemische stof (30 nM) induceert een significante dosisafhankelijke remming van de T-loop-fosforylering van elk SGK-isoform in HEK-293-cellen. Het (1 μM) remt de hydrofobe motieffosforylering van S6K1 in vergelijkbare mate als de T-loop-fosforylering in HEK-293-cellen. Deze verbinding (3 μM) onderdrukt ook S6K1-activiteit en -fosforylering geïnduceerd door IGF1-stimulatie van serumarme HEK-293-cellen. Het (3 μM) remt de fosforylering van verschillende Akt-substraten [FoxO (forkhead box O), GSK3 en PRAS40] aanzienlijk. Deze chemische stof (3 μM) induceert ook bijna maximale remming van Akt1-activiteit en -fosforylering binnen 5 min, en Akt-substraatfosforylering (FoxO, GSK3 en PRAS40) wordt geremd op een iets later tijdstip (10 min). Het (0,3 μM) remt significant de fosforylering van Akt of PRAS40/GSK3 in PDK1K^465E/K465E knock-in, maar niet in wild-type ES-cellen. Deze verbinding (1 μM) onderdrukt effectief SGK1-activiteit, afgemeten aan de remming van NDRG1-fosforylering in U87-glioblastoomcellen. Het (1 μM) onderdrukt ook krachtig de activering van S6K1 (Figuur 7B) en SGK1 in MEF-cellen (muis embryonale fibroblasten). Deze chemische stof (0,1 μM) induceert ~50% remming van RSK2-activiteit in HEK-293-cellen. Het (30 µM) onderdrukt U46619-geïnduceerde Ca²⁺-gesensibiliseerde kracht in α-toxine-gepermeabiliseerde gladde spiercellen van de pulmonale arterie van konijnen. Deze verbinding (30 µM) resulteert in een significante afname van de contractiekracht als reactie op [Ca²⁺]. Het (1 μM) resulteert in een totale opheffing van de EGF-geïnduceerde intracellulaire calciumtoename en inositol-fosfatenaccumulatie in MDA-MB-231-cellen. Deze chemische stof (1 μM) remt PLCγ1 Tyr783-fosforylering in MDA-MB-231-cellen.
Kinase Assay	Kinase-activiteitsassays
Kinase Assay	Endogeen Akt, S6K en RSK worden gedurende 2 uur bij 4 ℃ op een vibrerend platform geïmmunoprecipiteerd uit 0,1 mg tot 1 mg celextract met behulp van 3 μg –5 μg van de aangegeven antilichamen. Voor de SGK-activiteitsassays wordt 150 μg getransfecteerd lysaat geïncubeerd met 5 μg glutathion –Sepharose gedurende 3 uur bij 4 ℃. De immunoprecipitaten worden tweemaal gewassen met lysisbuffer die 0,5 mM NaCl bevat, gevolgd door tweemaal wassen met kinasebuffer. Kinase-reacties worden geïnitieerd door een reactiemengsel om de uiteindelijke concentraties van de reactiecomponenten op 0,1 mM [ γ - ³²P]ATP (~200 c.p.m./pmol), 5 mM magnesiumacetaat, 0,1% 2-mercapto-ethanol en 30 mM Crosstide-peptide (GRPRTSSFAEGKK) te brengen. Reacties worden gedurende 20 min bij 30 ℃ op een vibrerend platform uitgevoerd en gestopt door de reacties op P81-fosfocellulosepapier te druppelen. Cerenkov-telling wordt uitgevoerd na het wassen van de papieren in fosforzuur, spoelen in aceton en aan de lucht drogen. Eén activiteitseenheid wordt gedefinieerd als dat wat de incorporatie van 1 nmol [ ³²P]fosfaat in het substraat over 1 uur katalyseert.
In vivo	Deze verbinding is een zeer specifieke en krachtige remmer van PDK1.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21087210/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23516539/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22454520/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24037523/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-Myc / Myc / p-p70 / p70 pRb / pPDK1 / pAKT / pRSK2 / p70S6K / pPRAS40 / pS6		25762617
Immunofluorescence	KDM4A / Pol-I		26729372

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK2334470 PDPK1 remmer

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 462.59