GSK2334470

Catalogusnr.S7087 Batch:S708702

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C25H34N8O
Molecuulgewicht 462.59 CAS-nr. 1227911-45-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 92 mg/mL (198.88 mM)
Ethanol 92 mg/mL (198.88 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GSK2334470 is een nieuwe PDK1-remmer met een IC50 van ~10 nM in een celvrije test, zonder activiteit bij andere nauw verwante AGC-kinasen.
Doelen
PDPK1
(Cell-free assay)
10 nM
In vitro

GSK2334470 remt PDK1 bij het activeren van full-length Akt1 in aanwezigheid van PtdIns(3,4,5)P3-bevattende lipidemembranen of een mutant van Akt1 zonder het PH-domein (ΔPH-Akt1) met IC50 van ~10 nM. Deze verbinding remt ook op vergelijkbare wijze PDK1 bij het fosforyleren van het PDKtide-peptidesubstraat met IC50 van ~10 nM. Het (0,1 μM –0,3 μM) induceert een significante dosisafhankelijke remming van endogeen NDRG1 met meer dan 50% vermindering van fosforylering in HEK-293-cellen. Deze chemische stof (30 nM) induceert een significante dosisafhankelijke remming van de T-loop-fosforylering van elk SGK-isoform in HEK-293-cellen. Het (1 μM) remt de hydrofobe motieffosforylering van S6K1 in vergelijkbare mate als de T-loop-fosforylering in HEK-293-cellen. Deze verbinding (3 μM) onderdrukt ook S6K1-activiteit en -fosforylering geïnduceerd door IGF1-stimulatie van serumarme HEK-293-cellen. Het (3 μM) remt de fosforylering van verschillende Akt-substraten [FoxO (forkhead box O), GSK3 en PRAS40] aanzienlijk. Deze chemische stof (3 μM) induceert ook bijna maximale remming van Akt1-activiteit en -fosforylering binnen 5 min, en Akt-substraatfosforylering (FoxO, GSK3 en PRAS40) wordt geremd op een iets later tijdstip (10 min). Het (0,3 μM) remt significant de fosforylering van Akt of PRAS40/GSK3 in PDK1K465E/K465E knock-in, maar niet in wild-type ES-cellen. Deze verbinding (1 μM) onderdrukt effectief SGK1-activiteit, afgemeten aan de remming van NDRG1-fosforylering in U87-glioblastoomcellen. Het (1 μM) onderdrukt ook krachtig de activering van S6K1 (Figuur 7B) en SGK1 in MEF-cellen (muis embryonale fibroblasten). Deze chemische stof (0,1 μM) induceert ~50% remming van RSK2-activiteit in HEK-293-cellen.

Het (30 µM) onderdrukt U46619-geïnduceerde Ca2+-gesensibiliseerde kracht in α-toxine-gepermeabiliseerde gladde spiercellen van de pulmonale arterie van konijnen. Deze verbinding (30 µM) resulteert in een significante afname van de contractiekracht als reactie op [Ca2+].

Het (1 μM) resulteert in een totale opheffing van de EGF-geïnduceerde intracellulaire calciumtoename en inositol-fosfatenaccumulatie in MDA-MB-231-cellen. Deze chemische stof (1 μM) remt PLCγ1 Tyr783-fosforylering in MDA-MB-231-cellen.

In Vivo

Deze verbinding is een zeer specifieke en krachtige remmer van PDK1.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Kinase-activiteitsassays

    Endogeen Akt, S6K en RSK worden gedurende 2 uur bij 4 ℃ op een vibrerend platform geïmmunoprecipiteerd uit 0,1 mg tot 1 mg celextract met behulp van 3 μg –5 μg van de aangegeven antilichamen. Voor de SGK-activiteitsassays wordt 150 μg getransfecteerd lysaat geïncubeerd met 5 μg glutathion –Sepharose gedurende 3 uur bij 4 ℃. De immunoprecipitaten worden tweemaal gewassen met lysisbuffer die 0,5 mM NaCl bevat, gevolgd door tweemaal wassen met kinasebuffer. Kinase-reacties worden geïnitieerd door een reactiemengsel om de uiteindelijke concentraties van de reactiecomponenten op 0,1 mM [ γ - 32P]ATP (~200 c.p.m./pmol), 5 mM magnesiumacetaat, 0,1% 2-mercapto-ethanol en 30 mM Crosstide-peptide (GRPRTSSFAEGKK) te brengen. Reacties worden gedurende 20 min bij 30 ℃ op een vibrerend platform uitgevoerd en gestopt door de reacties op P81-fosfocellulosepapier te druppelen. Cerenkov-telling wordt uitgevoerd na het wassen van de papieren in fosforzuur, spoelen in aceton en aan de lucht drogen. Eén activiteitseenheid wordt gedefinieerd als dat wat de incorporatie van 1 nmol [ 32P]fosfaat in het substraat over 1 uur katalyseert.
Celassay:

[4]
  • Cellijnen

    MDA-MB-231 cells

  • Concentraties

    1 µM

  • Incubatietijd

    30 minutes

  • Methode

    Cells were incubated with 1 µM of GSK2334470 for 30 minutes. Cells treated with DMSO were used as control.
Dierstudie:

[4]
  • Dierlijke modellen

    Nude mice

  • Doseringen

    100 mg/kg

  • Toediening

    i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21087210/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23516539/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22454520/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24037523/

Klantproductvalidatie

(G) Effect of the PDK1 inhibitor GSK2334470 on MYC and P70 phosphorylation in CNE2/235 cell line by immunoblotting analysis. (H) Sensitivity to GSK2334470 in CNE2/235 cells after treatment with GSK2334470 for 5 d using the MTT assay. (I) Inhibitory effect of GSK2334470 in combination with BEZ235 on cell proliferation in CNE2/235 cells using the MTT assay. (J) IC50 values of BEZ235 with or without GSK2334470 in CNE2 and CNE2/235 cell lines. The data shown are representative of 3 individual experiments.

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2016, 6(7):5134-46. ]

E. TMD8<sup>IDELA-R</sup> cells were treated with vehicle, idelalisib (1 μM), GSK2334470 (1 μM), and idelalisib plus GSK2334470 for 48 hours. Apoptosis was assessed by 7AAD and PE annexin V staining, and analyzed by flow cytometry, mean ± SD, n = 3. G. TMD8<sup>IDELA-R</sup> cells were treated with vehicle, idelalisib (1 μM), GSK2334470 (1 μM), and idelalisib plus GSK2334470 for 2 hours. Protein lysates were generated and analyzed by western blot, representative experiment of n = 3. TMD8<sup>IDELA-S</sup> vehicle control was included as a reference on the same membrane.

Gegevens van [ , , PLoS One, 2017, 12(2):e0171221 ]

Sellecks GSK2334470 Is geciteerd door 30 Publicaties

Ribosomal s6 kinase is a mediator of aquaporin-2 S256 phosphorylation and membrane accumulation after EGFR inhibition with erlotinib [ Am J Physiol Renal Physiol, 2025, 328(3):F344-F359] PubMed: 39823198
A class I PI3K signalling network regulates primary cilia disassembly in normal physiology and disease [ Nat Commun, 2024, 15(1):7181] PubMed: 39168978
Punicalagin as a novel selective aryl hydrocarbon receptor (AhR) modulator upregulates AhR expression through the PDK1/p90RSK/AP-1 pathway to promote the anti-inflammatory response and bactericidal activity of macrophages [ Cell Commun Signal, 2024, 22(1):473] PubMed: 39363344
Disruption of Autophagic Flux and Treatment with the PDPK1 Inhibitor GSK2334470 Synergistically Inhibit Renal Cell Carcinoma Pathogenesis [ J Cancer, 2024, 15(5):1429-1441] PubMed: 38356720
A hotspot mutation targeting the R-RAS2 GTPase acts as a potent oncogenic driver in a wide spectrum of tumors [ Cell Rep, 2022, 38(11):110522] PubMed: 35294890
Mannan-Binding Lectin Reduces Epithelial-Mesenchymal Transition in Pulmonary Fibrosis via Inactivating the Store-Operated Calcium Entry Machinery [ J Innate Immun, 2022, 1-13] PubMed: 35671705
Αξιολόγηση του ρόλου της GSK2334470 στον παγκρεατικό καρκίνο [ LABORATORY OF PHARMACOLOGY DEPARTMENT OF MEDICINE, 2022, ] PubMed: None
Pulmonary fibrosis distal airway epithelia are dynamically and structurally dysfunctional [ Nat Commun, 2021, 12(1):4566] PubMed: 34315881
The 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 is an essential upstream activator of protein kinase A in malaria parasites [ PLoS Biol, 2021, 19(12):e3001483] PubMed: 34879056
PDK1 is a negative regulator of axon regeneration [ Mol Brain, 2021, 14(1):31] PubMed: 33579325

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.