Y-27632 Dihydrochloride

Y-27632 2HCl inhibe ROCK-II mientras que muestra poca actividad contra PKC, proteína quinasa dependiente de cAMP y quinasa de la cadena ligera de miosina (MLCK) con K_i de 26 μM, 25 μM y > 250 μM, respectivamente, así como PKA activada por otro miembro de la GTPasa de la familia Rho, Cdc42. Este compuesto inhibe la contracción del músculo liso inducida por varios agonistas, incluyendo fenilefrina, histamina, acetilcolina, serotonina, endotelina y tromboxano con una IC50 de 0,3-1 μM, inhibiendo selectivamente la sensibilización a Ca²⁺. Suprime la formación de fibras de estrés mediada por Rho y p160ROCK en células cultivadas. [1]

Este tratamiento químico bloquea tanto la activación de la actomiosina mediada por Rho como la actividad invasiva estimulada por LPA de las células MM1 de manera dependiente de la concentración. [2]

Este tratamiento con el compuesto no solo es suficiente para iniciar la formación de procesos axonales exuberantes, sino que también facilita la maduración axonal durante las primeras etapas de la axonogénesis, respetando en gran medida la elongación axonal. [3]

En células madre embrionarias humanas (hES), este tratamiento químico a 10 μM disminuye notablemente la apoptosis inducida por la disociación incluso en cultivo en suspensión sin suero (SFEB), aumenta la eficiencia de clonación (de ~1% a ~27%), facilita la subclonación después de la transferencia de genes y permite que las células hES cultivadas en SFEB sobrevivan y se diferencien en progenitores corticales y telencefálicos basales Bf1⁺. [4]

La administración oral de Y-27632 2HCl a 30 mg/kg disminuye significativamente la presión arterial de manera dosis-dependiente en ratas espontáneamente hipertensas, ratas hipertensas renales, así como ratas hipertensas por acetato de desoxicorticosterona (DOCA)-sal. [1]

Cuando este compuesto se administra continuamente a una tasa de 0,55 μL por hora mediante bombas implantadas durante 11 días, la invasión de células tumorales (células MM1 que expresan Val14-RhoA en ratas) se retrasa significativamente. [2]

Al inhibir ROCK, este tratamiento químico atenúa la angiogénesis inducida por hipoxia y la remodelación vascular en la circulación pulmonar. [5] El pretratamiento con este compuesto tiene un efecto protector contra la formación de tumores en ratones albinos con carcinoma ascítico de Ehrlich. [7]

• Reacciones de fosforilación

  La p160ROCK se expresa en células COS como proteínas de longitud completa etiquetadas, y se inmunoprecipita mediante el uso de anticuerpos anti-etiqueta. La p160ROCK (30 ng) se incuba con 40 μM [γ-³²P]ATP (3,3 Ci/mmol) y con 3 μg de histona (HF2A), caseína desfosforilada o MBP en presencia de varias concentraciones de este compuesto a 30 °C en un volumen total de 31 μL. Se toma una alícuota de 7 μL a los 0, 5, 10 y 20 minutos, se mezcla con un volumen igual de tampón de muestra 2 × Laemmli y se aplica a SDS-PAGE. El gel se tiñe con azul de Coomassie, se seca y se somete a análisis mediante un analizador de bioimágenes BAS2000. Se obtiene la concentración de este químico requerida para inhibir la actividad de p160ROCK en un 50% (valor IC50). El valor de K_i se calcula de acuerdo con la ecuación, K_i = IC50/(1 + S/K_m), donde S y K_m representan las concentraciones y el valor de K_m para ATP.

• Líneas celulares

  hES Cells

• Concentraciones

  10 uM

• Tiempo de incubación

  1 h

• Método

  Y-27632 2HCl was added to culture medium at 10 uM 1 h before detaching the cells from the feeder layer and also upon seeding the cells onto a new MEF layer.

• Modelos animales

  Male Wistar rats with spontaneous or induced hypertension; Swiss albino mice with Ehrlich ascites carcinoma

• Dosificaciones

  30 mg/kg/day (Rat); 0-10 mg/kg (mice)

• Administración

  Orally (Rat); i.p. (Mice)