WZ4003

N.º de catálogoS7317 Lote:S731701

Imprimir

Datos técnicos

Fórmula

C₂₅H₂₉ClN₆O₃

Peso molecular

496.99

Número CAS

1214265-58-3

Solubilidad (25°C)*

In vitro

DMSO

10 mg/mL (20.12 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.350mg/ml (0.70mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 7 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	0.350mg/ml (0.70mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 7 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción

WZ4003 es un inhibidor altamente específico de la NUAK quinasa con un IC50 de 20 nM y 100 nM para NUAK1 y NUAK2 en ensayos basados en células, respectivamente, sin inhibición significativa en otras 139 quinasas.

Objetivos

NUAK1 (Cell-free assay)	NUAK2 (Cell-free assay)
20 nM	100 nM

In vitro

En células HEK-293 que expresan NUAK1 de tipo salvaje, WZ4003 (3–10 μM) suprime marcadamente la fosforilación de MYPT1 mediada por NUAK1. Además, este compuesto (10 μM) inhibe la fosforilación de MYPT1 Ser445, así como la migración, invasión y proliferación celular en una extensión similar a la eliminación de NUAK1 en MEF o la reducción en células U2OS. También exhibe una alta afinidad específica por el EGFR mutante L858R/T790M, mientras que se observa una IC50 celular significativamente reducida contra las células Ba/F3 que contienen T790M.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:^{^[1]}	Determinación de IC50 Las enzimas activas GST–NUAK1, GST–NUAK1[A195T] y GST–NUAK2 se purifican utilizando glutatión–Sepharose a partir de lisados de células HEK-293 36–48 h después de la transfección transitoria de constructos mamíferos pEBG2T que expresan NUAK1, NUAK1[A195T] o NUAK2 con etiqueta GST N-terminal. Para los ensayos de quinasa peptídica, se utilizan placas de 96 pocillos, y cada reacción se realiza por triplicado. Cada reacción se prepara en un volumen total de 50 μL que contiene 100 ng de NUAK1 (tipo salvaje o mutante A195T) o NUAK2 en 50 mM Tris/HCl (pH 7,5), 0,1 mM EGTA, 10 mM acetato de magnesio, 200 μM Sakamotótido, 0,1 mM [γ -³²P]ATP (450–500 c.p.m./pmol) y las concentraciones indicadas de inhibidores disueltos en DMSO. Después de la incubación durante 30 min a 30 °C, las reacciones se terminan añadiendo 25 mM (final) de EDTA para quelar el magnesio. Luego, 40 μL de la mezcla de reacción se aplican sobre papel P81 y se sumergen en ácido ortofosfórico 50 mM. Las muestras se lavan tres veces en ácido ortofosfórico 50 mM, seguido de un único enjuague con acetona y secado al aire. La incorporación de [γ -³²P]ATP en Sakamotótido se cuantifica mediante recuento de Cerenkov. Los valores se expresan como un porcentaje del control de DMSO. Se desarrollan curvas de IC50 y los valores de IC50 se calculan utilizando el software GraphPad Prism.
Ensayo celular:^{^[1]}	Líneas celulares U2OS cells, and MEFs Concentraciones ~10 μM Tiempo de incubación 5 days Método Cell proliferation assays are carried out colorimetrically in 96-well plates using the CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay kit following the manufacturer’s protocol. Initially, 2000 cells per well are seeded for U2OS cells and 3000 cells per well are seeded for MEFs. The proliferation assays are carried out over 5 days in the presence or absence of 10 μM this compound.

Ensayo de quinasa:^{^[1]}

Determinación de IC50
Las enzimas activas GST–NUAK1, GST–NUAK1[A195T] y GST–NUAK2 se purifican utilizando glutatión–Sepharose a partir de lisados de células HEK-293 36–48 h después de la transfección transitoria de constructos mamíferos pEBG2T que expresan NUAK1, NUAK1[A195T] o NUAK2 con etiqueta GST N-terminal. Para los ensayos de quinasa peptídica, se utilizan placas de 96 pocillos, y cada reacción se realiza por triplicado. Cada reacción se prepara en un volumen total de 50 μL que contiene 100 ng de NUAK1 (tipo salvaje o mutante A195T) o NUAK2 en 50 mM Tris/HCl (pH 7,5), 0,1 mM EGTA, 10 mM acetato de magnesio, 200 μM Sakamotótido, 0,1 mM [γ -³²P]ATP (450–500 c.p.m./pmol) y las concentraciones indicadas de inhibidores disueltos en DMSO. Después de la incubación durante 30 min a 30 °C, las reacciones se terminan añadiendo 25 mM (final) de EDTA para quelar el magnesio. Luego, 40 μL de la mezcla de reacción se aplican sobre papel P81 y se sumergen en ácido ortofosfórico 50 mM. Las muestras se lavan tres veces en ácido ortofosfórico 50 mM, seguido de un único enjuague con acetona y secado al aire. La incorporación de [γ -³²P]ATP en Sakamotótido se cuantifica mediante recuento de Cerenkov. Los valores se expresan como un porcentaje del control de DMSO. Se desarrollan curvas de IC50 y los valores de IC50 se calculan utilizando el software GraphPad Prism.

Ensayo celular:^{^[1]}

Líneas celulares
U2OS cells, and MEFs
Concentraciones
~10 μM
Tiempo de incubación
5 days
Método
Cell proliferation assays are carried out colorimetrically in 96-well plates using the CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay kit following the manufacturer’s protocol. Initially, 2000 cells per well are seeded for U2OS cells and 3000 cells per well are seeded for MEFs. The proliferation assays are carried out over 5 days in the presence or absence of 10 μM this compound.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24171924/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20033049/

Validación de productos por parte del cliente

: , , J Cell Mol Med, 2017, 21(7):1411-1419

: Datos de [ , , Brain Behav Immun, 2018, 72:89-100 ]

Sellecks WZ4003 Ha sido citado por 15 Publicaciones

NUAK1 activates STAT5/GLI1/SOX2 signaling to enhance cancer cell expansion and drives chemoresistance in gastric cancer [ Cell Rep, 2024, 43(7):114446]	PubMed: 38996065
The Roles and Regulatory Mechanisms of Tight Junction Protein Cingulin and Transcription Factor Forkhead Box Protein O1 in Human Lung [ Int J Mol Sci, 2024, 25(3):1411.]	PubMed: 38338691
The Roles and Regulatory Mechanisms of Tight Junction Protein Cingulin and Transcription Factor Forkhead Box Protein O1 in Human Lung Adenocarcinoma A549 Cells and Normal Lung Epithelial Cells [ Int J Mol Sci, 2024, 25(3)1411]	PubMed: 38338691
Localized Inhibition of Protein Phosphatase 1 by NUAK1 Promotes Spliceosome Activity and Reveals a MYC-Sensitive Feedback Control of Transcription. [ Mol Cell, 2020, 77(6):1322-1339]	PubMed: 32006464
Dual targeting of NUAK1 and ULK1 using the multitargeted inhibitor MRT68921 exerts potent antitumor activities [ Cell Death Dis, 2020, 11(8):712]	PubMed: 32873786
Microglia-Derived Extracellular Vesicles Carrying miR-711 Alleviate Neurodegeneration in a Murine Alzheimer's Disease Model by Binding to Itpkb [ Front Cell Dev Biol, 2020, 8:566530]	PubMed: 33240878
Safflor yellow A protects vascular endothelial cells from ox-LDL-mediated damage [ J Recept Signal Transduct Res, 2020, 1-8]	PubMed: 33167774
WZ4003 sensitizes non-small cell lung cancer cells to gefitinib via inhibition of ARK5 and epithelial-to-mesenchymal transition [ Am J Transl Res, 2020, 12(11):7377-7385]	PubMed: 33312374
Endothelial HNF4α potentiates angiogenic dysfunction via enhancement of vascular endothelial growth factor resistance in T2DM. [ J Cell Biochem, 2019, 120(8):12989-13000]	PubMed: 30873661
An Ancient Chinese Herbal Decoction Containing Angelicae Sinensis Radix, Astragali Radix, Jujuba Fructus, and Zingiberis Rhizoma Recens Stimulates the Browning Conversion of White Adipocyte in Cultured 3T3-L1 Cells. [ Evid Based Complement Alternat Med, 2019, 2019:3648685]	PubMed: 31316571

POLÍTICA DE DEVOLUCIÓN
La Política de Devolución Incondicional de Selleck Chemical garantiza una experiencia de compra en línea fluida para nuestros clientes. Si no está satisfecho con su compra de alguna manera, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 7 días posteriores a su recepción. En caso de problemas de calidad del producto, ya sean problemas relacionados con el protocolo o con el producto, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 365 días a partir de la fecha de compra original. Siga las instrucciones a continuación al devolver productos.

ENVÍO Y ALMACENAMIENTO
Los productos Selleck se transportan a temperatura ambiente. Si recibe el producto a temperatura ambiente, tenga la seguridad de que el Departamento de Inspección de Calidad de Selleck ha realizado experimentos para verificar que la colocación a temperatura normal durante un mes no afectará la actividad biológica de los productos en polvo. Después de la recogida, guarde el producto de acuerdo con los requisitos descritos en la hoja de datos. La mayoría de los productos Selleck son estables en las condiciones recomendadas.

NO PARA USO HUMANO, DIAGNÓSTICO VETERINARIO O TERAPÉUTICO.