WYE-125132 (WYE-132)

N.º de catálogoS2661 Lote:S266101

Imprimir

Datos técnicos

Fórmula

C₂₇H₃₃N₇O₄

Peso molecular

519.6

Número CAS

1144068-46-1

Solubilidad (25°C)*

In vitro

DMSO

104 mg/mL (200.15 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.	30.000mg/ml (57.74mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción

WYE-125132 (WYE-132) es un inhibidor de mTOR altamente potente y competitivo de ATP con una IC50 de 0,19 nM; es altamente selectivo para mTOR frente a PI3K o quinasas relacionadas con PI3K hSMG1 y ATR.

Objetivos

mTOR
(Cell-free assay)

0.19 nM

In vitro

WYE-125132 (WYE-132) inhibe potentemente y de forma ATP-competitiva la quinasa mTOR recombinante con una IC50 de 0,19 nM y también muestra una alta selectividad sobre varias PI3K y un panel de 230 proteínas quinasas. In vitro, exhibe una actividad antiproliferativa significativa contra un panel de líneas celulares tumorales con IC50 que van desde 2 nM (LNCap) hasta 380 nM (HTC116). Además, este compuesto también causa la progresión del ciclo celular, la inducción de la apoptosis y la inhibición de la síntesis de proteínas y el tamaño celular. Resulta en una reducción significativa en la síntesis de pre-tRNA^Leu en un 72%, 80% y 53% en células de MG63, MDA361 y HEK293 en proliferación activa, respectivamente, al inhibir mTORC1. Además, también se encuentra que WYE-125132 induce la desfosforilación de Maf1 (regulador negativo de la transcripción de Pol III) y su acumulación en el núcleo.

In vivo

WYE-125132 (WYE-132) (5 mg/kg p.o.) produce una actividad antitumoral significativa y provoca un retraso dependiente de la dosis en el crecimiento tumoral en el modelo tumoral MDA361 hiperactivo en PI3K/mTOR y HER2. Además, también muestra una potente eficacia antitumoral en los modelos de glioma U87MG sin PTEN, y de cáncer de pulmón no microcítico H1975 y A549.

Características

Un inhibidor de la quinasa mTOR altamente potente, competitivo de ATP y específico.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:^{^[1]}	Ensayos de quinasa Los ensayos enzimáticos de mTOR mediante inmunoensayo fluorescente de lantánidos mejorado por disociación (DELFIA), ensayos matriciales de ATP y ensayos de quinasa de inmunocomplejos de mTOR se realizan de la siguiente manera para WYE-125132 (WYE-132). El TOR endógeno del lisado de células LNCap se inmunoprecipita con anti-FRAP/TOR (N-19). El lisado celular (1,0 mg) se mezcla con 4 μg de anticuerpo acoplado a agarosa de proteína-G/A en 1 mL de tampón de lisis. Los inmunocomplejos se lavan secuencialmente con tampón de lisis, tampón de lisis más 500 mM KCl y tampón de lavado de quinasa. Los inmunocomplejos se someten a una reacción de quinasa durante 30 minutos a 30 °C en un volumen final de 50 μL que contiene 10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glicerofosfato y 0,5 μM microcistina LR, 1 mM DTT, 10 mM MnCl₂, 100 μM ATP, 1 μg His6-S6K o 1 μg His6-4EBP1. Las reacciones de quinasa (enzimas en inmunocomplejo y purificadas) se terminan con tampón de muestra NuPAGE LDS y se resuelven en un gel NuPAGE Bis-Tris al 4-12% para Western blotting con anti-P(T389)-p70S6K y anti-P(T46)-4EBP1, anti-FRAP/TOR (N-19), anti-FLAG M2 y anti-His6 (Clon His-1). En el ensayo radiactivo, se utilizan 10 μCi [γ-³²P]ATP (3000 Ci/mmol) y 100 μM de ATP frío. Los productos marcados con ³²P se resuelven mediante SDS-PAGE y se someten a autorradiografía en películas de rayos X Kodak.
Ensayo celular:^{^[1]}	Líneas celulares MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, BT549, LNCap, A549, H1975, H157, H460, U87MG, A498, 786-O, HCT116, MG63, Rat1, HEK293, and HeLa Concentraciones 0 to 10 μM Tiempo de incubación 24 hours Método Cell lines of MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, BT549, LNCap, A549, H1975, H157, H460, U87MG, A498, 786-O, HCT116, MG63, Rat1, HEK293, and HeLa are obtained from the American Type Culture Collection. Cell growth assays and IC50 determination are described as follows. For tumor cell growth assays, cells are plated in 96-well culture plates at 1000 to 3000 cells per well for 24 hours, treated with DMSO or various doses of WYE-125132 (WYE-132). Viable cell densities are determined three days later by MTS assay employing an assay kit following the kit assay protocol. The effect of each treatment is calculated as percent of control growth relative to the DMSO-treated cells grown in the same culture plate. Inhibitor dose response curves are plotted for determination of IC50 values.
Estudio en animales:^{^[1]}	Modelos animales U87MG, MDA361, H1975, A549, A498, and 786-O cells are injected s.c. into the right flank of CD1 nu/nu mice. Dosificaciones ≤50 mg/kg Administración Administered via i.v. or p.o.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20068177/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20233713/

Validación de productos por parte del cliente

: Datos de [ J Cell Sci , 2014 , 127(Pt 4), 788-800 ]

Sellecks WYE-125132 (WYE-132) Ha sido citado por 9 Publicaciones

Suppression of MYC by PI3K/AKT/mTOR pathway inhibition in combination with all-trans retinoic acid treatment for therapeutic gain in acute myeloid leukaemia [ Br J Haematol, 2022, 10.1111/bjh.18187]	PubMed: 35468223
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575]	PubMed: 35326726
Expression of HYOU1 via Reciprocal Crosstalk between NSCLC Cells and HUVECs Control Cancer Progression and Chemoresistance in Tumor Spheroids [ Mol Cells, 2021, 44(1):50-62]	PubMed: 33455947
An evolutionarily young defense metabolite influences the root growth of plants via the ancient TOR signaling pathway [ Elife, 2017, 6e29353]	PubMed: 29231169
mTOR inhibitors activate PERK signaling and favor viability of gastrointestinal neuroendocrine cell lines [ Oncotarget, 2017, 8(13):20974-20987]	PubMed: 28423496
Rapalogs can promote cancer cell stemness in vitro in a Galectin-1 and H-ras-dependent manner [ Oncotarget, 2017, 8(27):44550-44566]	PubMed: 28562352
Adaptation to mTOR kinase inhibitors by amplification of eIF4E to maintain cap-dependent translation. [Cope CL, et al. J Cell Sci, 2014, 127(Pt 4):788-800]	PubMed: 24363449
Deciphering Combinations of PI3K/AKT/mTOR Pathway Drugs Augmenting Anti-Angiogenic Efficacy In Vivo [Sasore T, et al PLoS One, 2014, 9(8):e105280]	PubMed: 25144531
Murine dendritic cell rapamycin-resistant and rictor-independent mTOR controls IL-10, B7-H1, and regulatory T-cell induction. [ Blood, 2013, 121(18):3619-30]	PubMed: 23444404

POLÍTICA DE DEVOLUCIÓN
La Política de Devolución Incondicional de Selleck Chemical garantiza una experiencia de compra en línea fluida para nuestros clientes. Si no está satisfecho con su compra de alguna manera, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 7 días posteriores a su recepción. En caso de problemas de calidad del producto, ya sean problemas relacionados con el protocolo o con el producto, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 365 días a partir de la fecha de compra original. Siga las instrucciones a continuación al devolver productos.

ENVÍO Y ALMACENAMIENTO
Los productos Selleck se transportan a temperatura ambiente. Si recibe el producto a temperatura ambiente, tenga la seguridad de que el Departamento de Inspección de Calidad de Selleck ha realizado experimentos para verificar que la colocación a temperatura normal durante un mes no afectará la actividad biológica de los productos en polvo. Después de la recogida, guarde el producto de acuerdo con los requisitos descritos en la hoja de datos. La mayoría de los productos Selleck son estables en las condiciones recomendadas.

NO PARA USO HUMANO, DIAGNÓSTICO VETERINARIO O TERAPÉUTICO.