Vismodegib (GDC-0449)

Vismodegib (GDC-0449) se dirige a la vía de señalización Hedgehog, bloqueando las actividades de los receptores de superficie celular PTCH y/o SMO del ligando Hedgehog y suprimiendo la señalización Hedgehog. Este compuesto previene múltiples transportadores de casete de unión a ATP (ABC) y también bloquea ABCG2, Pgp y MRP1, importantes transportadores ABC asociados con la MDR. Es un potente inhibidor de los transportadores ABC, ABCG2/BCRP y ABCB1/Pgp, y un inhibidor suave de ABCC1/MRP1. En células HEK293 que sobreexpresan ABCG2, aumenta la retención del sustrato fluorescente de ABCG2 BODIPY y resensibiliza estas células. En células de riñón canino Madin-Darby II diseñadas para sobreexpresar Pgp o MRP1, aumenta la retención de calceína-AM y las resensibiliza. También resensibiliza las células de carcinoma de pulmón no microcítico humano NCI-H460/par y NCI-H460/MX20, que sobreexpresan ABCG2 en respuesta a SN-38. Los valores de IC50 para la prevención de ABCG2 y Pgp son aproximadamente 1,4 μM y 3,0 μM, respectivamente. [2] Además, altera la homeostasis intracelular de Ca²⁺ e inhibe el crecimiento celular en células de cáncer de pulmón resistentes. [3]

Vismodegib (GDC-0449) se ha utilizado para tratar el meduloblastoma en modelos animales. [2] Previene el crecimiento de xenoinjertos pancreáticos primarios sin inhibir inespecíficamente la proliferación de células pancreáticas. La dosificación oral de este compuesto provoca regresiones tumorales en el modelo de aloinjerto de meduloblastoma Ptch(+/-) a dosis ≥25 mg/kg e inhibición del crecimiento tumoral a dosis de hasta 92 mg/kg administradas dos veces al día en dos modelos de cáncer colorrectal dependientes del ligando, D5123 y 1040830. El análisis de la actividad de la vía Hh y el modelado PK/PD revelan que inhibe Gli1 con una IC50 similar tanto en el modelo de meduloblastoma como en el D5123 (0,165 μM y 0,267 μM, respectivamente). La modulación de la vía se vincula a la eficacia mediante un modelo PK/PD integrado que revela una relación pronunciada donde > 50% de la actividad de GDC-0449 se asocia con > 80% de represión de la vía Hh. [4]

• Líneas celulares

  MDCKII cells

• Concentraciones

  20 μM

• Tiempo de incubación

  2 hours

• Método

  MDCKII cells are seeded into 24-well plates at a density of 3 × 10⁵ cells per well and are allowed to attach. Medium is then changed to that containing different drugs (50 μM VP, or 20 μM Vismodegib (GDC-0449) in DMSO or DMSO alone as control, and nonfluorescent calcein-AM is added to a final concentration of 1.0 μM and incubated at 37 °C for 2 hours. It is then used in subsequent steps. Cells are washed twice with Ca²⁺, Mg²⁺-containing Hank's balanced salt solution buffer and lysed by shaking in 0.01% Triton X-100 in PBS buffer for 1 hour at room temperature or overnight at 4 °C. The lysate is then transferred into 96-well plates, and the fluorescence signal caused by the cell-derived calcein is quantified spectrophotometrically with a SpectraMax M5 Multi-Detection Readerusing an excitation wavelength of 495 nm and an emission wavelength of 515 nm. All manipulations are performed in the dark. All readings are expressed as mean ?SEM normalized to the control.

• Modelos animales

  Ptch(+/-) allograft model, D5123 and 1040830

• Dosificaciones

  ~ 100 mg/kg

• Administración

  Orally