PLX4032 (Vemurafenib)

N.º de catálogoS1267 Lote:S126714

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Datos técnicos

Fórmula

C23H18ClF2N3O3S
Peso molecular 489.92 Número CAS 918504-65-1
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 98 mg/mL (200.03 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción Vemurafenib (PLX4032, RG7204, RO5185426) es un nuevo y potente inhibidor de B-RafV600E con una IC50 de 31 nM en un ensayo sin células. 10 veces más selectivo para B-RafV600E que para B-Raf de tipo salvaje en ensayos enzimáticos y la selectividad celular puede superar las 100 veces. Vemurafenib (PLX4032, RG7204) induce la Autophagy.
Objetivos
SRMS
(Cell-free assay)		 ACK1
(Cell-free assay)		 B-Raf (V600E)
(Cell-free assay)		 C-Raf
(Cell-free assay)		 MAP4K5 (KHS1)
(Cell-free assay)		 Ver más
18 nM 19 nM 31 nM 48 nM 51 nM
In vitro Vemurafenib (PLX4032) inhibe B-RAFV600E, C-RAF, así como B-RAF de tipo salvaje, con IC50 de 31 nM, 48 nM y 100 nM, respectivamente. Este compuesto también inhibe varias quinasas no RAF, incluyendo ACK1, KHS1 y SRMS, con IC50 de 18 nM a 51 nM. En las líneas celulares de melanoma, el efecto inhibidor depende del estado mutacional de B-RAF, ya que inhibe potentemente aquellas que albergan mutantes B-RAF V600, incluyendo V600E, V600D, V600K y V600R, pero no el tipo salvaje u otros mutantes. Los valores de IC50 en estas células, incluyendo MALME-3M, Colo829, Colo38, A375, SK-MEL28 y A2058, oscilan entre 20 nM y 1 μM. En estas células, Vemurafenib (0,1 μM a 30 μM) también inhibe la fosforilación de MEK1/2 y ERK1/2. Es muy eficaz en el tratamiento del melanoma, por su capacidad de inhibir B-RAFV600E. Sin embargo, este compuesto muestra un efecto limitado en pacientes con cáncer de colon que también portan la oncoproteína B-RAFV600E. La razón de esto es que, en las células de cáncer de colon, la inhibición de B-RAFV600E por él da como resultado una rápida activación por retroalimentación del EGFR, que compensa la proliferación celular inhibida por PLX4032.
In vivo En modelos de xenoinjertos de ratones con mutación B-RAFV600E, Vemurafenib (PLX4032) (6 mg/kg–20 mg/kg) inhibe el crecimiento tumoral. En modelos de xenoinjertos de ratones de células LOX, Colo829 y A375, este compuesto (12,5 mg/kg–100 mg/kg) inhibe el crecimiento tumoral y prolonga la supervivencia de los ratones.
Características Un nuevo y potente inhibidor de la oncoproteína B-RAFV600E.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:

[1]
  • Mediciones de la actividad de la quinasa RAF

    Las actividades quinasa de RAF de tipo salvaje y mutantes se determinan midiendo la fosforilación de la proteína BAD biotinilada en presencia de Vemurafenib (PLX4032). Para cada enzima (0,01 ng), se realizan reacciones de 20 μL en 20 mM Hepes (pH 7,0), 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 0,01% (v/v) Tween-20, 50 nM de proteína biotina-BAD y 1 mM de ATP a temperatura ambiente. Las reacciones se detienen a los 5 min con 5 μL de una solución que contiene 20 mM Hepes (pH 7,0), 200 mM NaCl, 80 mM EDTA, 0,3% (p/v) de albúmina sérica bovina (BSA). La solución de parada también incluye anticuerpo anti-fosfo-BAD (Ser112), perlas donadoras recubiertas de estreptavidina y perlas aceptoras de proteína A. El anticuerpo y las perlas se preincuban en la solución de parada en la oscuridad a temperatura ambiente durante 30 min. La dilución final del anticuerpo es de 1/2000 y la concentración final de cada perla es de 10 μg/mL. Las placas de ensayo se incuban a temperatura ambiente durante una hora y luego se leen en un lector PerkinElmer AlphaQuest. Las actividades mutantes son el promedio de dos lotes diferentes de proteína purificada ensayados por duplicado en tres experimentos diferentes.
Ensayo celular:

[2]
  • Líneas celulares

    MALME-3M, Colo829, Colo38, A375, SK-MEL28, and A2058 cells

  • Concentraciones

    0–10 μM , dissolved in DMSO

  • Tiempo de incubación

    5 days

  • Método

    Cellular proliferation is evaluated by MTT assay. Briefly, cells are plated in 96-well microtiter plates at a density of 1000 to 5000 cells per well in a volume of 180 μL. Vemurafenib (PLX4032) is prepared at 10 times the final assay concentration in media containing 1% DMSO. Twenty-four hours after cell plating, 20 μL of the appropriate dilution of this compound are added to plates in duplicate. The plates are assayed for proliferation 6 days after the cells are plated. Percent inhibition is calculated and the IC50 is determined from the regression of a plot of the logarithm of the concentration versus percent inhibition.
Estudio en animales:

[2]
  • Modelos animales

    Mice (athymic nude) xenograft models of LOX, Colo829, and A375 cells

  • Dosificaciones

    12.5 mg/kg–100 mg/kg

  • Administración

    Oral gavage twice daily

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20823850/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20551065/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22281684/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15808862/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22180495/

Validación de productos por parte del cliente

The regressing tumour microenvironment stimulates the outgrowth, infiltration and metastasis of drug-resistant clones. b, Bioluminescent signal of drug-resistant A375RTGL cells in vemurafenib-sensitive, A375 tumours, treated with vehicle or vemurafenib for 5 days (vehicle, n = 36; vemurafenib, n = 15 tumours). D, day. c, EdU incorporation in A375R-TGL cells in A375/A375R-TGL tumours treated with vehicle or vemurafenib for 4 days, as determined by FACS (vehicle, n = 8; vemurafenib, n = 6 tumours). d, Bioluminescent signal of A375R-TGL tumours alone, treated with vehicle or vemurafenib for 5 days (vehicle, n 5 38; vemurafenib, n = 15 tumours). e, Bioluminescent signal of TGLexpressing drug-resistant cancer cells (A375R, M249R4, PC9 and H2030) in drug-sensitive tumours (Colo800, LOX, UACC62, M249, H3122 and HCC827) treated with vehicle or drugs (vemurafenib, crizotinib and erlotinib) for 5 days (n (from left to right on the graph) = 6, 7, 12, 12, 9, 9, 25, 26, 9, 12, 12, 12, 16 and 11 tumours). f, Spontaneous lung metastasis by A375R cells in mice bearing A375/A375R-TGL tumours treated with vehicle or vemurafenib (10 days), visualized by BLI (n = 4).

Datos de [ Nature , 2015 , 520(7547), 368-72 ]

FRA1 downregulation during RAFi treatment drives the reactive secretome. c, Relative mRNA levels of FRA1 during vemurafenib exposure [0.1-1 uM]. d, Representative immunofluorescence staining of A375/A375R tumours for GFP (A375R, green) and FRA1 (red) after vehicle or vemurafenib treatment (5 days). DAPI, 49,6-diamidino-2-phenylindole. Scale bars, 50 um.

Datos de [ Nature , 2015 , 520(7547), 368-72 ]

The B-Raf inhibitor PLX4032 decreases cell surface DR5 levels . BCPAP cells were treated with the indicated concentrations of PLX4032 for 12 h and then harvested for extraction of cellular total RNA and subsequent RT-PCR to detection of DR5.

Datos de [ Oncogene , 2015 , 10.1038/onc.2015.97 ]

Acquired EGFR expression in BRAF(V600E) mutant melanoma after vemurafenib resistance. Immunohistochemical (IHC) analysis (ultraView DAB stain, brown) showing increased EGFR expression in formalin-fixed paraffin embedded (FFPE) (Patient number 1-5) and frozen (Patient number 6) melanoma tissue sections from BRAF(V600E) mutant melanoma patients who developed resistance to vemurafenib, dabrafenib or trametinib as indicated. For each patient, the first biopsy is from the pre-treatment tumour; the second biopsy was performed after the tumour had progressed under treatment. For patient number 4, the first biopsy was performed when the patient was in partial response, but rapidly developed secondary resistance. Then 4.5 months later, the second biopsy was taken.

Datos de [ Nature , 2014 , 508(7494), 118-22 ]

Sellecks PLX4032 (Vemurafenib) Ha sido citado por 714 Publicaciones

Pan-inhibition of super-enhancer-driven oncogenic transcription by next-generation synthetic ecteinascidins yields potent anti-cancer activity [ Nat Commun, 2025, 16(1):512] PubMed: 39779693
Blocking interplay between TERT and c-Myc: a new therapeutic strategy for BRAFV600E/pTERT double mutated tumors [ Int J Biol Sci, 2025, 21(11):4961-4978] PubMed: 40860184
Downregulated ALDH2 Contributes to Tumor Progression and Targeted Therapy Resistance in Human Metastatic Melanoma Cells [ Cells, 2025, 14(12)913] PubMed: 40558540
Inter-Relationship Between Melanoma Vemurafenib Tolerance Thresholds and Metabolic Pathway Choice [ Cells, 2025, 14(12)923] PubMed: 40558548
Exploiting Paradoxical Activation of Oncogenic MAPK Signaling by Targeting Mitochondria to Sensitize NRAS Mutant-Melanoma to Vemurafenib [ Int J Mol Sci, 2025, 26(6)2675] PubMed: 40141318
Acquired resistance to vemurafenib restrains thyroid cancer stem cell self-renewal by suppressing STAT3 activation [ Cell Signal, 2025, 133:111845] PubMed: 40345509
Dihydrotanshinone I enhanced BRAF mutant melanoma treatment efficacy by inhibiting the STAT3/SOX2 signaling pathway [ Front Oncol, 2025, 15:1429018] PubMed: 39944829
Suppression of Sebum Production by Vemurafenib Through Paradoxical ERK Activation Resulted in the Inhibition of the mTOR Pathway in 5α-Dihydrotestosterone-Differentiated Hamster Sebocytes In Vitro [ Exp Dermatol, 2025, 34(8):e70150] PubMed: 40817681
Selective inhibition of p300 by a novel small molecule EPS496 promotes cell death in vemurafenib-resistant BRAFV600E mutated melanoma cells [ Biochem Biophys Res Commun, 2025, 750:151382] PubMed: 39884005
Increased Mitochondrial Superoxide Level Is Partially Associated With Vemurafenib-Induced Renal Tubular Toxicity [ Basic Clin Pharmacol Toxicol, 2025, 136(4):e70015] PubMed: 40018909

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