Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)

N.º de catálogoA2045 Batch: A204502

Datos técnicos

Número CAS	943609-66-3
Fórmula	PBS Buffer, PH 7.4
Isotipo	Human IgG1
Aplicación	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)
Almacenamiento (Desde la fecha de recepción)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles.
Pureza	98%
Concentración de proteínas:	5.72mg/ml
Nivel de endotoxinas	＜1EU/mg

Actividad biológica

Descripción	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) es un anticuerpo monoclonal IgG1 humanizado que se dirige a la α4β7 integrin para el tratamiento de la colitis ulcerosa y la enfermedad de Crohn.
In vitro	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) se une a un subconjunto de linfocitos T CD4⁺ de memoria de sangre periférica humana, incluidos los linfocitos T cooperadores 17 de interleucina con tropismo intestinal al nivel más alto, también se une a los eosinófilos a niveles altos, y a los linfocitos T cooperadores ingenuos, linfocitos T citotóxicos ingenuos y de memoria, linfocitos B, células asesinas naturales y basófilos a niveles más bajos; Vedolizumab se une a los linfocitos T CD4⁺ de memoria y a los linfocitos B con una potencia subnanomolar con una EC50 de 0,3-0,4 nM.

Descripción

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) es un anticuerpo monoclonal IgG1 humanizado que se dirige a la α4β7 integrin para el tratamiento de la colitis ulcerosa y la enfermedad de Crohn.

In vitro

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) se une a un subconjunto de linfocitos T CD4⁺ de memoria de sangre periférica humana, incluidos los linfocitos T cooperadores 17 de interleucina con tropismo intestinal al nivel más alto, también se une a los eosinófilos a niveles altos, y a los linfocitos T cooperadores ingenuos, linfocitos T citotóxicos ingenuos y de memoria, linfocitos B, células asesinas naturales y basófilos a niveles más bajos; Vedolizumab se une a los linfocitos T CD4⁺ de memoria y a los linfocitos B con una potencia subnanomolar con una EC50 de 0,3-0,4 nM.

Protocolo (solo para referencia)

Ensayo celular:	Las PBMC se resuspendieron en tampón de ensayo para la tinción intracelular de interleucina (IL) 17A de células de memoria CD4. Las PBMC se estimularon (o no se estimularon, para las muestras de control) con 50 ng/ml de forbol 12-miristato 13-acetato y 1 µg/ml de ionomicina en presencia de 3 µM de monensina durante 5 h a 37°C. Después del lavado, las células se tiñeron con anticuerpos marcados con fluorescencia: Vedolizumab, anti-α4 y anti-β7, anti-CD4 y anti-CD45RO, cuando correspondía, a 4°C durante 30 min. Luego, las células se lavaron con PBS frío y se resuspendieron en una solución de trabajo de fijación y permeabilización tampón de tinción a 4°C durante 30 min. Después de la fijación y permeabilización, las células se lavaron con tampón de permeabilización y se bloquearon con suero de rata normal al 10% a 4°C durante 10 min. Después del paso de bloqueo, las células se tiñeron con anticuerpo anti_x0002_IL17A conjugado con fluorocromo a 4°C durante 30 min. Finalmente, las células se lavaron con tampón de permeabilización y se analizaron.

Ensayo celular:

Las PBMC se resuspendieron en tampón de ensayo para la tinción intracelular de interleucina (IL) 17A de células de memoria CD4. Las PBMC se estimularon (o no se estimularon, para las muestras de control) con 50 ng/ml de forbol 12-miristato 13-acetato y 1 µg/ml de ionomicina en presencia de 3 µM de monensina durante 5 h a 37°C. Después del lavado, las células se tiñeron con anticuerpos marcados con fluorescencia: Vedolizumab, anti-α4 y anti-β7, anti-CD4 y anti-CD45RO, cuando correspondía, a 4°C durante 30 min. Luego, las células se lavaron con PBS frío y se resuspendieron en una solución de trabajo de fijación y permeabilización tampón de tinción a 4°C durante 30 min. Después de la fijación y permeabilización, las células se lavaron con tampón de permeabilización y se bloquearon con suero de rata normal al 10% a 4°C durante 10 min. Después del paso de bloqueo, las células se tiñeron con anticuerpo anti_x0002_IL17A conjugado con fluorocromo a 4°C durante 30 min. Finalmente, las células se lavaron con tampón de permeabilización y se analizaron.

Referencias	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

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