Tofacitinib (CP-690550)

N.º de catálogoS2789 Lote:S278908

Imprimir

Datos técnicos

Fórmula

C16H20N6O
Peso molecular 312.37 Número CAS 477600-75-2
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 62 mg/mL (198.48 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción Tofacitinib es un nuevo inhibidor de JAK3 con una IC50 de 1 nM en ensayos sin células, 20 a 100 veces menos potente contra JAK2 y JAK1. Este compuesto inhibe la expresión de BCL-A1 y BCL-XL antiapoptóticas en células dendríticas plasmacitoides humanas (PDC) e induce la apoptosis de las PDC.
Objetivos
JAK3
(Cell-free assay)		 JAK2
(Cell-free assay)		 JAK1
(Cell-free assay)
1 nM 20 nM 112 nM
In vitro CP-690550 es un inhibidor oral específico de JAK3, es de 20 a 100 veces menos potente para JAK2 y JAK1 con una IC50 de 20 nM y 112 nM, respectivamente. Este compuesto no tiene una actividad potente contra otras 30 quinasas (todas las IC50 medianas > 3000 nM). Inhibe la proliferación inducida por IL-2 con una potencia 30 veces mayor que sus efectos sobre la proliferación inducida por GM-CSF. Esta sustancia química inhibe eficazmente una reacción linfocitaria mixta murina (MLR) (IC50 = 91 nM). Inhibe potentemente la regulación al alza de CD23 inducida por IL-4 (IC50=57 nM) y la expresión del complejo mayor de histocompatibilidad de clase II (MHCII) (IC50=71 nM) en células B murinas. Una investigación reciente indica que una dosis baja de este compuesto acelera el inicio de la encefalomielitis autoinmune experimental al potenciar la diferenciación de Th17.
In vivo En un modelo murino de trasplante cardíaco heterotópico (corazón de donante DBA2 en huésped C57/BL6), Tofacitinib resulta en un aumento dosis-dependiente de la supervivencia de los corazones trasplantados. La EC50 (concentración del fármaco en sangre a la que el 50% de los ratones mantendrá su injerto durante >28 días) es de ~60 ng/mL. Este compuesto previene el rechazo de riñones alogénicos en primates no humanos (NHPs, macaca fascicularis) (MST de 62 y 83 días para los grupos de 50 a 100 ng/ml y 200 a 400 ng/ml, respectivamente). Ratones dosificados crónicamente con este compuesto (1,5-15 mg/kg/día) demuestran alteraciones dosis y tiempo-dependientes en los subconjuntos de linfocitos cuando se examinan por citometría de flujo. El cambio más dramático observado es una reducción del 96% en el número de células esplénicas NK1.1+TCRb después de 21 días de tratamiento. Las respuestas de hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) en ratones sensibilizados se reducen de forma dosis-dependiente después del tratamiento con esta sustancia química (1,87–30 mg/kg, s.c.). La supervivencia prolongada de corazones neonatales Balb/c implantados en el pabellón auricular de ratones C3H/HEN con MHC no compatible se observa con esta monoterapia (10–30 mg/kg/día), pero mejora al combinarse con ciclosporina (10 mg/kg/día).

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:

[1]
  • Ensayo de la cinasa JAK3

    Un fragmento que codifica el dominio catalítico de la JAK3 humana (785aa a 1125aa, dominio catalítico JH1) se amplifica por PCR a partir del ADNc de longitud completa y se clona en el sitio EcoRI del vector de transferencia de baculovirus pVL1393. Se utiliza baculovirus recombinante para infectar células Sf9 (Spodoptera frugipedra) y se aísla la proteína de fusión GSTJAK3 recombinante en sefarosa de glutatión. La proteína de fusión se eluye con glutatión reducido y se almacena en un tampón que contiene 50 mM Tris, pH 7,5, 10 mM DTT y 10% de glicerol. La actividad de la cinasa JAK3 se mide mediante ELISA de la siguiente manera: Las placas se recubren durante la noche con un copolímero aleatorio de ácido L-glutámico y tirosina (4:1) (100 ug/mL). Las placas se lavan y la JAK3 JH1:GST recombinante (100 ng/pocillo) con o sin inhibidores se incuba a temperatura ambiente durante 30 minutos, tras lo cual se añade el anticuerpo anti-fosfotirosina PY20 conjugado con HRP (ICN) y se desarrolla con TMB (3,3',5,5'-tetrametilbencidina). Otras cinasas (Tabla 1) se producen en E. coli o en células de insectos, dependiendo de lo que se encuentre que sea óptimo para la cinasa dada. La actividad catalítica de las tirosina cinasas se mide utilizando el ELISA antes mencionado, mientras que las serina/treonina cinasas se ensayan utilizando ensayos enzimáticos radioactivos.
Ensayo celular:

[1]
  • Líneas celulares

    Human T blasts cell

  • Concentraciones

    0-4000 nM

  • Tiempo de incubación

    4 days

  • Método

    To measure IL-2-dependent proliferation, isolated lymphocytes are resuspended to a cell density of 1-2 × 106/mL in complete RPMI medium (RPMI 1640 containing 10% (w/v) fetal calf serum (FCS), 1%(w/v) penicillin and treptomycin).Phytohemagluttinin (PHA) is added to a final concentration of 10mg/mL, and the culture incubated for 3 days at 37 °C in a humidified 5% (v/v) CO2 incubator to upregulate IL-2R and JAK3 expression. IL-2 (200U/mL), with or without this compound is then added and the cells are incubated for 72 hours at 37 °C in a humidified 5% (v/v) CO2 incubator, after which 50 mL of 3H-thymidine (5mCi/mL) is added. The plates are incubated for an additional 18 hours, harvested with a 96-well harvester, and counted on a scintillation counter. HUO3 cells are maintained in culture with granulocyte-macrophage colony stimulating factor and human foreskin fibroblasts are maintained in culture with 10% fetal calf serum. This compound is added to freshly plated cells and cultured for 4 days. 3Hthymidine is added during the last 18 hours of the culture period.
Estudio en animales:

[1]
  • Modelos animales

    DBA/2 and C57/BL6 mice

  • Dosificaciones

    0-136 ng/mL

  • Administración

    Administered via osmotic minipump infusion

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14593182/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14678034/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18242596/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22252297/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16378072/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14678034/

Validación de productos por parte del cliente

TRAP-positive multinucleated cell differentiation depends on JAK and is inhibited by tofacitinib in vitro. Effect of tofacitinib on the differentiation of TRAP-positive multi-nucleated cells in vitro (n =3 wells/experiment). Original magnification x 100.

Datos de [ Arthritis Rheumatol , 2014 , 66(1), 121-9 ]

Effect of a panel of IFN inhibitors on BUNΔNSs virus growth in A549 cells. The inhibitor panel consists of small molecules that target the IKK2 (TPCA-1) and TBK1 (BX795, MRT6884, MRT6707) components of the IFN induction pathway and JAK1 (Cyt387, AZD1480, Ruxolitinib, Tofacitinib) a component of the IFN signaling pathway. Effect of the inhibitors was compared with A549 cells constitutively expressing viral IFN antagonists that block IFN production (BVDV-Npro) or IFN signaling (PIV5-V). Effect of various inhibitor concentrations on plaque size formation. Plaques were visualized 2 days post-infection by crystal violet staining.

Datos de [ PLoS One , 2014 , 9(11), e112014 ]

Effects of CP-690550 on NKTCL cell lines. NK-S1, KHYG-1 cells were treated with CP-690550 for 48 hours, and the effect on STAT5 phosphorylation was evaluated by Western blotting.

Datos de [ Cancer Discov , 2012 , 2(7), 591-7 ]

AE cells were treated with vehicle control (DMSO), a MEK inhibitor (PD98059), a PI3K inhibitor (LY294002) or a JAK2 inhibitor (CP690550) at indicated concentrations for 24 hours, followed by lysis for immunoblotting.

Datos de [ Blood , 2012 , 120(4), 709-19 ]

Sellecks Tofacitinib (CP-690550) Ha sido citado por 195 Publicaciones

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
In silico modeling guides identification of novel JAK1 variants associated with immune dysregulation [ EMBO Mol Med, 2025, 10.1038/s44321-025-00317-0] PubMed: 41136770
Differential effects of tofacitinib on macrophage activation contribute to lack of response in ulcerative colitis patients [ J Crohns Colitis, 2025, 19(6)jjaf076] PubMed: 40320713
Keloids and inflammation: the crucial role of IL-33 in epidermal changes [ Front Immunol, 2025, 16:1514618] PubMed: 40230853
Rheumatoid arthritis associated cytokines and therapeutics modulate immune checkpoint receptor expression on T cells [ Front Immunol, 2025, 16:1534462] PubMed: 39981237
Polarization of Vδ2 T cells to a Th2-like phenotype promotes plasmablast differentiation and possesses pro-fibrotic properties in IgG4-related disease [ Front Immunol, 2025, 16:1550405] PubMed: 40213561
Membrane-bound IL-15 co-expression powers a potent and persistent CD70-targeted TRuC T-cell therapy [ Front Immunol, 2025, 16:1609658] PubMed: 40519930
Associations between ionomic profile and metabolic abnormalities in a murine model of sodium sulfide induced alopecia areata [ Front Pharmacol, 2025, 16:1507348] PubMed: 40438604
Targeting interferon responses in juvenile dermatomyositis: Siglec-1 as an in vitro biomarker for JAK inhibitor efficacy [ Rheumatology (Oxford), 2025, keaf227] PubMed: 40372702
Unidirectional Crosstalk Between NTRK1 and IGF2 Drives ER Stress in Chronic Pain [ Biomedicines, 2025, 13(7)1632] PubMed: 40722704

POLÍTICA DE DEVOLUCIÓN
La Política de Devolución Incondicional de Selleck Chemical garantiza una experiencia de compra en línea fluida para nuestros clientes. Si no está satisfecho con su compra de alguna manera, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 7 días posteriores a su recepción. En caso de problemas de calidad del producto, ya sean problemas relacionados con el protocolo o con el producto, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 365 días a partir de la fecha de compra original. Siga las instrucciones a continuación al devolver productos.

ENVÍO Y ALMACENAMIENTO
Los productos Selleck se transportan a temperatura ambiente. Si recibe el producto a temperatura ambiente, tenga la seguridad de que el Departamento de Inspección de Calidad de Selleck ha realizado experimentos para verificar que la colocación a temperatura normal durante un mes no afectará la actividad biológica de los productos en polvo. Después de la recogida, guarde el producto de acuerdo con los requisitos descritos en la hoja de datos. La mayoría de los productos Selleck son estables en las condiciones recomendadas.

NO PARA USO HUMANO, DIAGNÓSTICO VETERINARIO O TERAPÉUTICO.