Tariquidar (XR9576)

Tariquidar muestra una unión de alta afinidad a la P-gp con una B_max de 275 pmol/mg. Este compuesto muestra una interacción no competitiva con los sustratos de P-gp. Aumenta la acumulación en estado estacionario de estos citotóxicos en células CH^rB30 a niveles observados en células AuxB1 que no expresan P-gp con una EC50 de 487 nM. Este químico es capaz de inhibir la actividad ATPasa sensible al vanadato de la P-gp en un 60-70%, con potentes valores de IC50 de 43 nM. [1] Puede inhibir otros mecanismos de resistencia a concentraciones más altas. 1 µM de este compuesto anula la resistencia mediada por ABCG2 (BCRP) a las camptotecinas in vitro. [2] Potencia la citotoxicidad de varios fármacos, incluida la doxorrubicina; se logra una reversión completa de la resistencia en presencia de 25-80 nM de este químico. En MC26, una línea celular de carcinoma de colon murino con quimiorresistencia intrínseca, la IC50 de doxorrubicina es cinco veces menor en presencia de 0,1 µM de este compuesto (36 frente a 7 nM). En líneas celulares de carcinoma mamario murino, carcinoma de pulmón de células pequeñas humano y carcinoma ovárico humano con resistencia quimioterapéutica adquirida (EMT6/AR1.0, H69/LX4 y 2780 AD), la IC50 de doxorrubicina in vitro es 22-150 veces menor en presencia de 0,1 µM de este químico. La inhibición de P-gp persiste durante 23 h después de su eliminación del sistema de cultivo. [3] Restauró la citotoxicidad de la doxorrubicina en el modelo de esferoide tumoral multicelular NCI/ADR^RES (National Cancer Institute) derivado de la línea celular de cáncer de mama MCF7^WT. [4]

Se ha descubierto que Tariquidar (2-8 mg/kg p.o.) potencia significativamente la actividad antitumoral de la doxorrubicina (5 mg/kg, i.v.) contra el carcinoma de colon murino MC26 in vivo. En xenoinjertos de carcinoma humano, la coadministración de este compuesto (6-12 mg/kg p.o.) restauró completamente la actividad antitumoral contra dos xenoinjertos tumorales humanos MDR altamente resistentes (2780AD, H69/LX4) en ratones nude. [3]

• Ensayo de acumulación de fármacos en estado estacionario

  Las células se incuban en un volumen de reacción de 1 mL durante 60 min a 37 ℃ bajo 5% de CO₂ para alcanzar el estado estacionario. El efecto de los moduladores XR9576 sobre la acumulación del ligando [³H] se investiga en el rango de concentración de 10^-9 - 10^-6 M. Este compuesto se añade a partir de una solución madre de DMSO, dando una concentración final de disolvente del 0,2 % (v/v). Después de la recolección celular, el fármaco acumulado se mide mediante recuento por centelleo líquido y se normaliza según el contenido de proteína celular. Las gráficas de la cantidad acumulada en función de la concentración del modulador se ajustan con la ecuación general dosis-respuesta: Y={(a-b)/(1+(X/c)^d)}+b, donde: Y=respuesta; a=respuesta inicial; b=respuesta final; c=concentración EC50; d=valor de la pendiente; X=concentración del fármaco.

• Líneas celulares

  Murine mammary carcinoma cell line MDR EMT6/AR1.0

• Concentraciones

  ~100 nM Tariquidar

• Tiempo de incubación

  4 days

• Método

  Cells are seeded into 96-well plates at 800/well, in 100 μL of medium and incubated for 4 h at 37 ℃. Varying concentrations of this compound or solvent control (50 μL/well) are subsequently added and incubated for an additional 1 h before the addition of the cytotoxic drug. The cytotoxic drug (50 μL) is added to give a range of final concentrations in quadruplicate wells. After incubation for an additional 4 days, cell proliferation of adherent cells is assessed using the sulforhodamine B assay.

• Modelos animales

  Murine colon carcinoma xenografts MC26

• Dosificaciones

  8 mg/kg

• Administración

  Coadministration of Tariquidar (p.o.) with doxorubicin (5 mg/kg, i.v.)