SM-164

SM-164 se une a XIAP que contiene ambos dominios BIR con una IC50 de 1,39 nM, siendo 300 y 7000 veces más potente que sus homólogos monovalentes y el péptido natural Smac AVPI, respectivamente. Este compuesto se dirige a XIAP celular e induce eficazmente la apoptosis en concentraciones tan bajas como 1 nM en la línea celular de leucemia HL-60. [1]

Esta sustancia química induce la apoptosis dependiente de caspasa-8 y caspasa-3 en células cancerosas. También induce la apoptosis dependiente de TNFα y la degradación de cIAP-1. [2]

Es altamente sinérgico con TRAIL in vitro en líneas celulares cancerosas tanto sensibles como resistentes a TRAIL de cáncer de mama, próstata y colon. Este compuesto mejora la apoptosis inducida por TRAIL en células cancerosas mediante la amplificación de la vía extrínseca de apoptosis mediada por caspasa-8 [3]

SM-164 induce una rápida degradación de cIAP-1 y una fuerte apoptosis en los tejidos tumorales de xenoinjerto MDA-MB-231 y logra la regresión tumoral, pero no tiene toxicidad en los tejidos de ratón normales. [2]

Este compuesto induce la degradación de cIAP1 en los tejidos tumorales y mejora drásticamente la actividad antitumoral in vivo de TRAIL, y la combinación de esta sustancia química y TRAIL logra la regresión tumoral sin toxicidad para los animales. [3]

• Ensayos de unión.

  Se describe el ensayo basado en FP para la proteína XIAP BIR3. Brevemente, la 5-carboxifluoresceína se acopla a la cadena lateral de lisina de un péptido Smac mutado con la secuencia y este péptido marcado fluorescentemente (denominado SM5F) se utiliza como trazador fluorescente en el ensayo de unión basado en FP a XIAP BIR3. El valor de Kd de este trazador fluorescente se determina en 17,9 nM para XIAP BIR3. En experimentos de unión competitiva, un compuesto probado se incuba con 30 nM de proteína XIAP BIR3 y 5 nM de SM5F en el tampón de ensayo (100 mM fosfato de potasio, pH 7,5; 100 μg/ml globulina gamma bovina; 0,02 % azida de sodio). El valor de Kd de SM5F para la proteína cIAP-1 BIR3 se determina en 4,1 nM. En experimentos de unión competitiva, se utilizan 10 nM de proteína cIAP-1 BIR3 y 2 nM de trazador SM5F. El valor de Kd de SM5F para la proteína cIAP-2 BIR3 se determina en 6,6 nM. En experimentos de unión competitiva, se utilizan 25 nM de proteína cIAP-2 BIR3 y 2 nM de trazador SM5F. Para determinar las afinidades de unión de los miméticos Smac a XIAP que contienen ambos dominios BIR2 y BIR3, se establece un ensayo de unión competitiva basado en FP utilizando un trazador bivalente marcado fluorescentemente, denominado Smac-1F. El valor de Kd del trazador marcado bivalente para XIAP que contiene los dominios BIR2 y BIR3 se determina en 2,3 nM. En experimentos de unión competitiva, un compuesto probado se incuba con 3 nM de proteína XIAP que contiene ambos dominios BIR2 y BIR3 (residuos 120-356) y 1 nM en el mismo tampón de ensayo.

• Líneas celulares

  HT-29 cells

• Concentraciones

  1 μM

• Tiempo de incubación

  6 or 12 h

• Método

  Cells pre-treated with HG (5 μM) for 30 min were treatment with SM-164 (1 μM) for 6 or 12 h.

• Modelos animales

  MDA-MB-231 xenografted SCID mice

• Dosificaciones

  1 and 5 mg/kg

• Administración

  i.v.