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In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.
4mg/ml
(8.34mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 80 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Validado por los laboratorios Selleck. Si necesita ajustes en esta formulación, póngase en contacto con nuestro equipo de ventas para pruebas personalizadas.
2mg/ml
(4.17mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 40 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble. * Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes. * Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)
Preparación de soluciones madre
Actividad biológica
Descripción
SBE 13 HCl es un potente y selectivo inhibidor de PLK1 con una IC50 de 200 pM, y una selectividad >4000 veces mayor sobre Aurora A quinasa, Plk2 y Plk3.
Objetivos
PLK1
200 pM
In vitro
SBE 13 disminuye la proliferación celular en varias líneas celulares cancerosas y provoca una detención en G2/M seguida de apoptosis. En células primarias, SBE 13 no altera el Cell Cycle y, por lo tanto, la proliferación de células primarias. SBE13 en combinación con Enzastaurin muestra una reducción sinérgica de la proliferación celular y una inducción mejorada de la apoptosis en células HCT116(p53-/-).
Para ensayar la actividad de las quinasas Plk1 y Aurora A, las células se lisan después de 13 horas de liberación en presencia de SBE13 tras un doble bloqueo de timidina, y las quinasas se inmunoprecipitan a partir de los lisados utilizando anticuerpos como se describe. En resumen, para cada inmunoprecipitación, se incubaron 800 µg de proteína total con 1,5 µg de cóctel de anticuerpos Plk1, 3 µg de anticuerpo Plk2, 3 µg de anticuerpo Plk3 o 5 µg de anticuerpo Aurora A, respectivamente, durante 2 horas a 4°C en un rotador. La proteína inmunoprecipitada se recoge utilizando perlas de agarosa de proteína G. Los inmunoprecipitados de Plk1, Plk2 y Plk3 se incuban con 1 µg de caseína y con 1 µCi de [γ32-P]ATP durante 30 min a 37°C en tampón de quinasa. Los inmunoprecipitados de Aurora A se incuban con 0,5 µl de Histona y con 1 µCi de [γ32-P]ATP durante 60 min a temperatura ambiente en tampón de quinasa. Los productos de los ensayos de quinasa se fraccionan en geles de poliacrilamida Bis-Tris al 10%, y el sustrato fosforilado se visualiza mediante autorradiografía después de una exposición de 12 a 36 horas. Una cantidad igual de inmunoprecipitados se somete a análisis de western blot para confirmar la carga igual de la proteína Plk1, Plk2, Plk3 o Aurora A en las reacciones de quinasa. La Plk1 inmunoprecipitada después de 13 horas de liberación en presencia de SBE13 se ensaya después de la desfosforilación utilizando λ proteína fosfatasa y se compara con la actividad quinasa de la Plk1 endógena inmunoprecipitada. Se compara la actividad de la quinasa Plk1 con y sin desfosforilación y se calcula la relación entre la actividad quinasa de la Plk1 endógena inmunoprecipitada desfosforilada y la «normal».
Cells are treated with SBE13 one day after subculturing. Control cells are incubated with normal culture medium. Concentrations of SBE13 ranged from 1 nM–100 µM. The growth rate of 1 x 105 cells per 6-well is determined by counting cells at 24, 48 and 72 hours after treatment. Cell culture studies are performed in triplicate for each time point.
Referencias
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20139717/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21301227/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24810255/
Sellecks SBE 13 HCl Ha sido citado por 5 Publicaciones
Inhibition of Polo-like kinase 1 (PLK1) facilitates the elimination of HIV-1 viral reservoirs in CD4 + T cells ex vivo
[ Sci Adv, 2020, 6(29):eaba1941]
SF3B1 deficiency impairs human erythropoiesis via activation of p53 pathway: implications for understanding of ineffective erythropoiesis in MDS
[ J Hematol Oncol, 2018, 11(1):19]
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