SB-525334

SB 525334 no muestra inhibición en las enzimas ALK2, 3 y 6, con valores de IC50 > 10 µM. SB 525334 bloquea la fosforilación inducida por TGF-β1 y la translocación nuclear de Smad2/3 en células del túbulo proximal renal. SB 525334 también inhibe el aumento de los niveles de expresión de ARNm del inhibidor del activador del plasminógeno-1 (PAI-1) y del procolágeno α1(I) inducidos por TGF-β1 en células de carcinoma epitelial renal A498 a 1 µM). [1] SB 525334 (1 µM) atenúa la mayor sensibilidad al TGF-β1 exhibida por las células musculares lisas de la arteria pulmonar (PASMCs) de pacientes con formas familiares de hipertensión arterial pulmonar idiopática (HAP). [2]

SB 525334 (10 mg/kg/día) disminuye los niveles de ARNm renales de PAI-1, procolágeno α1(I) y procolágeno α1(III) en un modelo de rata de fibrosis renal inducida por nefritis. Además, la proteinuria inducida por PAN se inhibe significativamente con SB 525334 (10 mg/kg/día). [1] SB 525334 también puede ser eficaz en tumores mesenquimales. SB 525334 (10 mg/kg/día) disminuye significativamente la incidencia, multiplicidad y tamaño de los tumores mesenquimales uterinos en ratas Eker. [3] SB 525334 revierte significativamente la presión arterial pulmonar e inhibe la hipertrofia ventricular derecha en un modelo de rata de HAP. Esto se revela por una reducción significativa de la muscularización arteriolar pulmonar inducida por monocrotalina (utilizada para inducir HAP) después del tratamiento con SB 525334 (3 o 30 mg/kg). [2] En un modelo de ratones con fibrosis pulmonar inducida, SB 525334 (10 mg/kg o 30 mg/kg) atenúa las alteraciones histopatológicas en el pulmón y disminuye significativamente la expresión de ARNm de procolágeno tipo I y III y fibronectina. SB 525334 también atenúa la translocación nuclear de Smad2/3, la proliferación de miofibroblastos, la deposición de colágeno tipo I y disminuye las células que expresan CTGF. [4]

• Ensayo de quinasa para determinar la potencia y selectividad de SB 525334

  Para determinar la potencia de SB 525334, el dominio quinasa purificado de ALK5 con etiqueta GST se incuba con Smad3 de longitud completa purificado con etiqueta GST en presencia de ³³P-γATP y diferentes concentraciones de SB 525334. La lectura es Smad3 radiomarcado. Para determinar la selectividad de SB 525334, el dominio quinasa purificado de ALK2 y ALK4 con etiqueta GST se incuba con Smad1 y Smad3 de longitud completa con etiqueta GST, respectivamente, en presencia de diferentes concentraciones de SB 525334. Se calculan los valores de IC50.

• Líneas celulares

  Human renal proximal tubule epithelial (RPTE) cells

• Concentraciones

  1 μM

• Tiempo de incubación

  1 hour

• Método

  RPTE cells are seeded on microscope slides. The following day, the cells are starved for 24 hours to dosing by removal of the serum and epidermal growth factor. Cells are treated with either 10 ng/mL TGF-β1, 1 μM SB 525334, or a combination of both. Slides are pretreated with SB 525334 or starve media for 3 hours prior to a 1-hour incubation at 37 °C with TGF-β1 or starve media. The cells are then fixed and permeabilized. The slides are blocked with BSA, incubated with a mouse anti-Smad2/3 primary antibody followed by an anti-mouse IgG secondary antibody. The slides are then viewed in a confocal microscope and nuclear signal intensity is analyzed.

• Modelos animales

  induced pulmonary fibrosis in female Eker rats

• Dosificaciones

  Estimated dose of 10 mg/kg/day

• Administración

  Oral (in drinking water)