SB202190

SB 202190 inhibe significativamente tanto la actividad basal como la inducida por anticuerpos anti-Fas de MAPKAPK 2 de forma dosis-dependiente. Este compuesto por sí solo es suficiente para inducir la muerte celular en células Jurkat y HeLa a través de la activación de caspasas tipo CPP32, lo que puede ser bloqueado por la expresión de bcl-2. Su apoptosis es atenuada por p38β pero aumentada por p38α. [2] El compuesto químico inhibe fuertemente la expresión de la proteína COX-2 inducida por UVB en células HaCaT, y marcadamente inhibe el ARNm de cox-2 inducido por UVB. [3] El tratamiento con este inhibidor inhibe la expresión de genes proinflamatorios (monocyte chemoattractant protein-1) inducidos por albúmina y profibróticos (procollagen-Ialpha1) inducidos por el factor de crecimiento transformante (TGF)-beta1 en más del 50% en células tubulares renales (riñón de rata normal-52E). [4] Induce la fosforilación de JNK de forma dosis- y tiempo-dependiente en células A549, induce la fosforilación del factor de transcripción ATF-2 y aumenta la unión a ADN de AP-1. [6] Este agente mejora el crecimiento de las células THP-1 y MV4-11. Aumenta la fosforilación de c-Raf y ERK, sugiriendo que la activación de la vía Ras-Raf-MEK-mitogen-activated protein kinase (MAPK) está implicada en el crecimiento de células de leucemia inducido por este compuesto. [7]

La inhibición de p38 mediante la administración de SB202190 inhibe la formación de ampollas inducida por IgG de PV en el modelo de ratón de transferencia pasiva. [5] En el modelo de endotoxina de sepsis, el tratamiento con este compuesto produce un beneficio de supervivencia estadísticamente significativo en comparación con el control. [8]

• Ensayos de quinasas in vitro

  Las p38α y p38β se ensayan en 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, que contiene 0.1 mM EGTA, con proteína básica de mielina (0.33 mg/mL) como sustrato. Los ensayos se realizan manualmente durante 10 minutos a 30 °C en incubaciones de 50 μL usando [γ-³³P]ATP, o con una estación de trabajo de automatización de laboratorio Biomek 2000 en un formato de 96 pocillos durante 40 minutos a temperatura ambiente en incubaciones de 25 μL usando [γ-³³P]ATP. Las concentraciones de ATP y acetato de magnesio son 0.1 mM y 10 mM respectivamente. Todos los ensayos se inician con MgATP. Los ensayos manuales se terminan colocando alícuotas de incubación sobre papel de fosfocelulosa, seguido de inmersión en 50 mM de ácido fosfórico. Los ensayos robóticos se terminan mediante la adición de 5 μL de ácido fosfórico 0.5 M antes de colocar las alícuotas sobre esteras de filtro P30. Todos los papeles se lavan luego cuatro veces en 50 mM de ácido fosfórico para eliminar el ATP, una vez en acetona (incubaciones manuales) o metanol (incubaciones robóticas), y luego se secan y se cuentan para la radioactividad.

• Líneas celulares

  Jurkat, and HeLa

• Concentraciones

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~50 μM

• Tiempo de incubación

  24 hours

• Método

  Cells are serum-starved and then treated with different concentration of SB 202190 for 24 hours. Cell viability is assayed by either trypan blue exclusion or propidium iodide exclusion followed by flow cytometry analysis. The apoptotic nuclei are visualized by H33258 staining.

• Modelos animales

  C57BL/6J mice injected i.d. with a sterile solution of either control IgG or PV IgG

• Dosificaciones

  12.5 μg

• Administración

  Administered via i.d.