Hoja de datos

Descripción biológica

Especificidad	S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Antibody [P14P6] detecta niveles endógenos de la proteína total S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex).
Antecedentes	S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex), también conocida como proteínas relacionadas con mieloides MRP8/MRP14, es un complejo heterodimérico que une Ca²⁺, compuesto por S100A8 y S100A9, ambos miembros de la familia de proteínas S100. Se expresa predominantemente en neutrófilos, monocitos y otras células inmunitarias, y su expresión se induce en condiciones inflamatorias y de estrés. Estructuralmente, cada subunidad contiene dos dominios de unión a Ca²⁺ de tipo EF-hand (un N-terminal de baja afinidad y un C-terminal de alta afinidad) conectados por una región de bisagra, formando heterodímeros estables o tetrámeros funcionales. Funcionalmente, S100A8/A9 desempeña diversas funciones en la inmunidad innata y la inflamación al regular la quimiotaxis de leucocitos, la migración de fagocitos, la polimerización de microtúbulos, la producción de especies reactivas de oxígeno y la liberación de citocinas. También se une a receptores como TLR4 y RAGE, activando vías de señalización posteriores como MAPKs, PI3K/Akt, NF-κB y mTOR. En el cáncer, S100A8/A9 modula el crecimiento tumoral, la metástasis, la apoptosis, la resistencia a fármacos y el pronóstico, lo que lo convierte en un biomarcador y un objetivo terapéutico prometedor.

Especificidad

S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Antibody [P14P6] detecta niveles endógenos de la proteína total S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex).

Antecedentes

S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex), también conocida como proteínas relacionadas con mieloides MRP8/MRP14, es un complejo heterodimérico que une Ca²⁺, compuesto por S100A8 y S100A9, ambos miembros de la familia de proteínas S100. Se expresa predominantemente en neutrófilos, monocitos y otras células inmunitarias, y su expresión se induce en condiciones inflamatorias y de estrés. Estructuralmente, cada subunidad contiene dos dominios de unión a Ca²⁺ de tipo EF-hand (un N-terminal de baja afinidad y un C-terminal de alta afinidad) conectados por una región de bisagra, formando heterodímeros estables o tetrámeros funcionales. Funcionalmente, S100A8/A9 desempeña diversas funciones en la inmunidad innata y la inflamación al regular la quimiotaxis de leucocitos, la migración de fagocitos, la polimerización de microtúbulos, la producción de especies reactivas de oxígeno y la liberación de citocinas. También se une a receptores como TLR4 y RAGE, activando vías de señalización posteriores como MAPKs, PI3K/Akt, NF-κB y mTOR. En el cáncer, S100A8/A9 modula el crecimiento tumoral, la metástasis, la apoptosis, la resistencia a fármacos y el pronóstico, lo que lo convierte en un biomarcador y un objetivo terapéutico prometedor.

Información de uso

Aplicación

IHC

Dilución

IHC

1:1000

Reactividad

Human

Fuente

Mouse Monoclonal Antibody

MW

Tampón de almacenamiento

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

Almacenamiento
(Desde la fecha de recepción)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

Métodos experimentales
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Métodos experimentales

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37701037/

Datos de aplicación

IHC

Validado por Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.