Rimonabant (SR141716)

Rimonabant (SR141716) reduce de forma dosis-dependiente la actividad de la ACAT en macrófagos Raw264.7 con una IC50 de 2,9 μM y en macrófagos peritoneales aislados. Inhibe la actividad de la ACAT en células CHO-ACAT1 y CHO-ACAT2 intactas y en ensayos libres de células con una eficiencia aproximadamente igual, con una IC50 de 1,5 μM y 2,2 μM para CHO-ACAT1 y CHO-ACAT2, respectivamente. De acuerdo con la inhibición de la ACAT, este tratamiento con el compuesto bloquea los procesos dependientes de la ACAT en macrófagos, la apoptosis inducida por oxisterol y la formación de células espumosas inducida por LDL acetilado. [2] Antagoniza los efectos inhibidores de los agonistas del Cannabinoid Receptor tanto en las contracciones del conducto deferente de ratón como en la actividad de la adenilil ciclasa en membranas de cerebro de rata de forma concentración-dependiente. [3] El compuesto reduce significativamente el crecimiento celular e induce la muerte celular de células de cáncer colorrectal humano (DLD-1, CaCo-2 y SW620). Es capaz de alterar la distribución del ciclo celular en todas las líneas celulares probadas. En particular, Rimonabant produce una detención del ciclo celular en G2/M en células DLD-1 sin inducir apoptosis o necrosis. [4]

Rimonabant (SR141716) se administra por vía intraperitoneal u oral y antagoniza potente y dosis-dependientemente los efectos farmacológicos y conductuales clásicos de los agonistas del Cannabinoid Receptor. [3] En el modelo de ratón de carcinogénesis de colon inducida por azoximetano, disminuyó significativamente la formación de focos de criptas aberrantes (ACF), que precede al cáncer colorrectal. [4] Este compuesto (10 mg/kg por sonda) se administra durante 2 semanas a ratas Zucker obesas macho de 3 meses como modelo de intolerancia a la glucosa y durante 10 semanas a ratas Zucker obesas macho de 6 meses como modelo de síndrome metabólico. Los niveles séricos de RANTES (Regulated upon Activation, Normal T cell Expressed, and Secreted) y MCP-1 (proteína quimioatrayente de monocitos-1) aumentan en ratas Zucker obesas en comparación con las delgadas y se reducen significativamente con el tratamiento a largo plazo con este, lo que ralentiza el aumento de peso en ratas con síndrome metabólico. Los neutrófilos y monocitos aumentan significativamente en ratas Zucker obesas jóvenes y viejas en comparación con las delgadas y se reducen con este compuesto. El fibrinógeno unido a plaquetas se mejora significativamente en ratas Zucker obesas en comparación con las delgadas de ambas edades, y se reduce con este. Las plaquetas de ratas obesas son más sensibles a la agregación inducida por trombina y a la adhesión al fibrinógeno, los cuales son atenuados por la terapia con Rimonabant. [5]

• Ensayo de unión a radioligandos

  Se purifican las células HEK 293 transfectadas de forma estable con CB1 y CB2 humanos y la membrana celular. Se incuban 0,2-8 μg de la membrana purificada con 0,75 nM de [³H] CP55,940 y Rimonabant (SR141716) en el tampón de incubación (50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl₂, 1 mM EDTA, 0,3% BSA, pH 7,4). La unión no específica se define en presencia de 1 μM de CP55,940. Las reacciones se incuban durante una hora y media a 30 °C en Multiscreen. Las reacciones se terminan mediante filtración múltiple y se lavan cuatro veces con tampón de lavado helado (50 mM Tris, pH 7,4, 0,25% BSA). La radiactividad unida a los filtros se mide mediante Topcount. La IC50 se determina como la concentración de este compuesto necesaria para inhibir el 50% de la unión de [³H] CP55,940 y se calcula mediante regresión no lineal.

• Líneas celulares

  Raw 264.7 cells

• Concentraciones

  0,1,4 μM

• Tiempo de incubación

  17 hours

• Método

  Raw 264.7 cells (2 × 10⁶ /well) in 12-well plates are rinsed with PBS and refed culture media supplemented with varying amounts of Rimonabant (SR141716). One hour prior to supplementation with 7-ketocholesterol (7KC), this compound is introduced. All wells are adjusted to receive equal amounts of vehicle. Following 16-hour incubation, caspase-3 and caspase 3-like activity are determined using a fluorogenic substrate (Ac-DEVD-AFC) and a spectrofluorometer equipped with a microplate reader.

• Modelos animales

  Male mice and male rats

• Dosificaciones

  20 ml/kg (mice) and 5 ml/kg (rats)

• Administración

  Rimonabant is administered i.p. (30 minutes) or p.o. (1hour) before the i.v. injection of WIN55212-2.