Rhodamine 123

N.º de catálogoS3577 Lote:S357701

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Datos técnicos

Fórmula
C21H17ClN2O3
Peso molecular 380.82 Número CAS 62669-70-9
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 76 mg/mL (199.56 mM)
Ethanol 15 mg/mL (39.38 mM)
Water Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción Rhodamine 123 (RH-123, R-22420) es un dye catiónico fluorescente utilizado para marcar mitochondria en células vivas. Este compuesto inhibe la respiración estimulada por ADP de las mitocondrias con Ki = 12 μM y la actividad ATPase de las vesículas de membrana interna invertidas con Ki de 126 μM y F1-ATPase parcialmente purificada con Ki de 177 μM.
Objetivos
ATPase
(inverted inner membrane vesicles)
F1-ATPase
(Cell-free assay)
126 μM(Ki) 177 μM(Ki)
In vitro

1.Preparación de la solución de trabajo de Rhodamine 123
1.1Preparación de la solución madre
Disolver 1 mg de este compuesto en 525 μL de DMSO para obtener 5 mM de solución madre.
1.2Preparación de la solución de trabajo de este producto químico
Diluir la solución madre en medio de cultivo celular sin suero o PBS para obtener 1-20 μM de solución de trabajo.
Nota: Ajustar la concentración de la solución de trabajo de este compuesto según la situación real.
2.Tinción celular
2.1 Células en suspensión (placa de 6 pocillos)
a.Centrifugar a 1000 g a 4℃ durante 3-5 minutos y luego desechar el sobrenadante. Lavar dos veces con PBS, 5 minutos cada vez. La densidad celular es de 1×106/mL.
b.Añadir 1 mL de solución de trabajo y luego incubar a temperatura ambiente durante 5-30 minutos.
c.Centrifugar a 400 g a 4℃ durante 3-4 minutos y luego desechar el sobrenadante.
d.Lavar dos veces con PBS, 5 minutos cada vez.
e.Resuspender las células con medio de cultivo celular sin suero o PBS. Observación por microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
2.2 Células adherentes
a.Cultivar células adherentes en cubreobjetos estériles.
b.Retirar el cubreobjetos del medio y aspirar el exceso de medio.
c.Añadir 100 μL de solución de trabajo, agitar suavemente para cubrir completamente las células y luego incubar a temperatura ambiente durante 30-60 minutos.
d.Lavar dos veces con medio, 5 minutos cada vez. Observación por microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
Nota: Si la detección es por citometría de flujo, las células deben resuspenderse antes de la tinción.

Protocolo (de referencia)

Ensayo celular:

[2]

  • Líneas celulares

    KBV200 and HCT-8/V cells with or without knockout of ABCB1

  • Concentraciones

    10 μM

  • Tiempo de incubación

    2 h

  • Método

    The cell was seeded into a 6-well plate at a density of 2.5×105 cells/well. After adhered, the cells were then incubated with 10 μM rhodamine 123 or doxorubicin for 2 h at 37°C. After washing three times with ice-cold PBS, cells were analyzed with FCM.

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2873836/
  • https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5040697/

Sellecks Rhodamine 123 Ha sido citado por 1 Publicación

The protective effect of leukemia inhibitory factor on apoptosis of BMSCs induced by hypoxia and serum-deprivation [ Am J Transl Res, 2023, 15(6):4065-4078] PubMed: 37434853

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