AMD3100 (Plerixafor)

Plerixafor (AMD3100) inhibe la quimiotaxis mediada por CXCL12 con una potencia ligeramente superior a su afinidad por CXCR4. [1]

También antagoniza la unión del ligando SDF-1/CXCL12 con una IC50 de 651 nM. Este compuesto inhibe la unión de GTP mediada por SDF-1, el flujo de calcio mediado por SDF-1 y la quimiotaxis estimulada por SDF-1 con una IC50 de 27 nM, 572 nM y 51 nM, respectivamente. No inhibe el flujo de calcio contra células que expresan CXCR3, CCR1, CCR2b, CCR4, CCR5 o CCR7 cuando son estimuladas con sus ligandos cognados, ni inhibe la unión del receptor de LTB4. Por sí solo, no induce un flujo de calcio en las células CCRF–CEM, que expresan múltiples GPCRs, incluyendo CXCR4, CCR4 y CCR7. [2]

En ratones diabéticos, una única aplicación tópica de Plerixafor (AMD3100) promueve la cicatrización de heridas al aumentar la producción de citocinas, movilizando las células EPC de la médula ósea y mejorando la actividad de los fibroblastos y monocitos/macrófagos, aumentando así tanto la angiogénesis como la vasculogénesis. [3]

Se administran PBS, IGF1, PDGF, SCF o VEGF a cohortes de ratones durante cinco días consecutivos y este compuesto el quinto día. El número y tamaño de las colonias son más altos en los ratones inyectados con IGF1 más este compuesto en comparación con los grupos tratados con PDGF, SCF y VEGF, en combinación con Plerixafor. [4]

• Ensayos de unión a receptores

  Para los estudios de unión competitiva contra CXCR4, Plerixafor (AMD3100) se incuba en un rango de concentración durante 3 horas a 4 °C en tampón de unión (PBS que contiene 5 mM de MgCl₂, 1 mM de CaCl₂, 0,25 % de BSA, pH 7,4) con 5 × 10⁵ células CCRF–CEM y 100 pM de ¹²⁵I-SDF-1α (2200 Ci/mmol) en placas de filtro Milipore Durapore^TM. El ¹²⁵I-SDF-1α no unido se elimina lavando con 50 mM de HEPES frío, 0,5 M de NaCl pH 7,4. El ensayo de unión competitiva contra BLT1 se realiza en membranas de células CHO-S que expresan BLT1 recombinante. Las membranas se preparan mediante lisis celular mecánica seguida de centrifugación a alta velocidad, se resuspenden en tampón de 50 mM de HEPES, 5 mM de MgCl₂ y se congelan rápidamente. Este compuesto se incuba con la preparación de membrana durante 1 hora a temperatura ambiente en una mezcla de ensayo que contiene 50 mM de Tris, pH 7,4, 10 mM de MgCl₂, 10 mM de CaCl₂, 4 nM de LTB₄ mezclado con 1 nM de ³H-LTB₄ (195,0 Ci/mmol) y 8 μg de membrana. El ³H-LTB₄ no unido se separa por filtración en placas de filtro Millipore Tipo GF-C.

• Modelos animales

  Twelve-week-old C57BL/6 mice with segmental bone defect

• Dosificaciones

  5 mg/kg

• Administración

  Administered via i.p.