PACAP 1-38

PACAP 1-38 tiene efectos estimuladores potentes, eficaces y sostenidos sobre la producción de NPY neuronal simpático y catecolaminas[1]. Es un neuropéptido pleiotrópico, que exhibe una variedad de acciones biológicas, incluyendo actividades como neurotransmisor, neuromodulador, factor neurotrófico, así como un inmunomodulador, en las células inmunes a través de su efecto sobre la señalización MAPK y la modulación de la activación de NFκB. Este compuesto previene drásticamente el daño de las células cultivadas del túbulo renal proximal causado por las cadenas ligeras del mieloma a través de la supresión de la producción de citoquinas proinflamatorias, al inhibir la p38 MAPK y la translocación de NFκB a través de los receptores PAC1 y VPAC1. Inhibe el crecimiento de las células de mieloma directamente y también puede hacerlo indirectamente al suprimir la producción del factor de crecimiento, IL-6, de las células estromales de la médula ósea, que es estimulada por la adhesión de las células de mieloma. Este neuropéptido suprimió la liberación de IL-6 y TNFα de forma dosis dependiente[2].

PACAP38 es capaz de inhibir la expresión de citocinas inducida por cadenas ligeras con una gran potencia y previno el daño celular resultante in vivo. Sin embargo, este compuesto también se considera un factor autorregulador para ciertos tumores, estimulando su crecimiento de forma autocrina[2].

• Líneas celulares

  human renal proximal tubule cell line

• Concentraciones

  0.0001-100 nM

• Tiempo de incubación

  3 days

• Método

  Human renal proximal tubule cells plated onto 6-well tissue culture plates are grown at 37°C in DRM-23E medium supplemented with 0.5% (vol/vol) FBS in an incubator for 24 hours. After prewashing with serum-free medium, the cells are incubated with κ-LC (1.5 mg/ml, ∼ 50 μM) for 3 days in the presence and absence of various concentrations of PACAP38 as well as kinase and transcription factor inhibitors. Cell viability is determined by trypan blue exclusion assays; in all experiments, at least 85% of cells remain viable. After exposure to test substances, culture supernatants are harvested and stored at –70°C for cytokine assays. After the medium is removed, the cells are washed with ice-cold PBS, and proteins are extracted by lysing cells with Sigma Mammalian Cell Lysis Reagents. Lysates are scraped and passed through a 21-gauge needle to shear DNA, and centrifuged at 12 000g for 10 minutes at 4°C. Finally, supernatants are harvested and used for kinase studies.

• Modelos animales

  Male Sprague-Dawley rats

• Dosificaciones

  2 nmol/10 mL

• Administración

  i.v.