BGT226 (NVP-BGT226) maleate

Los efectos antiproliferativos y proapoptóticos de NVP-BGT226 son independientes del estado bcr-abl. La activación de la cascada de señalización AKT/mTOR es suprimida por NVP-BGT226 de manera dependiente de la concentración y el tiempo. El análisis por citometría de flujo exhibe una acumulación de células en la fase G(0)-G(1) con una pérdida concomitante en la fase S. NVP-BGT226 muestra una potente actividad inhibidora del crecimiento contra todas las líneas celulares probadas, incluyendo las líneas celulares SCC4, TU183 y KB, con una IC50 que oscila entre 7,4 y 30,1 nM. En particular, tanto las células Detroit 562 como las HONE-1, que expresan la mutación PIK3CA H1047R, siguen siendo sensibles al efecto inhibidor del crecimiento del tratamiento con NVP-BGT226. Además, la sensibilidad a NVP-BGT226 entre las células HONE-1. Los resultados del ensayo de marcaje de extremos de rotura de dUTP mediado por desoxinucleotidil transferasa terminal (TUNEL) y el análisis de caspasa 3/7 y PARP indican que NVP-BGT226 induce la muerte de células cancerosas a través de una vía independiente de la apoptosis. NVP-BGT226 induce la autofagia, como lo indican la agregación y la regulación al alza de la cadena ligera 3B-II de la proteína asociada a microtúbulos, y la degradación de p62. El silenciamiento génico de Beclin1 o el cotratamiento del inhibidor del autofagosoma, 3-metiladenina, inhibe la autofagia inducida por NVP-BGT226 y conduce a la recuperación de la supervivencia de la colonia.[2] NVP-BGT226 inhibe el crecimiento en líneas celulares de mieloma comunes y células primarias de mieloma (como las líneas celulares NCI-H929, U266, RPMI-8226 y OPM2 MM) a concentraciones nanomolares de manera dependiente del tiempo y la dosis. NVP-BGT226 inhibe la fosforilación de la proteína quinasa B (Akt), P70S6k y 4E-BP-1 de manera dependiente del tiempo y la dosis. El efecto estimulante del factor de crecimiento similar a la insulina 1, la interleucina-6 y el medio condicionado de las células estromales HS-5 sobre el crecimiento de las células de mieloma es completamente abrogado por NVP-BGT226. La inhibición de la fosfoinositol-3-quinasa/diana de rapamicina en mamíferos por NVP-BGT226 es altamente efectiva, y NVP-BGT226 representa un nuevo candidato potencial para la terapia dirigida en el mieloma múltiple. La inhibición combinada de PI3K y la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR) por NVP-BGT226 ha demostrado ser muy efectiva en términos de inducción de apoptosis e inhibición de la proliferación. [3] En otro estudio, después de 24 horas, el 86,9% de las células MiaPaCa-2 tratadas con 100 nM de NVP-BGT226 se detienen en la fase G0/G1 en comparación con el 55,6% de las células de control. [4]

En un modelo animal de xenoinjerto, NVP-BGT226 retrasa significativamente el crecimiento tumoral de manera dosis-dependiente, junto con una expresión citoplasmática suprimida de p-p70 S6 quinasa y la presencia de formación de autofagosomas. NVP-BGT226 inhibe el crecimiento tumoral de manera dosis-dependiente en un modelo de ratón con xenoinjerto de células FaDu. La administración oral de NVP-BGT226 a 2,5 y 5 mg/kg durante 3 semanas provoca una reducción del 34,7% y 76,1% del crecimiento tumoral el día 21, respectivamente (en comparación con el control). NVP-BGT226 muestra una inhibición comparable contra el crecimiento tumoral a la de la rapamicina. El volumen final de ambos grupos es significativamente menor que el de los tratados con LY294002 (un inhibidor de PI3K) o el control. [2]

• Líneas celulares

  NCI-H929, U266, RPMI-8226 and OPM2 MM cells

• Concentraciones

  20-250 nM

• Tiempo de incubación

  36 hours

• Método

  NCI-H929, U266, RPMI-8226 and OPM2 MM cells are seeded in 96-well plates at a concentration of 1.5 × 10⁴ cells/well in RPMI medium supplemented with 10% fetal bovine serum with or without NVP-BGT226 that is to be tested. After 36 hours, BrdU-labelling solution is added (final concentration: 10 μM), and cells are cultured for another 12 hours in a humidified atmosphere (37 °C/5% CO₂). Then, the plates are centrifuged (10 min, 300 g), and the supernatants are discarded. The plates are dried at 60 °C for 2 hours. After fixation with ethanol/HCl for 30 min at -20 °C, the DNA is partially digested by nuclease treatment for 30 min at 37 °C. The cells are washed three times with medium and incubated with anti-BrdU-POD labelling solution for 30 min at 37 °C. The anti-POD solution is removed and the cells are washed three times with washing buffer. The ABTS substrate solution is added, and absorbance is measured in a microplate reader at 405 nm with a reference wave length of 490 nm.

• Modelos animales

  Human FaDu xenografted mice

• Dosificaciones

  5 mg/kg for 3 weeks

• Administración

  Oral administration