NH125

N.º de catálogoS7436 Lote:S743601

Imprimir

Datos técnicos

Fórmula

C27H45IN2
Peso molecular 524.56 Número CAS 278603-08-0
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (190.63 mM)
Ethanol 100 mg/mL (190.63 mM)
Water Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción NH125 es un inhibidor selectivo de la eEF-2 quinasa con una IC50 de 60 nM, una selectividad >125 veces superior a PKC, PKA y CaMKII, y también un potente inhibidor de la histidina quinasa.
Objetivos
eEF-2 kinase
60 nM
In vitro En células de glioma C6, NH125 disminuye el contenido celular de fosfo-eEF-2 sin afectar el contenido total de eEF-2, y bloquea el tránsito del ciclo celular en el límite G1-S. Este compuesto inhibe potentemente la viabilidad celular de 10 células cancerosas con una IC50 que oscila entre 0,7 y 4,8 μM. Inhibe eficazmente las histidina proteína quinasas, incluyendo Envz, PhoQ, BvgS, EvgS, y por lo tanto produce potentes actividades antibacterianas contra Staphylococcus aureus resistente a oxacilina (ORSA), Enterococcus faecalis resistente a vancomicina (VRE), Streptococcus pneumoniae resistente a penicilina (PRS), y otras bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. La inhibición de EEF2K por este químico hace que las células tumorales sean más sensibles a la curcumina y al velcade, que poseen acción inductora de estrés del RE.
In vivo NH125 reduce la presión arterial en SHR y la producción de ROS, la inducción de moléculas inflamatorias y la hipertrofia en la arteria mesentérica superior de SHR.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:

[1]
  • Ensayo de la eEF-2 Quinasa

    La actividad de la eEF-2 quinasa se mide mediante dos métodos: (a) un ensayo basado en filtro; y (b) por inmunotransferencia utilizando un anticuerpo antifosfo-eEF2. Para ambos, las reacciones se llevan a cabo en 20 μl de volumen total que contiene 50 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 1,5 mM CaCl2, 100 μg/ml de calmodulina, 2 μM de eEF-2 marcado con His y 400 nM de GST-eEF-2 quinasa, y mezcla de ATP [50 μM de ATP con 1 μCi (γ-33P)ATP]. La mezcla de quinasa sin ATP se prepara en hielo y luego se preincuba durante 15 min a temperatura ambiente. Las reacciones de quinasa se inician añadiendo ATP y se dejan progresar a 30°C durante 30 min. Para el ensayo basado en filtro, la reacción se termina añadiendo 20 μl de ácido fosfórico frío al 1,5%, y 5 μl de la reacción se aplican a papel de fosfocelulosa P81 Whatman. El papel se lava tres veces en 500 ml de ácido fosfórico al 0,5% y una vez con 200 ml de acetona. Luego, el papel se seca al aire y se sumerge en 10 ml de mezcla de centelleo. La radioactividad se cuenta usando un contador de centelleo líquido Beckton-Dickinson. Para la inmunotransferencia, las reacciones se detienen añadiendo 20 μl de tampón Lamelli 3× [190 mM Tris (pH 6,8), 6% SDS, 30% glicerol, 15% 2-mercaptoetanol y 0,003% de colorante azul de bromofenol]. Las muestras se hierven durante 5 min y se resuelven mediante SDS-PAGE al 7% y se procesan para Western blotting como se describe a continuación. Las condiciones para ambos ensayos se eligen para asegurar la linealidad de la reacción con respecto al tiempo de incubación y la concentración de la enzima.
Ensayo celular:

[1]
  • Líneas celulares

    C6, T98-G, U-138 MG, U-87 MG, A172, A2780, HeLa, PC3, OVCAR-3, MCF-7 cell lines.

  • Concentraciones

    ~10 μM

  • Tiempo de incubación

    48-72 hours

  • Método

    The viability of cells is measured using an MTT assay. Briefly, 5 × 104 cells are plated in 96-well plates and exposed to various concentrations of this compound for 48–72 h. The formazan product formed after 4 h incubation with MTT is dissolved in 100% DMSO and read at 550 nM using a Dynatech Microplate Reader MR5000.
Estudio en animales:

[4]
  • Modelos animales

    Spontaneously hypertensive rats (SHR)

  • Dosificaciones

    ~500 μg/kg/day

  • Administración

    s.c.

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14583488/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10830522/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23182879/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23812389/

Validación de productos por parte del cliente

MDA-MB-231 or T47D cells were pretreated with 300 nM NH125 for 1 h, followed by treatment with 8 μM TBMS1 for 24 h. The protein levels were measured by Western blot.

Datos de [ , , Acta Pharmacol Sin, 2018, doi：10.1038/s41401-018-0165-9 ]

NH125 sensitizes NPC cells to lapatinib. NPC cells were treated with lapatinib or DMSO for 48 h in the presence or absence of 0.25 μM NH125. Cell viability was assessed by the CCK-8 assay. Results are expressed as means±standard deviation. *, P<0.05;**, P<0.01 and ***, P<0.001.

Datos de [ , , BMC Cancer, 2016, 16(1):813. ]

CNE-2 cultured in medium supplemented with 10% FBS was treated with a series of concentrations of MK-2206 for 72 hours in the presence or absence of 20 μM HCQ and 0.25 μM NH125. Cleaved caspase-3 was measured by Western blotting, and β-actin was used as a loading control.

Datos de [ , , Drug Des Devel Ther, 2018, 12:2655-2663 ]

Sellecks NH125 Ha sido citado por 3 Publicaciones

Tubeimoside-1, a triterpenoid saponin, induces cytoprotective autophagy in human breast cancer cells in vitro via Akt-mediated pathway [Jiang SL Acta Pharmacol Sin, 2018, 10.1038/s41401-018-0165-9] PubMed: 30315250
Inhibiting eEF-2 kinase-mediated autophagy enhanced the cytocidal effect of AKT inhibitor on human nasopharyngeal carcinoma [Zhao YY Drug Des Devel Ther, 2018, Drug Des Devel Ther] PubMed: 30214154
Inhibition of eEF-2 kinase sensitizes human nasopharyngeal carcinoma cells to lapatinib-induced apoptosis through the Src and Erk pathways [Liu L, et al. BMC Cancer, 2016, 16(1):813] PubMed: 27756261

POLÍTICA DE DEVOLUCIÓN
La Política de Devolución Incondicional de Selleck Chemical garantiza una experiencia de compra en línea fluida para nuestros clientes. Si no está satisfecho con su compra de alguna manera, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 7 días posteriores a su recepción. En caso de problemas de calidad del producto, ya sean problemas relacionados con el protocolo o con el producto, puede devolver cualquier artículo(s) dentro de los 365 días a partir de la fecha de compra original. Siga las instrucciones a continuación al devolver productos.

ENVÍO Y ALMACENAMIENTO
Los productos Selleck se transportan a temperatura ambiente. Si recibe el producto a temperatura ambiente, tenga la seguridad de que el Departamento de Inspección de Calidad de Selleck ha realizado experimentos para verificar que la colocación a temperatura normal durante un mes no afectará la actividad biológica de los productos en polvo. Después de la recogida, guarde el producto de acuerdo con los requisitos descritos en la hoja de datos. La mayoría de los productos Selleck son estables en las condiciones recomendadas.

NO PARA USO HUMANO, DIAGNÓSTICO VETERINARIO O TERAPÉUTICO.