Neratinib (HKI-272)

N.º de catálogoS2150 Lote:S215006

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Datos técnicos

Fórmula

C30H29ClN6O3
Peso molecular 557.04 Número CAS 698387-09-6
Solubilidad (25°C)* In vitro DMSO (calentado con baño de agua a 50 ºC) 7 mg/mL (12.56 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Agregue los solventes al producto individualmente y en orden.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa ligeramente soluble o insoluble.
* Tenga en cuenta que Selleck prueba la solubilidad de todos los compuestos internamente, y la solubilidad real puede diferir ligeramente de los valores publicados. Esto es normal y se debe a ligeras variaciones entre lotes.
* Envío a temperatura ambiente (Las pruebas de estabilidad demuestran que este producto se puede enviar sin medidas de refrigeración.)

Preparación de soluciones madre

Actividad biológica

Descripción Neratinib es un inhibidor altamente selectivo de HER2 y EGFR con IC50 de 59 nM y 92 nM en ensayos sin células; inhibe débilmente KDR y Src, sin inhibición significativa de Akt, CDK1/2/4, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf y c-Met. Fase 3.
Objetivos
HER2
(Cell-free assay)		 EGFR
(Cell-free assay)		 KDR
(Cell-free assay)		 Src
(Cell-free assay)
59 nM 92 nM 800 nM 1.4 μM
In vitro Neratinib inhibe débilmente las tirosina quinasas KDR y Src con IC50 de 0,8 μM y 1,4 μM, respectivamente, siendo 14 y 24 veces menos activo en comparación con HER2. Este compuesto no muestra actividad contra otras serina-treonina quinasas como Akt, ciclina D1/cdk4, ciclina E/cdk2, ciclina B1/cdk1, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf y Tpl-2, así como la tirosina quinasa c-Met. Inhibe selectivamente la proliferación de células 3T3 transfectadas con HER2 (3T3/neu), así como otras dos células SK-Br-3 y BT474 que sobreexpresan HER-2 con valores de IC50 de 2-3 nM, mostrando una potencia >230 veces mayor en comparación con células 3T3 no transfectadas, así como MDA-MB-435 y SW620 que son negativas para EGFR y HER2. Este químico también inhibe la proliferación de células A431 dependientes de EGFR con una IC50 de 81 nM. Reduce la autofosforilación del receptor HER2 en células BT474 con una IC50 de 5 nM, y la fosforilación de EGFR dependiente de EGF en células A431 con una IC50 de 3 nM. El bloqueo de HER-2 por este compuesto resulta en la inhibición de las vías MAPK y Akt corriente abajo con una IC50 de 2 nM, más potentemente que Trastuzumab. Inhibe la expresión de ciclina D1 y la fosforilación de la producción del gen de susceptibilidad a Rb en células BT474 con una IC50 de 9 nM, lo que lleva a la detención en G1-S y, en última instancia, a una disminución de la proliferación celular.
In vivo La administración oral de Neratinib inhibe significativamente el crecimiento de los xenoinjertos 3T3/neu, con una inhibición del 34%, 53%, 98% y 98% a dosis de 10, 20, 40 y 80 mg/kg/día, respectivamente. De acuerdo con la inhibición de la fosforilación de HER-2 en un 84% dentro de 1 hora de administración a 40 mg/kg/día, este compuesto inhibe el crecimiento de los xenoinjertos BT474 en un 70-82%, 67% y 93% a dosis de 5, 10 y 40 mg/kg/día, respectivamente. También es eficaz contra los xenoinjertos SK-OV-3 con una inhibición del 31% y 85% a 5 y 60 mg/kg/día, respectivamente. Este químico es menos potente contra los xenoinjertos A431 dependientes de EGFR que contra los tumores dependientes de HER-2, con una inhibición del 32% y 44% a 5 y 20 mg/kg/día, respectivamente. Muestra poca actividad contra los xenoinjertos MCF-7 y MX-1 que expresan bajos niveles de HER-2 y EGFR, con solo un 28% de inhibición a 80 mg/kg/día, lo que sugiere que tiene una actividad selectiva para las células que expresan HER-2 o EGFR.

Protocolo (de referencia)

Ensayo de quinasa:[1]
  • Ensayo de autofosforilación sin células mediante fluorometría resuelta en el tiempo

    Neratinib se prepara como reservas de 10 mg/mL en DMSO y se diluye en 25 mM HEPES (pH 7,5; 0,002 ng/mL-20 μg/mL). Fragmentos COOH-terminales recombinantes purificados de HER2 (aminoácidos 676-1255) o del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) (aminoácidos 645-1186) [diluidos en 100 mM HEPES (pH 7,5) y 50% de glicerol] se incuban con concentraciones crecientes de este compuesto en 4 mM HEPES (pH 7,5), 0,4 mM MnCl2, 20 μM de vanadato de sodio y 0,2 mM de DTT durante 15 minutos a temperatura ambiente en placas ELISA de 96 pocillos. La reacción de la quinasa se inicia mediante la adición de 40 μM de ATP y 20 mM de MgCl2 y se deja proceder durante 1 hora a temperatura ambiente. Las placas se lavan y la fosforilación se detecta utilizando anticuerpos antifosfotirosina marcados con europio (15 ng/pocillo). Después de los pasos de lavado y mejora, la señal se detecta utilizando un lector de fluorescencia Victor2 (longitud de onda de excitación 340 nm, longitud de onda de emisión 615 nm). La concentración de este químico que inhibe la fosforilación del receptor en un 50% (IC50) se calcula a partir de las curvas de inhibición.
Ensayo celular:[1]
  • Líneas celulares

    3T3, 3T3/neu, A431, BT474, SK-Br-3, MDA-MB-435, and SW480

  • Concentraciones

    Dissolved in DMSO, final concentrations 0.5 ng/mL-5 μg/mL

  • Tiempo de incubación

    2 or 6 days

  • Método

    Cells are exposed to various concentrations of Neratinib for 2, or 6 days. Cell proliferation is determined using sulforhodamine B, a protein binding dye. Briefly, cells are fixed with 10% trichloroacetic acid and washed extensively with water. Cells are then stained with 0.1% sulforhodamine B and washed in 5% acetic acid. Protein-associated dye is solubilized in 10 mM Tris, and absorbance is measured at 450 nM. The concentration of this compound that inhibits cell proliferation by 50% (IC50) is determined from inhibition curves.
Estudio en animales:[1]
  • Modelos animales

    Female athymic (nude) mice implanted s.c. with 3T3/neu, BT474, MCF-7, or SK-OV-3 cells

  • Dosificaciones

    ~80 mg/kg/day

  • Administración

    Gavage

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15173008/

Validación de productos por parte del cliente

<p>HER2 mutations V777L, D769H, V842I, G309A induce gain-of-function over HER2 WT in MCF10A mammary epithelial cells. B, HER2 WT, L755S, and del.755–759 cells were grown in Matrigel in the presence of DMSO vehicle (0.5%), neratinib (0.5  μmol/L) or gefitinib (0.5  μmol/L). Phase contrast images were obtained as in A. C,  MCF10A-HER2 WT or mutants were seeded in soft agar. After 7 days of growth, they were treated with DMSO vehicle (0.5%), lapatinib (0.5 μmol/L) or neratinib (0.5 μmol/L) for an additional week. Error bars represent 95% highest posterior density intervals. *, Significant difference between the HER2 mutant and HER2 WT; #, the effect of inhibitor treatment was significant (95% highest posterior density interval did not contain 0 for both).  D, photomicrographs of the colonies in soft agar on day 12, magnification ×40. </p>

Datos de [ Cancer Discov , 2013 , 3, 224-37 ]

<p> </p><div>Differential sensitivity of EGFR-mutant glioma and lung cancer cell lines to the irreversible EGFR inhibitors HKI-272 and CI-1033. A, HKI-272 induces cell death in GBM cells with EGFR EC mutation (SKMG3, SF268) but not EGFR wild-type (WT EGFR) cancer cell lines or astrocytes (NHA). Cell death was assessed by trypan blue exclusion after 5 days of inhibitor treatment. Cells lines in black express wild-type EGFR, whereas those in red contain EGFR EC mutations.</div>

Datos de [ Cancer Discov , 2012 , 2, 458-471 ]

<p> </p><div>Differential sensitivity of EGFR-mutant glioma and lung cancer cell lines to the irreversible EGFR inhibitors HKI-272 and CI-1033. C, HKI-272 is more potent than CI-1033 in blocking EGFR phosphorylation in SKMG3 cells with EGFR EC mutation. SKMG3 cells were treated with the indicated doses of CI-1033 or HKI-272, and whole lysates were analyzed by immunoblot with the indicated antibodies.</div>

Datos de [ Cancer Discov , 2012 , 2, 458-471 ]

(C, D) Cells were treated as mentioned above for the indicated times and processed for immunofluorescence experiments with anti-ErbB2 antibody (green). Nuclei were stained with DAPI (blue). Examples of intracellular ErbB2 punctae are indicated with yellow triangles. Scale bar = 10 μm.

Datos de [ , , Cancer Lett, 2016, 382(2):176-185 ]

Sellecks Neratinib (HKI-272) Ha sido citado por 116 Publicaciones

APOBEC3 mutagenesis drives therapy resistance in breast cancer [ Nat Genet, 2025, 57(6):1452-1462] PubMed: 40379787
Sevabertinib, a Reversible HER2 Inhibitor with Activity in Lung Cancer [ Cancer Discov, 2025, 10.1158/2159-8290.CD-25-0605] PubMed: 41090369
Small molecule kinase inhibitor altiratinib inhibits brain cyst forming bradyzoites of Toxoplasma gondii [ J Microbiol, 2025, 63(2):e2409001] PubMed: 40044130
KinoViz: A User-Friendly Web Application for High-Throughput Kinome Profiling Analysis and Visualization in Cancer Research [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-6431257] PubMed: 40630533
Hotspot mutations in HER2 interfaces destabilize structure, causing breast cancer treatment failure [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-5931887] PubMed: 40166021
Proteogenomic analysis dissects early-onset breast cancer patients with prognostic relevance [ Exp Mol Med, 2024, 56(11):2382-2394] PubMed: 39482530
Peptidylarginine deiminase 3 modulates response to neratinib in HER2 positive breast cancer [ Oncogenesis, 2024, 13(1):30] PubMed: 39097594
Patient-derived rhabdomyosarcoma cells recapitulate the genetic and transcriptomic landscapes of primary tumors [ iScience, 2024, 27(10):110862] PubMed: 39319271
Synergistic Effects of Neratinib in Combination With Palbociclib or Miransertib in Brain Cancer Cells [ World J Oncol, 2024, 15(3):492-505] PubMed: 38751701
The Combination of Afatinib With Dasatinib or Miransertib Results in Synergistic Growth Inhibition of Stomach Cancer Cells [ World J Oncol, 2024, 15(2):192-208] PubMed: 38545471

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