Hoja de datos

Descripción biológica

Especificidad	Monocyte + Macrophage Antibody [E17C4] detecta niveles endógenos del antígeno total Monocyte + Macrophage. Este anticuerpo reconoce un antígeno intracelular de macrófagos y monocitos de ratón. Reacciona fuertemente con macrófagos en órganos linfoides de todas las cepas de ratón.
Antecedentes	Los monocitos y macrófagos son componentes esenciales del sistema inmunitario innato, desempeñando un papel central en la iniciación y coordinación de las respuestas inflamatorias. Más allá de impulsar la producción de mediadores inflamatorios y moldear tanto la inmunidad innata como adaptativa, son igualmente críticos para resolver la inflamación y restaurar la homeostasis tisular. La desregulación de su función es, por lo tanto, una característica común en la patogénesis de infecciones crónicas, enfermedades autoinmunes y enfermedades inflamatorias estériles graves. Los monocitos, que representan el 5-10% de los leucocitos circulantes, son células mononucleares derivadas de la médula ósea con una vida útil corta de 1-3 días. En condiciones de estado estacionario, apoyan la homeostasis y conservan la capacidad de diferenciarse en macrófagos tisulares. Durante la inflamación, los monocitos son reclutados activamente a los sitios afectados, donde se diferencian en macrófagos inflamatorios o células dendríticas. Los macrófagos se distribuyen por todos los tejidos del cuerpo y muestran una notable heterogeneidad funcional. Son indispensables para el desarrollo tisular, la vigilancia inmunitaria y el mantenimiento de la homeostasis local. Muchas poblaciones de macrófagos se establecen durante la embriogénesis, originándose a partir de progenitores del saco vitelino o del hígado fetal, y pueden persistir independientemente del reabastecimiento de monocitos en condiciones normales. Por el contrario, los macrófagos en tejidos como la piel, el corazón y el intestino son inicialmente sembrados por progenitores embrionarios, pero son reemplazados rápidamente después del nacimiento por monocitos derivados de células madre hematopoyéticas. Es importante destacar que los macrófagos residentes en los tejidos poseen tanto capacidad proliferativa como potencial de autorrenovación. La activación y polarización de monocitos y macrófagos se desencadena por su reconocimiento de patrones moleculares asociados a patógenos o asociados a daños (PAMPs y DAMPs) a través de receptores de reconocimiento de patrones (PRRs), lo que les permite adaptar sus respuestas a una amplia variedad de señales fisiológicas y patológicas.

Especificidad

Monocyte + Macrophage Antibody [E17C4] detecta niveles endógenos del antígeno total Monocyte + Macrophage. Este anticuerpo reconoce un antígeno intracelular de macrófagos y monocitos de ratón. Reacciona fuertemente con macrófagos en órganos linfoides de todas las cepas de ratón.

Antecedentes

Los monocitos y macrófagos son componentes esenciales del sistema inmunitario innato, desempeñando un papel central en la iniciación y coordinación de las respuestas inflamatorias. Más allá de impulsar la producción de mediadores inflamatorios y moldear tanto la inmunidad innata como adaptativa, son igualmente críticos para resolver la inflamación y restaurar la homeostasis tisular. La desregulación de su función es, por lo tanto, una característica común en la patogénesis de infecciones crónicas, enfermedades autoinmunes y enfermedades inflamatorias estériles graves. Los monocitos, que representan el 5-10% de los leucocitos circulantes, son células mononucleares derivadas de la médula ósea con una vida útil corta de 1-3 días. En condiciones de estado estacionario, apoyan la homeostasis y conservan la capacidad de diferenciarse en macrófagos tisulares. Durante la inflamación, los monocitos son reclutados activamente a los sitios afectados, donde se diferencian en macrófagos inflamatorios o células dendríticas. Los macrófagos se distribuyen por todos los tejidos del cuerpo y muestran una notable heterogeneidad funcional. Son indispensables para el desarrollo tisular, la vigilancia inmunitaria y el mantenimiento de la homeostasis local. Muchas poblaciones de macrófagos se establecen durante la embriogénesis, originándose a partir de progenitores del saco vitelino o del hígado fetal, y pueden persistir independientemente del reabastecimiento de monocitos en condiciones normales. Por el contrario, los macrófagos en tejidos como la piel, el corazón y el intestino son inicialmente sembrados por progenitores embrionarios, pero son reemplazados rápidamente después del nacimiento por monocitos derivados de células madre hematopoyéticas. Es importante destacar que los macrófagos residentes en los tejidos poseen tanto capacidad proliferativa como potencial de autorrenovación. La activación y polarización de monocitos y macrófagos se desencadena por su reconocimiento de patrones moleculares asociados a patógenos o asociados a daños (PAMPs y DAMPs) a través de receptores de reconocimiento de patrones (PRRs), lo que les permite adaptar sus respuestas a una amplia variedad de señales fisiológicas y patológicas.

Información de uso

Aplicación

IHC, FCM

Dilución

Reactividad

Mouse

Fuente

Rat Monoclonal Antibody

MW

Tampón de almacenamiento

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

Almacenamiento
(Desde la fecha de recepción)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

Métodos experimentales
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Métodos experimentales

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Referencias

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35741108/

Datos de aplicación

IHC

Validado por Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse carotid artery tissue with F3741 at 1:100 dilution.