Monastrol

Monastrol no inhibe la progresión a través de las fases S y G2 del ciclo celular ni la duplicación de los centrosomas. El arresto mitótico debido a este compuesto también es rápidamente reversible. También inhibe la formación de husos bipolares en extractos de huevos de Xenopus. Este químico detiene las células en mitosis con husos monoastrales compuestos por una disposición radial de microtúbulos rodeados por un anillo de cromosomas, mientras que no afecta a los microtúbulos en células en interfase o la polimerización de microtúbulos in vitro[1]. La exposición de neuronas simpáticas cultivadas a este compuesto durante unas pocas horas aumenta tanto el número como la tasa de crecimiento de los axones. Con tiempo adicional, las longitudes totales de los axones son indistinguibles de los controles. Las neuronas sensoriales muestran un aumento a corto plazo similar en la tasa de crecimiento axonal. Sin embargo, la exposición prolongada da como resultado axones más cortos, lo que sugiere que las neuronas sensoriales pueden ser más sensibles a los efectos tóxicos del fármaco. No obstante, la salud general de los cultivos es mucho más robusta que la de los cultivos tratados con taxol, un fármaco comúnmente utilizado para la terapia contra el cáncer[2]. En células HeLa, este compuesto activa el punto de control del huso, lo que lleva a un arresto mitótico y apoptosis[3].

• Líneas celulares

  BS-C-1 (monkey epithelial kidney) cells

• Concentraciones

  100 μM

• Tiempo de incubación

  4 h

• Método

  For the double thymidine arrest, exponentially growing BS-C-1 cells are cultured for 16 h in normal growth medium containing 2 mM thymidine. After this, the cells are released into normal growth medium supplemented with 24 μM deoxycytidine for 9 h. The second thymidine block is imposed for 16 h during which the cells were maintained in serum-free medium containing 2 mM thymidine. Finally, the cells are released into normal growth medium containing 24 μM deoxycytidine to which is added either 100 μM monastrol or 0.1% DMSO. To assess the reversibility of the effect of this compound and nocodazole treatment, BS-C-1 cells plated on coverslips are treated for 4 h in normal growth medium containing either 2 μM nocodazole or 100 μM this chemical and then released into normal medium. At the different time points, coverslips are processed for immunofluorescence and the cells in interphase or mitosis are counted and categorized.