Mocetinostat (MGCD0103)

Mocetinostat (MGCD0103) inhibe solo un subconjunto de las nueve HDAC recombinantes humanas, incluidas HDAC1, HDAC2, HDAC3 y HDAC11 a concentraciones nanomolares o micromolares bajas, de manera dependiente de la dosis. Revela la actividad inhibidora más potente contra las enzimas HDAC1 y HDAC2 humanas in vitro, y no inhibe las HDAC de clase II. El grupo amino exocíclico de este compuesto es necesario para la actividad inhibidora de la enzima porque la actividad inhibidora de HDAC contra HDAC1 y HDAC2 se anula completamente con el análogo desamino. Su actividad inhibidora alcanza la meseta máxima a 6 μM, y el pool de enzimas inhibible máximo afectado por MGCD0103 es el 75 % de la actividad enzimática total en las células HCT116, mientras que NVP-LAQ824 inhibe casi el 100 % de esta en estas células. En las células A549, también exhibe una inhibición dependiente de la dosis de la actividad HDAC en células enteras. [1]

Mocetinostat (MGCD0103) inhibe significativamente el crecimiento de xenoinjertos tumorales humanos en ratones desnudos y la actividad antitumoral se correlacionó con la inducción de la acetilación de histonas en los tumores. La administración P.O. de este compuesto (sal de 2HBr) disminuye significativamente el crecimiento de tumores A549 avanzados implantados en ratones desnudos de manera dosis-dependiente después de 13 días de administración diaria. Este (170 mg/kg para la sal de 2HBr, correspondiente a 120 mg/kg de base libre) bloquea significativamente el crecimiento de los tumores en comparación con el tratamiento con vehículo solo sin cambios en el peso corporal. Además, no reduce los recuentos de glóbulos blancos y es bien tolerado. El compuesto también es activo por vía oral en muchos otros modelos de xenoinjertos tumorales humanos, incluido el CPNM H1437. A 80 mg/kg (base libre), bloquea casi por completo el crecimiento de tumores H1437 después de 13 días de administración p.o. diaria sin reducción del peso corporal en los animales. [1] Reduce la presión arterial pulmonar de manera más dramática. Además, este compuesto mejora el tiempo de aceleración de la arteria pulmonar y reduce la muesca sistólica de la envolvente del flujo de la arteria pulmonar, lo que sugiere un impacto positivo del inhibidor de HDAC en la remodelación y el endurecimiento vascular pulmonar. [2]

• Ensayo enzimático de HDAC in vitro

  El ensayo enzimático de desacetilasa se basa en un ensayo homogéneo de liberación de fluorescencia. Las enzimas HDAC recombinantes purificadas se incuban con Mocetinostat (MGCD0103) diluido en varias concentraciones durante 10 minutos en tampón de ensayo [25 mM HEPES (pH 8.0), 137 mM NaCl, 1 mM MgCl₂, 2.7 mM KCl] a temperatura ambiente. El sustrato Boc-Lys(ε-Ac)-AMC se añade a la reacción para una incubación posterior a 37 °C. La concentración del sustrato y el tiempo de incubación varían para los diferentes isotipos de enzimas HDAC. Una incubación con tripsina de 20 minutos a temperatura ambiente permite la liberación del fluoróforo del sustrato desacetilado. La señal fluorescente se detecta mediante fluorómetro a una excitación de 360 nm, una emisión de 470 nm y un corte a 435 nm.

• Líneas celulares

  Human mammary epithelial cells (HMEC), human foreskin fibroblasts (MRHF) cells

• Concentraciones

  0-60 μM

• Tiempo de incubación

  72 hours

• Método

  Human mammary epithelial cells (HMEC) and human foreskin fibroblasts (MRHF) cells in 96-well plates are incubated with Mocetinostat (MGCD0103) at various concentrations for 72 hours at 37 °C in 5% CO₂. MTT is added at a final concentration of 0.5 mg/ml and incubated with the cells for 4 hours before an equal volume of solubilization buffer is added. After overnight incubation, solubilized dye is quantified by reading at 570 nm using a reference at 630 nm. Absorbance values are converted to cell numbers according to a standard growth curve of the relevant cell line. The concentration which reduces cell numbers to 50% relative to DMSO-treated cells is determined as MTT IC5

• Modelos animales

  Female CD-1 nude mice bearing H1437 tumors

• Dosificaciones

  80 mg/kg

• Administración

  Administered via p.o.