MCP1 Antibody [M3B19]

N.º de catálogo F3225

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Descripción biológica

Especificidad

MCP1 Antibody [M3B19] detecta niveles endógenos de proteína MCP1 total.
Antecedentes La proteína quimioatrayente de monocitos-1 (MCP-1/CCL2) es un miembro de la familia de quimiocinas C-C y funciona como un potente factor quimiotáctico para los monocitos. Se considera idéntica a JE, un gen identificado originalmente en fibroblastos de ratón como inducido por el factor de crecimiento derivado de plaquetas. El gen humano MCP-1 está localizado en el cromosoma 17q11.2 y codifica una proteína de 76 aminoácidos con un peso molecular de aproximadamente 13 kDa. MCP-1 pertenece a una subfamilia de quimiocinas que incluye al menos cuatro miembros: MCP-1, MCP-2, MCP-3 y MCP-4. CCL2 es producido por una amplia variedad de tipos celulares, ya sea constitutivamente o en respuesta a estímulos como el estrés oxidativo, citoquinas y factores de crecimiento. Sus fuentes incluyen células endoteliales, fibroblastos, células epiteliales, células musculares lisas, células mesangiales, astrocitos, monocitos y microglía, tipos celulares que desempeñan papeles importantes en la defensa inmunitaria antiviral tanto en la circulación como en los tejidos. Funcionalmente, CCL2 dirige la migración e infiltración de monocitos, células T de memoria y células asesinas naturales (NK). Los efectos biológicos de CCL2 están mediados a través de su receptor, CCR2, cuya expresión es más restringida en comparación con la de CCL2. CCR2 existe en dos isoformas empalmadas alternativamente, CCR2A y CCR2B, que difieren solo en sus regiones C-terminales.

Información de uso

Aplicación IHC Dilución
Reactividad Mouse
Fuente Rat Monoclonal Antibody MW 11 kDa
Tampón de almacenamiento PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
Almacenamiento
(Desde la fecha de recepción)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
Experimental Protocol：
 
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
 
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
 

Referencias

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19441883/

Datos de aplicación

IHC

Validado por Selleck

  • F3225-IHC1
    Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse testicles tissue with F3225 at 1:10 dilution.