Prexasertib (LY2606368) Dihydrochloride

En estudios no clínicos, Prexasertib HCl (LY2606368) indujo daño en el ADN medido por la catástrofe de replicación y aumentos en pH2A.X, un marcador de roturas de ADN de doble cadena[1]. El tratamiento de las células con este compuesto resulta en la aparición rápida de roturas de ADN de doble cadena positivas para TUNEL y pH2AX en la población de células en fase S. En un ensayo funcional, abrogó potentemente el punto de control G2-M activado por doxorrubicina en células HeLa deficientes en p53 con una EC50 de 9 nmol/L. Fue ampliamente antiproliferativo con valores de IC50 típicamente <50 nmol/L en las líneas celulares más sensibles, con una minoría de líneas celulares que mostraron una resistencia considerable con IC50's >1.000 nmol/L. Este compuesto requiere CDC25A y CDK2 para causar daño en el ADN[2].

Prexasertib HCl (LY2606368) inhibió el crecimiento tumoral en xenoinjertos de cáncer como monoterapia y en combinación con otros agentes[1]. En un modelo de cáncer de ovario ortotópico SKOV3, se demostró que inhibía el crecimiento de tumores primarios y reducía significativamente la incidencia de metástasis y acumulación de ascitis. Este compuesto también demostró eficacia en un modelo de cáncer de páncreas ortotópico SW1990, lo que resultó en una inhibición del 92% del crecimiento del tumor primario y la eliminación de metástasis en los ganglios linfáticos, el bazo y el intestino[3].

• Líneas celulares

  HeLa cells

• Concentraciones

  33 or 100 nmol/L

• Tiempo de incubación

  12 h

• Método

  HeLa cells were plated onto T25 flasks and allowed to recover for 24 hours. Prexasertib HCl (LY2606368) was then added to give final concentrations of 33 or 100 nmol/L. In some experiments, 20μmol/L Z-VAD-FMK was included during the drug treatment. Cells were treated for 12 hours, and during the last 2 hours, Colchisol was added to 1 μg/mL. Fixation of nuclei for metaphase spreads was done following the method of Bayani and Squire. Chromosome spreads were done. A 12-μL volume of cell suspension in 3:1 methanol/acetic acid fixative was dropped from a height of 3 cm onto dry glass slides or coverslips. The slides were then heated for 45 seconds on a 43°C metal block, before being removed to allow drying to complete at room temperature. Coverslips were mounted on slides with Vectashield Hard Set mounting medium with DAPI. Slides were examined with a Leica DMR fluorescence microscope and images were captured using a SPOT RT3 Slider camera.

• Modelos animales

  Female CD-1 nu-/nu- mice

• Dosificaciones

  15 mg/kg

• Administración

  s.c.