CC-5013 (Lenalidomide)

La lenalidomida induce fuertemente la producción de IL-2 y sIL-2R. Esta fosforilación de tirosina de CD28 en células T, inducida por el compuesto, es seguida por una activación posterior de NF-κB. [2]

Este compuesto y la pomalidomida inhiben la autoubiquitinación de CRBN en células HEK293 T que expresan CRBN de tipo salvaje competente para la unión a la talidomida, pero no CRBN(YW/AA) defectuoso en la unión a la talidomida. La sobreexpresión de la proteína CRBN de tipo salvaje, pero no de la proteína mutante CRBN(YW/AA), en células de mieloma KMS12, amplifica las reducciones mediadas por la pomalidomida en la expresión de c-myc e IRF4 y aumenta la expresión de p21(WAF-1). La selección a largo plazo para la resistencia a este compuesto en líneas celulares de mieloma H929 se acompaña de una reducción en CRBN, mientras que en células de mieloma DF15R resistentes tanto a la pomalidomida como a este químico, la proteína CRBN es indetectable. [3]

Este químico previene la inducción de defectos al regular a la baja la expresión de moléculas inhibidoras de células tumorales. Previene la inducción de disfunción sináptica lítica de células T inducida por tumores. El tratamiento con este compuesto bloquea la disfunción sináptica de actina de células T inducida por células de LLC, imita el bloqueo de anticuerpos y regula a la baja la expresión de ligandos inhibidores de LLC y sus receptores en células T. Este tratamiento previene la inmunosupresión inducida por tumores en FL, DLBCL, HL, MM, SCC y OC y regula a la baja la expresión de ligando inmunosupresor en todas las células tumorales examinadas. La función de muerte de CTL aumenta significativamente después del bloqueo de anticuerpos de ligandos inhibidores de LLC o el tratamiento con este químico en comparación con los tratamientos de control. El tratamiento de cocultivos de células T de LLC autólogos con este agente revierte la formación de sinapsis lítica de células T CD8⁺ y el tráfico de granzima B. [4]

La inducción de angiogénesis por bFGF es significativamente inhibida por el tratamiento oral de Lenalidomide de manera dosis-dependiente. Este compuesto disminuye significativamente el porcentaje de área vascularizada del 5,16 % (grupo control) al 2,58 % (50 mg/kg). Reduce significativamente el MVL total calculado de 21,07 (control) a 8,11 (50 mg/kg). Este químico inhibe significativamente la migración de HUVEC a través de las membranas recubiertas de fibronectina hacia 0,1 ng/mL de bFGF a 100 μM, 1 ng/mL de VEGF a concentraciones de 10 μM y 100 μM. [5]

• Ensayo de inhibición de la síntesis de TNF por PBMC humanas

  Las PBMC humanas de donantes normales se obtienen mediante centrifugación en gradiente de densidad de Ficoll-Hypaque. Las células (10⁶ células/mL) se cultivan en RPMI suplementado con 10 suero AB+, 2 mM de l-glutamina, 100 U/mL de penicilina y 100 μg/mL de estreptomicina. La lenalidomida se disuelve en DMSO a 20 mg/mL; la dilución posterior se realiza con medio de cultivo. La concentración final de DMSO en todos los ensayos, incluidos los controles, es del 0,25 %. Este compuesto se añade a las células 1 hora antes de la adición de LPS. Las PBMC (10⁶ células/mL) se estimulan con 1 μg/mL de LPS de Salmonella minnesota R595. Las células, por triplicado, se incuban con LPS durante 18-20 horas a 37 °C en 5 % de CO₂. Los sobrenadantes se recolectan y se analizan para determinar los niveles de citocinas. En algunos experimentos, los sobrenadantes se mantienen congelados a -70 °C hasta su uso. La viabilidad celular se analiza mediante el método de exclusión del colorante azul de tripano. La concentración de TNFα en los sobrenadantes de cultivo se determina mediante ELISA. Este químico se ensaya en un mínimo de tres experimentos separados. El porcentaje de inhibición se determina como 100 × [1 - (citocina(experimental)/citocina(control))].

• Modelos animales

  Adult male Sprague-Dawley rats bearing HUVECs cells

• Dosificaciones

  50 mg/kg and 250 mg/kg

• Administración

  Administered via i.p.