ICG-001

ICG-001 no tiene efecto sobre el constructo reportero relacionado, FOPFLASH, que contiene sitios TCF mutados. Después del tratamiento con 25 μM de este compuesto durante 8 horas, las células SW480 reducen los niveles de estado estacionario de ARN y proteína de Survivina y Ciclina D1, los cuales pueden ser regulados al alza por β-catenina. Este compuesto induce selectivamente la apoptosis en células transformadas pero no en células normales de colon, reduce el crecimiento in vitro de células de carcinoma de colon. [1] Puede rescatar fenotípicamente la diferenciación neuronal inducida por el factor de crecimiento nervioso (NGF) normal y el crecimiento de neuritas en las células mutantes de presenilina-1, enfatizando la importancia de la vía de señalización TCF/β-catenina en el crecimiento de neuritas y la diferenciación neuronal. [2] Un estudio reciente demuestra que 5 μM de esta sustancia química inhibe la EMT, la invasión y la formación de tumoresferas inducidas por leptina en células MCF7. [3]

La administración de un análogo hidrosoluble de ICG-001 durante 9 semanas reduce la formación de pólipos de colon e intestino delgado en un 42%, tan eficazmente como el agente antiinflamatorio no esteroideo, que ha demostrado consistentemente su eficacia en este modelo. No se detecta toxicidad manifiesta durante el curso del tratamiento. En el modelo de xenoinjerto de ratón nude SW620 de regresión tumoral, 150 mg/kg, i.v. de este compuesto demuestra una reducción dramática en el volumen tumoral durante el curso de tratamiento de 19 días, sin mortalidad ni pérdida de peso. [1] Este químico (5 mg/kg por día) inhibe significativamente la señalización de beta-catenina y atenúa la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina en ratones, mientras que simultáneamente preserva el epitelio. [4]

• Ensayo de Luciferasa Dual como Reportero

  El sistema de ensayo de reportero de luciferasa dual (DLR) proporciona un medio eficiente para realizar ensayos de doble reportero. En el ensayo DLR^TM, las actividades de las luciferasas de luciérnaga (Photinus pyralis) y Renilla (Renilla reniformis, también conocida como pluma de mar) se miden secuencialmente a partir de una única muestra. El reportero de luciferasa de luciérnaga se mide primero añadiendo el reactivo de ensayo de luciferasa II (LAR II) para generar una señal luminiscente de tipo “brillo”. Después de cuantificar la luminiscencia de la luciérnaga, esta reacción se extingue y la reacción de la luciferasa de Renilla se inicia añadiendo simultáneamente el reactivo Stop & Glo® al mismo tubo. El reactivo Stop & Glo® también produce una señal de tipo “brillo” de la luciferasa de Renilla, que disminuye lentamente durante la medición. En el sistema de ensayo DLR^TM, ambos reporteros producen ensayos lineales con sensibilidades subattomol (<10-18) y sin actividad endógena de ninguno de los reporteros en las células huésped experimentales. Además, el formato integrado del ensayo DLR^TM proporciona una cuantificación rápida de ambos reporteros, ya sea en células transfectadas o en reacciones de transcripción/traducción sin células.

• Líneas celulares

  Human colon carcinoma cell lines SW480, SW620, and HCT116, normal colonic epithelial cell line CCD-841Co

• Concentraciones

  ~25 μM

• Tiempo de incubación

  24 hours

• Método

  1. Prior to starting the assay, prepare the Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent, and mix thoroughly. 2. For best results, empirical determination of the optimal cell number, apoptosis induction treatment and incubation period for the cell culture system may be necessary. 3. Use identical cell numbers and volumes for the assay and the negative control samples. 4. Do not mix Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent and samples by manual pipetting. Mixing in this manner is unnecessary and may create bubbles that interfere with fluorescence readings or cross-contaminate the samples. Gentle mixing may be performed using a plate shaker. 5. Total incubation time for the assay depends upon the amount of caspase- 3/7 present in the sample. 6. The Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent is formulated to mediate cellular lysis and support optimal caspase-3/7 activity. In rare instances, the reagent does not affect complete lysis of cultured cells. In such cases, lysis is enhanced by a freeze-thaw cycle. For best results, freeze at -70 °C, then thaw at room temperature. After equilibration, mix to homogeneity and incubate until measurable fluorescence is achieved

• Modelos animales

  C57BL/6 and nude mice tumor models

• Dosificaciones

  20 mg/ kg

• Administración

  i.p.